腸道桿菌—病原生物學(xué)

1、腸道桿菌,,腸道桿菌(enteric bacilli),一大群居住在人和動(dòng)物腸道中 生物學(xué)性狀近似的革蘭陰性短小桿菌,廣布于自然界,多數(shù)是腸道的正常菌群,屬于腸桿菌科，至少有30個(gè)菌屬，120個(gè)以上的菌種,少數(shù)為致病菌，是腸道傳染病的最重要病原菌,,,,,,常居菌,大腸桿菌屬變形桿菌屬腸桿菌屬,機(jī)會(huì)致病菌(一般不致病),致病菌,沙門氏菌屬志賀氏菌屬,二大致病菌(腸道傳染病),,,,,腸道桿菌(enteri

2、c bacilli),腸桿菌科中與醫(yī)學(xué)有關(guān)的常見菌屬,埃希菌屬 大腸桿菌 志賀菌屬 痢疾志賀菌 愛德華菌屬 遲鈍愛德華菌 沙門菌屬 傷寒沙門菌 枸櫞酸菌屬 佛勞第枸櫞酸菌 克雷伯菌屬 肺炎克氏菌 腸桿菌屬 產(chǎn)氣桿菌

3、 哈夫尼亞菌屬 蜂窩哈夫尼亞菌 沙雷菌屬 粘質(zhì)沙雷菌 變形桿菌屬 普通變形桿菌 摩根菌屬 摩氏摩根菌 普羅威登斯菌屬 雷氏普羅威登斯菌 耶爾森菌屬 鼠疫耶爾菌 歐文菌屬 草原居民歐文菌,菌屬 代表種,,,,腸

4、道桿菌共同特性,1、相似的形態(tài)染色,2、簡(jiǎn)單的培養(yǎng)條件,兼性厭氧/需氧、普通培養(yǎng)基 中等大小、灰白色、濕潤(rùn)、光滑菌落,3、活潑的生化反應(yīng),乳糖分解試驗(yàn),,初步鑒別腸道致病菌和腸道非致病菌,腸道致病菌,腸道非致病菌,多數(shù)不分解乳糖,多數(shù)分解乳糖,,,腸道桿菌IMViC試驗(yàn)特性,吲哚 甲基紅 V-P 枸櫞酸鹽埃希菌屬 + +

5、 — —沙門菌屬 — + — +志賀菌屬 +/— + — —克雷伯菌屬 — +/— +/— +/—

6、 變形桿菌屬 +/— + —/+ —/+,,,,,,,,,,,,,,,H抗原(鞭毛),O抗原(LPS側(cè)鏈),K抗原或Vi(莢膜),,,,,,,,,,,,,,,,F抗原(菌毛),,4、復(fù)雜的抗原構(gòu)造,O--Ag：耐熱的菌體抗原,LPS,O特異多糖,核心多糖,類脂A,,是細(xì)胞壁內(nèi)毒素,,S R變異,,H--Ag：鞭毛抗原，

7、不耐熱,表面抗原：如K--Ag 、Vi--Ag ，不耐熱菌毛抗原：菌毛蛋白，不耐熱,ECA ：腸道桿菌共同抗原 為L(zhǎng)PS成分之一，腸桿菌科細(xì)菌有，在鑒定分類中有意義,H O 變異,,5、不強(qiáng)的抵抗力,弱、60 ℃ 30min水（冰）中生存期較長(zhǎng)化學(xué)消毒劑敏感,6、易變異,S-R變異： 光滑-粗糙 （毒力下降）H-O變異： 鞭毛脫落，O抗原外露（動(dòng)力消失）毒力變異耐藥性變異,腸桿菌科的

8、細(xì)菌引起不同部位感染,中樞神經(jīng)系統(tǒng)（埃希菌屬）,,下呼吸道（克雷伯菌屬、腸桿菌屬、埃希菌屬 ）,血液（埃希菌屬 、克雷伯菌屬、腸桿菌屬）,,胃腸道（埃希菌屬 、沙門菌屬、志賀菌屬、耶爾森菌屬）,泌尿道（埃希菌屬 、變形桿菌屬、克雷伯菌屬、摩根菌屬）,,,,,,第一節(jié) 埃希氏菌屬 Escherichine,§是人類和動(dòng)物腸道中的正常菌群,§出生后數(shù)小時(shí)就進(jìn)入腸道

