黃瓜霜霉菌卵孢子形成和rDNA-ITS序列分析.pdf

1、黃瓜霜霉病是黃瓜生產(chǎn)中的重要病害，傳播流行速度快，對黃瓜生產(chǎn)威脅極大，是保護地黃瓜上的一種毀滅性病害。本研究對中國10個城市黃瓜霜霉菌卵孢子形成情況進行了調(diào)查，研究了卵孢子的形成條件及卵孢子越冬存活規(guī)律，對黃瓜霜霉菌的rDNA-ITS序列進行SNP分析，以期為進一步明確黃瓜霜霉菌的遺傳變異規(guī)律、黃瓜霜霉病的初侵染源及流行規(guī)律提供理論依據(jù)。具體研究結(jié)果如下：
　　 (1) 對全國10個城市卵孢子形成進行調(diào)查，結(jié)果發(fā)現(xiàn)除海口和楊凌外

2、，在漠河、哈爾濱、沈陽、長春、保定、聊城、銀川、西寧8個地區(qū)均發(fā)現(xiàn)了卵孢子。形成的卵孢子多集中于植株上部和下部葉片病斑，中部葉片較少。在沈陽發(fā)現(xiàn)的卵孢子數(shù)量最多，保定形成的卵孢子最少；不同地區(qū)病菌的卵孢子在形態(tài)學上有很大差異，沈陽地區(qū)的最大，西寧的最小。
　　 （2）環(huán)境因子對卵孢子形成的影響程度依次為溫度>接觸物>成熟度>濕度>時間。溫度為4℃，相對濕度為90％，與土壤接觸50d根際葉片易產(chǎn)生卵孢子。溫度高于36℃，相對濕度小

3、于15％都不會形成卵孢子，光照對卵孢子形成無影響。
　　 (3) 越冬期間卵孢子生活力規(guī)律研究結(jié)果表明，從1~5月份卵孢子萌動率逐漸上升，5月下旬出現(xiàn)最高峰，達14.01％，之后逐漸下降。
　　 （4）溫度、KMnO4、H2O2、葉組織液及土壤浸漬液可顯著提高卵孢子的萌動率，其中以36℃高溫，濃度為0.3％的KMnO4,0.7％的H2O2，葉組織液處理9d，土壤浸漬液處理9d卵孢子萌動率最高。
　　 （5）對來自

4、全國12個城市的34個黃瓜霜霉菌rDNA-ITS區(qū)SNP分析結(jié)果顯示，所有34個菌株的rDNA-ITS區(qū)堿基全序列長度為802bp；ITS區(qū)存在單核苷酸多態(tài)性，34個菌株序列共有866個單核苷酸多態(tài)性位點。ITS區(qū)分析顯示全國12個城市34個菌株來源與地理區(qū)域存在一定的相關(guān)性，34個菌株之間的相似介于47.87~100％，平均遺傳距離為1.231±0.200。
　　 （6）所有菌株通過聚類分析可分為三組，即RG1、RG2和RG3

5、。RG1包括來自中國華北和西北的菌株，即青海的4個菌株P(guān)c-qh1、Pc-qh2、 Pc-qh3、Pc-qh4、寧夏的4個菌株P(guān)c-nx1、Pc-nx2、Pc-nx3、Pc-nx4、河北的6個菌株P(guān)c-bd1、Pc-bd2、Pc-bj1、Pc-bj2、Pc-bj3、Pc-bj4、山東的3個菌株P(guān)c-sd1、Pc-sd2、Pc-sd3和陜西的Pc-yl；RG2包括來自中國東北的菌株，即黑龍江的6個菌株P(guān)c-hrb1、Pc-hrb2、Pc-