劍麻斑馬紋病病原生物學(xué)及rDNA-ITS序列分析.pdf

1、龍舌蘭麻，俗稱劍麻，是我國(guó)和世界熱帶、南亞熱帶地區(qū)最重要的纖維作物。劍麻斑馬紋病是當(dāng)前影響我國(guó)劍麻生產(chǎn)最嚴(yán)重的病害。 該病由煙草疫霉菌(PhytophthoranicotianaeBreda)引起?？稍斐芍猜閰^(qū)麻田早期大量缺株，劍麻生產(chǎn)受到重創(chuàng)，產(chǎn)量大幅降低。因此摸清劍麻斑馬紋病病原的遺傳類型、致病類型對(duì)劍麻抗病育種制定正確的育種目標(biāo)、鑒定篩選育種材料和生產(chǎn)上進(jìn)行病害防治及預(yù)測(cè)均具有重要的意義。 本研究的內(nèi)容和結(jié)果主要包

2、括以下五個(gè)方面： 1、對(duì)海南、廣東、廣西三省區(qū)主要?jiǎng)β楫a(chǎn)區(qū)的斑馬紋病調(diào)查表明，三省區(qū)均有斑馬紋病發(fā)生，其中以廣東發(fā)病率和病情最嚴(yán)重，海南最輕。通過(guò)采集病樣，進(jìn)行分離純化培養(yǎng)，共獲得病原菌株117個(gè). 2、對(duì)病原生物學(xué)特性的初步觀察表明：所有參試菌株之間菌落、分生孢子形態(tài)及其大小總體變化幅度不大；病原菌的最適生長(zhǎng)溫度為24～28℃，pH為6.0～7.0，光照為24h連續(xù)光照，濕度為90％～95％，培養(yǎng)基為CA培養(yǎng)基。

3、 3、致病力測(cè)定試驗(yàn)結(jié)果表明，各參試菌株均能在劍麻葉片上引起斑馬紋病的典型癥狀。各菌株的潛伏期為1～3d。嚴(yán)重在各菌株之間差異較大，刺傷處理72h，病斑擴(kuò)展平均直徑最長(zhǎng)的菌株為CH0025，直徑長(zhǎng)度為3.6cm，說(shuō)明其致病力最強(qiáng)：平均直徑最短的菌株為CH0055，直徑長(zhǎng)度只有0.3cm，說(shuō)明其致病力最差；菌株致病力存在著顯著差異，這說(shuō)明參試菌株之間存在著小種致病力變異。 4、對(duì)5種藥劑的敏感性比較。采用菌落生長(zhǎng)速率測(cè)定法，在室

4、內(nèi)測(cè)定了參試菌株對(duì)甲霜靈、疫霜靈、乙膦鋁、代森錳鋅、敵克松共5種藥劑的敏感性。結(jié)果表明：不同菌株對(duì)同一種藥劑或相同菌株對(duì)不同藥劑的敏感性均不相同。其中，參試菌株對(duì)乙膦鋁和疫霜靈這兩種藥劑的敏感性較高，其EC50分別在0.4339～0.6520μg/mL、0.8118～0.9285μg/mL之間，敵克松和代森錳鋅次之，其EC50分別為2.1797～3.1036μg/mL、3.3018～4.1643μg/mL之間；而甲霜靈則最低，其EC50

5、在13.4073～28.3130μg/mL之間。 5、參試菌株的rDNA-ITS區(qū)序列分析。擴(kuò)增了12個(gè)參試菌株的rDNA-ITS，并測(cè)序和利用序列信息聚類分析以及在計(jì)算機(jī)網(wǎng)絡(luò)上與數(shù)據(jù)庫(kù)的序列進(jìn)行比對(duì)。結(jié)果表明：12個(gè)參試菌株的ITS長(zhǎng)度(ITS1-ITS4)均為900bp左右，經(jīng)在NCBI網(wǎng)站的blast比對(duì)分析，結(jié)果表明12個(gè)參試菌株均為煙草疫霉菌。參試菌株在序列同源性為38％被聚為兩個(gè)類群，供試菌株間存在兩個(gè)差異明顯的遺傳