9、，并終生伴隨,§以大腸埃希氏菌（E.coli）最為重要,大腸埃希菌,正常菌群，一般不致病,條件致病,某些帶有致病基因的血清型，引起腸道感染,細(xì)菌居住部位改變引起的腸外感染：,尿路感染最常見,致病菌株,在衛(wèi)生學(xué)上的意義,大腸埃希菌,埃希菌屬的生物學(xué)特性,一、培養(yǎng)特性二、抗原結(jié)構(gòu)三、抵抗力四、分類,培養(yǎng)特性,1、兼性厭氧2、普通培養(yǎng)基,麥康凱培養(yǎng)基,主要生化特性 葡乳麥甘蔗 尿素 H2S IMViC 動(dòng)力

10、 ⊕⊕⊕⊕⊕ - - + + - - +,,乳糖分解實(shí)驗(yàn),大腸桿菌,（—）,,,（—）,抗原結(jié)構(gòu),1、O抗原 近170種（為血清學(xué)分型依據(jù)）2、 H抗原 近60種3、 K抗原 近100種,抵抗力,1、較強(qiáng) （水中數(shù)周-數(shù)月）2、耐熱 （60 ℃ 15min）3、抗菌素敏感，但易產(chǎn)生耐藥性4、膽鹽、煌綠染料等敏感,分類,1、按抗原差異分類（血清學(xué)類型）：O：K：H 例：O11

11、1：K58：H22、按引起疾病分類（致病性類型）： ETEC 腸產(chǎn)毒型 EIEC 腸侵襲型 EPEC 腸致病型 EHEC 腸出血型 O157 EAEC 腸集聚型,,大腸埃希菌的致病性,一、致病物質(zhì)二、所致疾病三、免疫性,黏附因子（定居因子）——特殊菌毛 ——強(qiáng)大的黏附功能外毒素：不耐熱腸毒素（LT）

12、 耐熱腸毒素（ST） Vero毒素—志賀樣毒素（SLT）,致病物質(zhì),腸外感染：尿路感染、腹膜炎、闌尾炎、 新生兒腦膜炎腸內(nèi)感染：ETEC——霍亂樣腹瀉 EIEC——菌痢樣腹瀉 EPEC——嬰幼兒腹瀉 EHEC——溶血

13、性尿毒綜合征 EAEC——嬰幼兒持續(xù)性腹瀉,所致疾病,,,,致病性大腸桿菌引起的腹瀉,腸出血性大腸埃希菌（EHEC）： 血清型O157：H7，5歲以下兒童易感,O157：H7大腸桿菌,Enterohemorrhagic Escherichia coli,腸凝聚性大腸埃希菌(EaggEC）：侵犯嬰兒,所致疾病：引起嬰兒持續(xù)性腹瀉、脫水，偶有血便。,致病物質(zhì),,黏附素：有四種不同形態(tài)

14、的菌毛,Enteroaggregative Escherichia coli,天然免疫：正常菌群獲得性免疫：菌毛抗原可形成同型免疫保護(hù),免疫性,大腸埃希菌感染的診斷與防治,一、微生物學(xué)檢查 二、防治,標(biāo)本類型：中段尿、血液、膿液、 腦脊液、糞便檢測(cè)方法：腸外感染：涂片鏡檢、分離鑒定 細(xì)菌總數(shù)計(jì)數(shù)腸內(nèi)感染：致病菌生化鑒定、毒力試驗(yàn)、

15、 腸毒素測(cè)定、血清型測(cè)定,微生物學(xué)檢查,臨床學(xué)檢查,在環(huán)境和食品衛(wèi)生學(xué)上，常被用作糞便污染的檢測(cè)指標(biāo),≤ 3個(gè)大腸菌群/1L飲水≤ 100個(gè)細(xì)菌總數(shù)/1ml飲水,衛(wèi)生學(xué)檢查,大腸菌群指數(shù),,每1000ml水中大腸菌群數(shù),我國(guó)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)：,細(xì)菌總數(shù),,每1ml或1g樣品中細(xì)菌總數(shù),,,1、加強(qiáng)食品衛(wèi)生監(jiān)督2、疫苗：ETEC菌毛疫苗3、抗菌素：對(duì)多數(shù)抗菌素敏感、易產(chǎn)生耐藥,防治,第二節(jié) 志賀菌屬

