艱難梭菌毒素A功能區(qū)基因的克隆、表達及其生物學特性.pdf

1、目的:艱難梭菌(Clostridium difficile,CD)是醫(yī)院內腸道感染的主要致病菌.約25﹪的抗生素相關性腹瀉(Antibiotic-associated diarrhea,AAD)、75﹪的抗生素相關性腸炎(Antibiotic-associated colitis,AAC)和近100﹪的偽膜性腸炎(Pseudomembranous colitis,PMC)由此菌引起,統(tǒng)稱為艱難梭菌相關性疾病(Clostridium di

2、fficile-associated diseases,CDAD).CD的臨床檢測方法主要有糞便標本的細菌B毒素細胞學鑒定(金標準),細菌培養(yǎng),ELISA法檢測艱難梭菌毒素A(cdtA);前兩者所需的條件較高,時間較長;后者敏感性不高且有假陰性,不能及時有效地指導臨床治療.幾乎所有抗生素包括萬古霉素,甚至一些腫瘤化療藥均可引起CDAD,因而,抗生素治療CDAD也存在加重疾病的問題.CDAD首選治療是口服甲硝唑或萬古霉素,重癥患者萬古霉素

3、是目前唯一有效的藥物,但停藥2-8周后易復發(fā),復發(fā)率為20﹪,近年來已經(jīng)發(fā)現(xiàn)艱難梭菌帶有多種抗生素耐藥基因,特別是臨床已經(jīng)分離出同時耐甲硝唑和萬古霉素的菌株,預示在不遠的將來這引起抗生素將對艱難梭菌無效.該實驗目的在于尋求防治CDAD的疫苗,同時探尋一種能快速檢測CD的方法.結論:1、通過基因重組,克隆并表達了cdtA膜受體結合蛋白,此重組蛋白具有良好的抗原性且無毒性.可作為基因工程重組疫苗,此外,重組蛋白還可作為檢測抗原,用于臨床檢測