2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、第一部分
   目的:
   制備新型大鼠脊髓T10全橫斷損傷動物模型,為脊髓損傷(spinalcordinjurySCI)研究提供通用的動物模型。
   方法:
   雌性成年SD大鼠20只隨機(jī)分為兩組:對照組(n=10)及脊髓損傷組(SCI組,n=10)。SCI組咬除T7-T9棘突及相應(yīng)椎板,采用顯微操作技術(shù)造模,顯微剪橫切斷暴露的T10節(jié)段背側(cè)脊髓,保留腹側(cè)硬膜,再用眼科15度側(cè)切刀完成脊髓完全橫斷

2、,用11/0顯微縫合線縫合硬脊膜和蛛網(wǎng)膜,對照組僅行椎板切除術(shù)。給予術(shù)后截癱護(hù)理并觀察后肢運(yùn)動情況,進(jìn)行BBB運(yùn)動功能評分,動物存活8周以上。取材前1周在脊髓橫斷處尾側(cè)注射熒光金(fluorogold,F(xiàn)G)進(jìn)行逆行標(biāo)記,術(shù)后第8周末取材進(jìn)行組織學(xué)檢測大腦皮質(zhì)體感區(qū)FG標(biāo)記神經(jīng)元。
   結(jié)果:
   SCI組所有動物在術(shù)后均表現(xiàn)出典型的脊髓截癱癥狀,BBB運(yùn)動功能評分很低,術(shù)后1周為0分,術(shù)后8周能恢復(fù)到7~8分,與對

3、照組相比具有非常顯著性差異(<0.01)。熒光金逆行追蹤分析顯示SCI組大腦皮質(zhì)體感區(qū)未檢測到熒光金標(biāo)記陽性細(xì)胞。
   結(jié)論:
   建立的新型大鼠脊髓全橫斷損傷模型,硬脊膜保持完整,效果穩(wěn)定,可復(fù)制性強(qiáng),制作簡便,易于護(hù)理。
   第二部分
   目的:
   研究嗅鞘細(xì)胞移植聯(lián)合膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(GlialCellLine-derivedNeurotrophicFactorGDNF)

4、乳酸/羥基乙酸共聚物(polylactic-co-glycolicacid,PLGA)緩釋微球蛛網(wǎng)膜下腔途徑注射對大鼠橫斷性脊髓損傷的修復(fù)作用。
   方法:
   ①以聚乳酸一羥基乙酸共聚物(polylactide-co-glycolide,PLGA)為包裹材料,采用復(fù)乳法(W1/O/W2)制備GDNF-PLGA微球,使用掃描電鏡及激光粒度分布儀觀察微球形態(tài)并測定其粒徑分布;測定微球載藥量、包封率等指標(biāo);②采用18h單

5、次差速貼壁的方法純化培養(yǎng)嗅鞘細(xì)胞,定期在倒置顯微鏡下觀察嗅鞘細(xì)胞的形態(tài)及生長情況,并對其行NGFRp75及PI的免疫熒光鑒定,同時(shí)計(jì)算嗅鞘細(xì)胞的純度;③成年雌性SD大鼠60只,建立Tl0脊髓全橫斷損傷模型,隨機(jī)分成6組:單純對照組(10只)、嗅鞘細(xì)胞(OECs)移植組(10只)、GDNF組(10只)、GDNF-PLGA緩釋微球組(10只)、嗅鞘細(xì)胞移植聯(lián)合GDNF組(10只)和嗅鞘細(xì)胞移植聯(lián)合GDNF-PLGA緩釋微球組(10只)。④于

6、大鼠脊髓損傷術(shù)后每周行BBB運(yùn)動功能評分;取材前l(fā)周在脊髓橫斷處尾側(cè)注射熒光金(fluorogold,F(xiàn)G)進(jìn)行逆行標(biāo)記,術(shù)后第8周末取材進(jìn)行組織學(xué)檢測大腦皮質(zhì)體感區(qū)FG標(biāo)記神經(jīng)元;應(yīng)用NF200免疫組化染色觀察脊髓損傷的修復(fù)情況,并采用免疫組化圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行定量分析。
   結(jié)果:
   ①采用復(fù)乳法制備的GDNF-PLGA緩釋微球,其表面光滑圓整,無粘連成塊,微球大小較均勻,粒徑分布較窄,微球載藥量為0.046%,

7、、包封率為84.72%;②通過18h單次差速貼壁法純化培養(yǎng)的嗅鞘細(xì)胞純度可達(dá)70%-80%;③BBB運(yùn)動功能評分:術(shù)后8周,6組大鼠后肢運(yùn)動均出現(xiàn)不同程度的恢復(fù),GDNF組與對照組、OECs組與OECs+GDNF組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;其余各組兩兩比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。④熒光金逆行示蹤分析顯示,OECs移植聯(lián)合GDNF-PLGA緩釋微球組、OECs組及OECs移植聯(lián)合GDNF組在大鼠大腦皮質(zhì)體感區(qū)可檢測到熒光金標(biāo)記的陽性錐體細(xì)胞,推

8、測脊髓損傷側(cè)的皮質(zhì)脊髓束發(fā)生了再生并穿越橫斷性病灶達(dá)到了脊髓尾側(cè),但是對照組、GDNF組未見,GDNF-PLGA微球組僅偶見極個(gè)別的FG標(biāo)記的陽性細(xì)胞;⑤NF200免疫組化結(jié)果及圖像分析顯示:GDNF組與對照組、OECs組與OECs+GDNF組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,對照組、GDNF-PLGA緩釋微球組、OECs組以及OECs+GDNF-PLGA緩釋微球組兩兩相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。
   結(jié)論:
   OE

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