HSPCO11和HSPCO16基因在毛乳頭細胞的表達及其生物學(xué)功能的研究.pdf

1、在該研究中,我們首先從人頭皮毛囊分離培養(yǎng)成人和胎兒毛乳頭細胞,這些細胞具有周期性凝集性生長特性,而且這種特性隨著傳代次數(shù)的增多而逐步喪失.凝集性生長作為毛乳頭細胞的固有特性與其生物學(xué)功能密切相關(guān).然后我們應(yīng)用原位雜交技術(shù)證實了HSPCO11和HSPCO16基因在凝集性生長的成人毛乳頭細胞和胎兒毛乳頭細胞均表達,而二者在傳代后失去凝集性生長特性的人毛乳頭細胞和人真皮成纖維細胞均不表達,這些結(jié)果表明HSPCO11和HSPCO16為凝集性生長

2、毛乳頭細胞的特異性表達基因,其表達可能與毛乳頭細胞的凝集性生長等生物學(xué)特征有關(guān).應(yīng)用RT-PCR技術(shù),我們從凝集性生長的人毛乳頭細胞RNA中擴增到分子量約為430bp的HSPCO11基因開放閱讀框cDNA序列,并構(gòu)建了其真核表達重組質(zhì)粒pCI-neo/HSPCO11,通過酶切分析和測序鑒定,RT-PCR所克隆的cDNA與GenBank中相應(yīng)HSPCO11基因序列完全吻合.這些研究結(jié)果進一步證明了HSPCO11基因在凝集性生長的人毛乳頭細

3、胞特異性表達,其表達可能與毛乳頭細胞的凝集性生長、毛囊生長周期的調(diào)控等生物學(xué)功能有關(guān).而RT-PCR不能對HSPCO11基因進行克隆,HSPCO16基因開放閱讀框cDNA序列(約200bp)的克隆使用了基因合成技術(shù),所合成的cDNA在真核表達載體pcDNA3.1(+)進行定向克隆,酶切分析和測序鑒定表明所克隆的cDNA與GenBank中相應(yīng)HSPCO16基因序列完全吻合.通過以上研究,我們確定了HSPCO11和HSPCO16基因在凝集性