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1、目的:
通過制作堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物緩釋微球(basic fibroblast growth factor-poly lactide-co-glycolide sustained release microspheres, bFGF-PLGA-MS),觀察其對(duì)家兔背部擴(kuò)張皮瓣遠(yuǎn)端成活的影響。
方法:
選取健康的、體重1.6~2.1千克的家兔24只,不限制性別,稱重后隨機(jī)分為3組(
2、n=8),分別為生理鹽水+空白微球組、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)+空白微球組、bFGF-PLGA-MS組。術(shù)前24小時(shí)各組均予以背部皮膚處備皮,并消毒后實(shí)施擴(kuò)張器植入術(shù)(Ⅰ期),術(shù)中通過注水壺向擴(kuò)張器中注入6ml生理鹽水。待家兔一般情況穩(wěn)定后1周,每隔三日重復(fù)向擴(kuò)張器內(nèi)注入生理鹽水6ml,共8次,注入生理鹽水量為48ml。注水完成后,第14天開始予以實(shí)施擴(kuò)張皮瓣成型術(shù)
3、(Ⅱ期)。術(shù)前設(shè)計(jì)觀察皮瓣,制備成以髂嵴連線為蒂的2cm×8cm的矩形皮瓣。并對(duì)所有皮瓣實(shí)施藥物注射,注射部位為擬擴(kuò)張區(qū)域,注射點(diǎn)為每隔2cm,按皮瓣面積選取15個(gè)注射點(diǎn),每注射點(diǎn)0.1ml。bFGF-PLGA-MS組的皮瓣予以注射含bFGF-PLGA-MS溶液;bFGF+空白微球組予以注射空白微球與bFGF懸濁液溶液,空白組予以注射等量空白微球和生理鹽水替代。皮瓣成形術(shù)后12天,計(jì)算皮瓣成活面積,并將家兔處死后,取皮瓣進(jìn)行石蠟包埋切片
4、、HE染色觀察皮瓣的病理變化;運(yùn)用免疫組化的方法檢測(cè)CD34+表達(dá)差異,結(jié)合明膠氧化鉛灌注法觀察術(shù)后皮瓣的微血管密度。
結(jié)果:
1、術(shù)后12天, bFGF-PLGA-MS組、bFGF+空白微球組、空白微球+生理鹽水組的皮瓣面積成活率分別約為84.94±5.14%、62.72±7.12%、59.87±6.74%。bFGF-PLGA-MS組成活率明顯高于 bFGF+空白微球組和生理鹽水+空白微球組,統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.0
5、5)。bFGF+空白微球組與空白微球生理鹽水組比較,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
2、bFGF-PLGA-MS組的皮瓣 HE染色示:擴(kuò)張皮瓣遠(yuǎn)側(cè)端全層壞死,伴有明顯的炎癥反應(yīng),該部位細(xì)胞核濃縮、破裂;細(xì)胞萎縮、變小。而皮瓣存活的部分存在一定程度水腫,其表皮變薄,伴大面積肉芽增生,及大量新生毛細(xì)血管形成。bFGF+空白微球組和NS+空白微球組,壞死的皮瓣表現(xiàn)相同,但存活的皮瓣中肉芽組織無明顯增生,其新生血管增生不明顯。bFGF
6、-PLGA-MS組的肉芽組織增生情況和毛細(xì)血管增生情況與bFGF+空白微球組和NS+空白微球組比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),但 bFGF+空白微球組與NS+空白微球組比較,差異無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
3、與bFGF+空白微球組和NS+空白微球組相比,bFGF–PLGA-MS組的CD34+表達(dá)明顯增加,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。而其在 bFGF+空白微球組和NS+空白微球組的表達(dá)不明顯,差異無統(tǒng)
7、計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
4、bFGF–PLGA-MS組、bFGF+空白微球組及 NS+空白微球組三組皮瓣平均血管數(shù)目分別為(37.38±5.90)、(25.75±5.31)、(24.13±4.76)個(gè)/cm2, bFGF–PLGA-MS組有大量的微血管生成,與bFGF+空白微球組、NS+空白微球組的平均血管數(shù)目明顯增多,且微血管的吻合支明顯多于bFGF+空白微球組、NS+空白微球組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。bF
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