簡介：碩士學位論文TLR4在破骨細胞中的生物學作用及其與經(jīng)典WNT信號相互作用機制的初步研究白慶霞培養(yǎng)類別全日制學位類型專業(yè)學位一級學科專業(yè)類口腔醫(yī)學二級學科專業(yè)研究方向牙髓生物學指導教師陸群教授（主任醫(yī)師）培養(yǎng)單位口腔醫(yī)院牙體牙髓病科二O一三年五月第四軍醫(yī)大學THEFOURTHMILITARYMEDICALUNIVERSITY分類號R781UDC61631密級公開第四軍醫(yī)大學碩士學位論文目錄縮略語表1中文摘要2英文摘要6前言10文獻回顧12一、成骨細胞、破骨細胞參與骨改建的研究進展121成骨細胞在骨改建中的主要作用122破骨細胞在骨改建中的主要作用123成骨細胞與破骨細胞在骨改建中的相互作用13二、脂多糖LPS參與骨疾病的研究進展14三、TLR4參與炎癥性骨疾病的研究進展151TOLL樣受體參與炎癥的研究進展152TOLL樣受體4（TLR4）參與炎癥的研究進展15四、經(jīng)典WNT信號通路參與炎癥性骨疾病的研究進展171WNT信號通路在骨改建中的主要作用172WNT信號通路參與炎癥性骨疾病的研究進展18研究內(nèi)容20實驗一大鼠成骨細胞、破骨細胞的培養(yǎng)與鑒定201材料202方法203結果224討論27實驗二LPS體外模擬大鼠成骨、破骨細胞的炎癥微環(huán)境28

簡介：溫州醫(yī)學院碩士學位論文MUSASHI2與AML臨床預后關系及在HL60細胞生物學中的作用研究姓名葉愛芳申請學位級別碩士專業(yè)臨床檢驗診斷學指導教師俞康201211溫州醫(yī)學院碩士學位論文細胞增殖能力增強。關鍵詞急性髓系白血??；HL60細胞；MUSASHI2轉染；預后；增殖

簡介：廈門大學學位論文原創(chuàng)性聲明本人呈交的學位論文是本人在導師指導下，獨立完成的研究成果。本人在論文寫作中參考其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表的研究成果，均在文中以適當方式明確標明，并符合法律規(guī)范和廈門大學研究生學術活動規(guī)范試行。另外，該學位論文為寫艱課題組的研究成果，獲得＼琴諺課題組經(jīng)費或實驗室的資助，在幢堿川誨固嘞實驗室完成。請在以上括號內(nèi)填寫課題或課題矗負鬟麟室名稱，未有此項聲明內(nèi)容的，可以不作特別聲明。聲明人簽名李素F擒皂≯CF年廠月沙日S0X2OCT4ESSPYCSCDMS0PCR英文縮略詞表SRYREL曲EDHMGBOXCONTAININGOCT鋤ERBINDINGFACTOR4EMBRYONICSTEMCENSEXDETERININATIONREGIONOFYCHROMOSOMECANCERSTEMCEIISDIMETHYISULFOXIDEP0IYMERASECHAINREACTIONR_T_PCRREVERSETRANSCPTIONHRPCDNAHORSERADISHDEROXIDASECOMPIEMENTARYDNAGAPDHGLYCERAIDEHYDE一3一PHOSPHATEDEHYDROGENASEPBSFGFEGFVEGFMTS5FUL0HPSDSPMSFBSAAPIPSIPCPHOSPHATEBUFFBREDSANEFBROBLASTGRO、ⅣTHFACTOREPIDERMAIGROWTHFACTORVASCUIARENDOTHE|AIGROWTHFACTORSOX2基因OCT4基因胚胎干細胞Y染色體性別決定區(qū)腫瘤干細胞二甲亞楓聚合酶鏈反應逆轉錄辣根過氧化物酶互補DNA甘油醛一3一磷酸脫氫酶磷酸鹽緩沖液成纖維細胞生長因子表皮生長因子血管內(nèi)皮生長因子3一4，5一DIMETHYL血IAZ012Y15一3一四甲基偶氮唑鹽CARBOXYMETHOXYPHENYL一2一4一SULFOPHENYL一2HTETRAZOLIUM，INNERSALTFIUOROURACIOINGIPIINSIDEINSODIUMDODECVLSUIFATEPHENYLMETHANESUIF6NYIFIUORIDEBOVINESEMMALBUMINAMMONIUMDERSULFATECEUSINDUCEDPLURIPOTENTSTEMCELLSINDUCEDPLURIPOTENTCANCERCEUS5氟尿嘧啶奧沙利鉑十二烷基硫酸鈉苯甲基磺酰氟牛血清白蛋白過硫酸銨誘導性多能干細胞誘導性多能癌細胞