16、 shigella,是人類細(xì)菌性痢疾最為常見的病原菌，,通稱痢疾桿菌dyseatery bacteria,痢疾志賀菌,志賀菌屬的生物學(xué)特性,一、培養(yǎng)特性二、抗原結(jié)構(gòu)三、抵抗力四、分類,培養(yǎng)特性,1、無(wú)莢膜、無(wú)鞭毛，有菌毛2、兼性厭氧、普通培養(yǎng)基3、無(wú)色半透明S型菌落4、多數(shù)不分解乳糖，動(dòng)力試驗(yàn)陰性5、宋內(nèi)志賀菌部分菌株出現(xiàn)R型菌落 遲緩發(fā)酵乳糖,,,動(dòng)力試驗(yàn),,痢疾桿菌,,（+）,（-）,乳糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)

17、,大腸桿菌,,,,（-）,（+）,痢疾桿菌,,大腸桿菌,,抗原結(jié)構(gòu),1、O抗原：群特異性抗原、型特異性抗原2、K抗原：無(wú)分類意義3、無(wú)H抗原,抵抗力,1、弱、理化因素敏感 （60 ℃ 10 min）2、37 ℃ 水中存活20 d、冰塊存活96 d3、對(duì)酸敏感、化學(xué)消毒劑敏感4 、抗菌素敏感、易發(fā)生耐藥性,,志賀菌的血清學(xué)分型,菌 種 群 型

18、 亞 型痢疾志賀菌 A1—10 8a、8b、8c福氏志賀菌 B1—6，x，y變型 1a、1b、2a

19、 2b、3a、3b 3c、4a、4b鮑氏志賀菌 C1—18宋內(nèi)志賀菌 D1,,,,志賀菌屬的致病性,一、致病物質(zhì)二、所致疾病三、免疫

20、性,,,人類是唯一的患者和帶菌者,,,,,糞—口傳播,,,,感染灶局限于結(jié)腸粘膜層，一般不入血,,,,,,病后免疫期短，不牢固,致病特點(diǎn),1、侵襲力：,菌毛—-有利于細(xì)菌粘附至結(jié)腸粘膜,2、毒 素：,加重局部和全身癥狀,內(nèi)毒素,,作用于腸壁,,通透性增加,粘膜炎癥、潰瘍,局部,,,全身,,內(nèi)毒素血癥,外毒素（A群1型） 志賀毒素,與內(nèi)毒素協(xié)同作用,,,腸壁植物神經(jīng)：里急后重,致病物質(zhì),痢疾桿菌致病過程,痢疾桿菌,經(jīng)口而入,回

21、腸、結(jié)腸、直腸定居繁殖,毒素入血，達(dá)中樞神經(jīng)系統(tǒng),腸壁上皮細(xì)胞壞死、炎癥、潰瘍,膿血黏液便,慢性感染、帶菌者（傳染源）,痊愈,,,,,,,,急性細(xì)菌性痢疾,急性典型：發(fā)熱、腹痛、腹瀉、 膿血粘液便、里急后重,非急性典型：小兒—中毒型：中毒性菌痢 成人—易誤漏診,慢性細(xì)菌性痢疾：病程遷延二月以上,所致疾病,中毒性痢疾病人,天然免疫：無(wú)獲得性

22、免疫：局部免疫為主，不牢固， 保護(hù)期短暫,免疫性,志賀菌屬感染的診斷與防治,一、微生物學(xué)檢查 二、防治,及時(shí)送/暫用30%甘油緩沖鹽水保存,SS平板（無(wú)色透明小菌落）,血清學(xué)反應(yīng)（玻片凝集）,毒力試驗(yàn)（Senery試驗(yàn)）,分離培養(yǎng),新鮮膿血便/肛拭,雙糖培養(yǎng)基（生化反應(yīng)）,,,,,,,,,快速診斷,,熒光菌球試驗(yàn),協(xié)同凝集試驗(yàn),,,微生物學(xué)檢查,預(yù)防：,口服減毒活疫苗：依鏈