簡介：碩士學位論文碩士學位論文MICRNA181A調(diào)控調(diào)控KRAS的表達對宮頸癌細胞生物學行為影響的研究的表達對宮頸癌細胞生物學行為影響的研究THEEFFECTSOFMICRNA181AONTHEBIOLOGICALBEHAVIOFCERVICALCANCERCELLSBYTARGETINGKRAS碩士研究生黎玉涵研究方向婦科腫瘤導師羅喜平教授導師單位廣東省婦幼保健院廣州醫(yī)科大學碩士研究生黎玉涵研究方向婦科腫瘤導師羅喜平教授導師單位廣東省婦幼保健院廣州醫(yī)科大學廣州二零一五年五月廣州二零一五年五月英漢簡略詞索引1英漢簡略詞索引英漢簡略詞索引英文縮寫英文全稱中文名稱CDNACOMPLEMENTARYDNA互補DNADDH2ODOUBLEDISTILLEDWATER雙蒸水DEPCDIETHYLPYROCARBONATE二乙基焦磷酰胺DMEMDULBECCOMODIFIEDEAGLEMEDIUMDULBECCO改進的EAGLE培養(yǎng)基DMSODIMETHYLSULFOXIDE二甲基亞砜EBETHIDIUMBROE溴化乙錠FBSFETALBOVINESERUM胎牛血清FITCFLUESCEINISOTHIOCYANATE異硫氰酸熒光素KRASKIRSTENRATSARCOMAVIRALONCOGENE鼠類肉瘤病毒癌基因MIR181AMICRNA181A微小核糖核酸181ANCNEGATIVECONTROL陰性對照ODOPTICALDENSITY光密度值PBSPHOSPHATEBUFFEREDSALINE磷酸鹽緩沖鹽水PIPROPIDIUMIODIDE碘化丙啶QRTPCRQUANTITATIVEREVERSETRANIONPOLYMERASECHAINREACTION實時定量聚合酶鏈反應RNARIBONUCLEICACID核糖核酸RPMREVOLUTIONSPERMINUTE每分鐘轉數(shù)，轉分RTREVERSETRANION逆轉錄SPSSSTATISTICALPACKAGEFTHESOCIALSCIENCE統(tǒng)計軟件包

簡介：分類號密級UDC學號416523611595南昌大學專業(yè)學位研究生學位論文SIRNASIRNA干擾干擾HBVHBV陽性肝癌細胞陽性肝癌細胞BUBR1BUBR1對癌細胞生物學對癌細胞生物學行為的影響行為的影響EFFECTSOFSIRNATARGETINGBUBR1ONTHEBIOLOGICALBEHAVISABOUTHBVHEPATOCELLULARCARCINOMACELLS趙強德培養(yǎng)單位（院、系）南昌大學第二附屬醫(yī)院指導教師姓名、職稱丁劍午、教授申請學位的學科門類臨床醫(yī)學學科專業(yè)名稱腫瘤學論文答辯日期答辯委員會主席徐方云評閱人2014年5月摘要摘要目的目的SIRNA干擾HBV陽性肝癌細胞BUBR1對癌細胞生物學行為的影響。方法方法1、根據(jù)基因庫中BUBR1序列，由INVITROGEN公司設計并提供3對不同的干擾SIRNA序列。2、采用RTPCR技術檢測五株肝癌細胞（HBV陰性及HBV陽性）中BUBR1MRNA表達量最高的細胞，并且作為后續(xù)試驗研究對象。3、實驗分為五組，采用WESTRNBLOT技術檢測干預BUBR1表達后其蛋白在肝癌細胞中的表達。4、采用MTT細胞增殖實驗、平板克隆法、細胞流式實驗檢測轉染3對SIRNA序列沉默BUBR1基因后對細胞增殖能力、克隆形成能力、細胞凋亡以及周期的影響。結果結果1、RTPCR技術檢測結果顯示BUBR1MRNA在乙型肝病毒陰性性肝癌細胞系中低于乙型肝炎病毒陽性肝癌細胞系中的表達，并且在HEPG2215中表達量最高。2、采用WESTERNBLOT技術檢測BUBR1蛋白在正常組、陰性組、干預組的表達量，其結果顯示BUBR1蛋白在正常組和陰性組表達明顯高于干擾組（C、D、E）（P005），差異性具有統(tǒng)計學意義，且干擾組E表達量最低。3、通過MTT及克隆平板實驗檢測干擾BUBR1后細胞的生長情況、增殖及侵襲能力，實驗結果顯示，干擾BUBR1表達后，干擾組相比正常組及陰性組生長增殖能力受到抑制，且干擾組E抑制最明顯（P005）具有統(tǒng)計學意義。另外凋亡與周期實驗結果表明，干擾組與對照組（正常組及陰性組）對比，凋亡率增加，且干擾組E凋亡率最明顯（P005）差異具有統(tǒng)計學意義；與正常組及陰性組相比，干擾組S、G2期細胞增加，且干擾組E增加更明顯P005，差異具有統(tǒng)計學意義。