23、株Sd活疫苗,治療：,氯霉素、磺胺藥物（有多重耐藥菌株存在）,防治原則,其中許多為人畜共患病,第三節(jié) 沙門菌屬 Salmonella,一大群人與動(dòng)物腸道中的寄生菌,菌群菌型甚多，僅少數(shù)對(duì)人致病,沙門氏菌電鏡片,鼠傷寒沙門菌,傷寒沙門菌,,目前至少有67種O抗原和2200個(gè)以上血清型, 根據(jù)其對(duì)宿主的致病性, 可分為三類,傷寒桿菌副傷寒桿菌(甲、乙、丙),人,腸熱癥,鼠傷寒桿菌腸炎桿菌 豬霍亂桿菌,兒童傷寒,人、動(dòng)物,急

24、性胃腸炎,雞痢沙門氏桿菌 雞傷寒沙門氏桿菌,動(dòng)物,,,,,,,,,沙門菌屬(Salmonella),沙門菌屬的生物學(xué)特性,一、培養(yǎng)特性二、抗原結(jié)構(gòu)三、抵抗力四、分類,培養(yǎng)特性,1、 G-桿菌, 周身鞭毛, 能運(yùn)動(dòng), 多數(shù)有菌毛2、兼性厭氧/需氧3、普通培養(yǎng)基， 無(wú)色半透明S型菌落4、喜膽汁,不分解乳糖,某些種類產(chǎn)生H2S可根據(jù)生化反應(yīng)的不同區(qū)分種與亞種,,,,常見沙門菌的主要生化特性,硫化氫試驗(yàn),,傷寒桿菌,,（+）,

25、（-）,乳糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn),大腸桿菌,,,,生化反應(yīng)：常用于細(xì)菌種與亞種間的鑒別,（-）,（+）,大腸桿菌,,乙型副傷寒,,抗原結(jié)構(gòu),1、O抗原：已發(fā)現(xiàn)58種， ——分組 42組， A-E組，致病菌2、H抗原：I 相（特異相）、II相（非特異相） 具種特異性——分型3、Vi（多糖）抗原：與毒力有關(guān),抗原構(gòu)造,菌體抗原O-Ag ：脂多糖（LPS），耐熱

26、為Ti-Ag，刺激機(jī)體產(chǎn)生IgM類抗體 （出現(xiàn)早、消失快）鞭毛抗原H-Ag ：蛋白質(zhì)， 為Td-Ag，刺激機(jī)體產(chǎn)生IgG類抗體 （出現(xiàn)遲、維持時(shí)間久）毒力抗原：包膜（菌體表面）抗原，不耐熱 Vi-Ag：有抗吞噬作用?？乖匀?，刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體效價(jià)低，對(duì)其測(cè)定有助于檢出帶菌者M(jìn)抗原：黏液抗原，表面抗原，加熱破壞,,傷寒桿菌的表面抗原,Vi抗原,抗原性弱，刺激機(jī)體產(chǎn)生短暫低效價(jià)抗體伴隨活菌一起存在,測(cè)定VI抗體有

27、助于檢出帶菌者,,因?yàn)?,所以,,本質(zhì),抵抗力,1、強(qiáng)、耐低溫、可在冰凍土壤中過冬2、水中存活2-3周、糞便存活1-2月3、理化因素敏感（ 60 ℃ 30min ）4、氯霉素等敏感5、消毒劑敏感,沙門菌的血清學(xué)分型,組 菌名 O抗原 H抗原I H抗原IIA 甲型副傷寒沙門菌 1、2、12

28、 a —B 肖氏沙門菌 1、4、5、12 b 1、2 鼠傷寒沙門菌 1、4、5、12 i 1、2C1 希氏沙門菌 6、7、Vi c 1、5

29、 豬霍亂沙門菌 6、7 c 1、5D 傷寒沙門菌 9、12、Vi d — 腸炎沙門菌 1、9、12 g、m —E 鴨沙門菌

30、 3、10 e、h 1、6,,,,沙門菌屬的致病性,一、致病物質(zhì)二、所致疾病三、免疫性,侵襲力（inv基因編碼產(chǎn)物） Vi抗原 內(nèi)毒素 腸毒素,致病物質(zhì),腸熱癥：傷寒、副傷寒胃腸炎：食物中毒敗血癥,所致疾病,病人帶菌者,,糞-口,1、腸熱癥：,腸壁固有層 淋巴結(jié),,淋巴液,腸系膜淋巴結(jié),,胸導(dǎo)管,血,第一次菌血癥

31、,,膽囊、肝、脾、腎,,第二次菌血癥,發(fā)熱、不適、全身疼痛,持續(xù)高熱、相對(duì)緩脈、肝脾腫大、玫瑰疹、外周血白細(xì)胞數(shù)下降,,,發(fā)生變態(tài)反應(yīng)，腸局部壞死潰瘍致腸出血、腸穿孔,,隨尿排出,2、胃腸炎（食物中毒）：最常見,鼠傷寒沙門菌豬霍亂沙門菌腸炎沙門菌,,大于108,食物中毒（發(fā)熱、惡心、嘔吐、 腹痛、水樣瀉）,3、敗血癥：,希氏沙門菌鼠傷寒沙門菌豬霍亂沙門菌腸炎沙門菌,,血

32、,,敗血癥（高熱、寒戰(zhàn)、厭食、貧血）,,腦膜炎、骨髓炎、膽囊炎、心內(nèi)膜炎,4、無(wú)癥狀帶菌者,約1-5%傷寒或副傷寒患者，癥狀消失1年后，糞便仍可排菌，這些菌主要留在膽囊中，有傳染性,天然免疫：無(wú)獲得性免疫：,免疫性,病愈后免疫力較牢固，主要是細(xì)胞免疫,,,,,,沙門菌屬感染的診斷與防治,一、微生物學(xué)檢查 二、防治,標(biāo)本類型：血液、骨髓、尿液、糞便、 嘔吐物、食物檢測(cè)方法：涂片鏡檢

33、 分離鑒定 肥達(dá)試驗(yàn),微生物學(xué)診斷,,傷寒和副傷寒食物中毒敗血癥第1周取靜脈血可疑食物血第1-3周取骨髓液嘔吐物第2周起取糞、尿液,微生物學(xué)檢查,查病原,標(biāo)本,,,,SS平板,生化反應(yīng),血清學(xué)鑒定,,,,雙糖發(fā)酵等,,玻片凝集試驗(yàn),,傷寒病人標(biāo)本采集原則,微生物學(xué)檢查,查抗體,1、肥達(dá)試驗(yàn),原理：用已知傷寒副傷寒抗原，

34、 測(cè)病人血清中相應(yīng)抗體的定量凝集試驗(yàn),用途：輔助診斷傷寒副傷寒,2、帶菌者檢查,測(cè)Vi抗體,Widal test,測(cè)定抗體肥達(dá)氏(Widal)反應(yīng)原理用已知的傷寒桿菌O、H抗原和甲、乙型副傷寒桿菌的H抗原與待檢血清作定量凝集試驗(yàn)根據(jù)抗體含量多少及其增長(zhǎng)情況, 輔助臨床診斷腸熱癥,,Widal test判定,正?？贵w水平H>1：160 O >1：80動(dòng)態(tài)觀察H與O 抗體的比較 O抗體

35、IgM 型，出現(xiàn)早，持續(xù)半年左右，消失后不再出現(xiàn) H 抗體 IgG型，出現(xiàn)晚，維持?jǐn)?shù)年，消失后易受非特異性抗原刺激而重新出現(xiàn),Widal test判定,H、O凝集價(jià)超過正常值 傷寒（副）可能性大H、O凝集價(jià)低于正常值 傷寒（副）可能性小H高、O不高 可能預(yù)防接種或非特異性回憶反應(yīng)H不高、O高 可能是感染早期或其它沙門菌感染引起的交叉反應(yīng),防治,疫苗：傷寒三聯(lián)疫苗（死疫苗）

36、 Ty-2la株減毒活疫苗隔離病人，嚴(yán)格糞管食品加工人員定期檢查，不合格者不上崗抗菌素：氯霉素、氨卞青霉素,本章小結(jié),1、腸道桿菌的共同生物學(xué)特性2、大腸桿菌的致病性與微生物學(xué)檢查特點(diǎn)3、沙門菌的致病性與微生物學(xué)檢查特點(diǎn) （包括肥達(dá)試驗(yàn)）4、志賀菌的致病性與微生物學(xué)檢查特點(diǎn),預(yù)習(xí)提綱,1、非腸桿菌科桿菌中有哪些重要的致病菌？2、如何區(qū)分霍亂弧菌的古典型與El Tor型？3、霍亂弧菌的致病物質(zhì)有哪些