簡介：分類號學號學號M20107M201075632632學校代碼學校代碼1048710487密級密級碩士學位論文碩士學位論文慢性慢性髓細胞白血病患者細胞白血病患者的細胞遺傳學與分子的細胞遺傳學與分子生物學生物學檢測檢測學位申請人學位申請人何麗學科專業(yè)學科專業(yè)血液內(nèi)科血液內(nèi)科指導教師指導教師孟力教授教授答辯日期答辯日期2013年5月獨創(chuàng)性聲明獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明，本學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果的總結。盡我所知，除文中已經(jīng)標明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文的研究做出貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本人將承擔本聲明引起的一切法律后果。學位論文作者簽名日期年月日學位論文版權使用授權書學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解學校有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即學校有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權華中科技大學可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存和匯編本學位論文。保密□，在_____年解密后適用本授權書。本論文屬于不保密□。（請在以上方框內(nèi)打“√”）學位論文作者簽名指導教師簽名日期年月日日期年月日

簡介：辛伐他汀與黏附肽P15對大鼠成骨細胞生物學行為的影響THEEFFECTSOFSIMVASTATINSANDADHESIONPEPTIDEP15ONTHEBIOLOGICALBEHAVIOUROFSDRATOSTEOBLASTS學科門類學科、專業(yè)研究方向年級研究生姓名導師姓名起止日期醫(yī)學外科學口腔頜面外科學生物活性骨代用品的研究二OO三級陳筑蘇周磊教授20039～20055廣東醫(yī)學院二OO六年五月中文摘要目的研究探討辛伐他汀與多肽P一15序貫作用對在小牛骨表面生長的大鼠成骨細胞增殖分化的影響方法1大鼠原代成骨細胞的分離、培養(yǎng)和鑒定L‘1采用酶二次消化法分離新生大鼠頭蓋骨成骨細胞，用反復貼壁法純化大鼠成骨細胞常規(guī)條件下進行細胞培養(yǎng)12成骨細胞鑒定121形態(tài)觀察1倒置相差顯微鏡觀察活體細胞形態(tài)2光鏡下觀察HE染色后成骨細胞形態(tài)結構122功能鑒定1堿性磷酸酶ALP染色鈣鉆法2礦化結節(jié)染色茜素紅法、YONKOSSA改良法、四環(huán)素標記法2觀察辛伐他汀對大鼠成骨細胞增殖分化能力的影響21檢測不同濃度的辛伐他汀00625“MOL／1，O125“MOL／1，0259MOL／L，O5I_TMOL／L，10MOL／1對大鼠成骨細胞增殖分化的影響3骨粉表面固定P一15對大鼠成骨細胞黏附增殖分化的影響31檢測細胞對兩種骨粉的貼壁率32掃描電鏡觀察細胞黏附骨粉的形態(tài)33檢測P15對大鼠成骨細胞黏附增殖分化的影響4辛伐他汀與P一15序貫作用對骨粉表面大鼠成骨細胞增殖分化的影響41倒置顯微鏡下觀察細胞在骨粉周圍增殖的情況，HE染色光鏡下觀察42檢測辛伐他汀與P一15序貫作用對大鼠成骨細胞增殖分化的影響。5成骨細胞功能檢測方法51MTT法測定成骨細胞增殖能力

簡介：神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)對機體免疫功能具有重要的調(diào)控作用。經(jīng)典神經(jīng)遞質、神經(jīng)肽是直接作用于免疫活性細胞和其他參與免疫反應細胞的重要調(diào)節(jié)物質。P物質SUBSTANCEPSP是發(fā)現(xiàn)最早的神經(jīng)肽之一屬于哺乳動物速激肽家族。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元和神經(jīng)膠質細胞是SP的主要來源免疫細胞是SP的另一來源。外周神經(jīng)末梢釋放SP參與免疫調(diào)節(jié)和炎癥過程免疫細胞產(chǎn)生SP以自分泌或和旁分泌的方式調(diào)節(jié)免疫細胞的功能。SP可從多方面影響各種免疫細胞且SP在不同條件下所起的作用具有復雜性和多樣性。SP可以影響淋巴細胞的增殖、分化誘導免疫球蛋白和細胞因子的合成并能夠調(diào)節(jié)TH細胞的活性和其他一些免疫細胞的活性通過以上作用參與調(diào)節(jié)機體的細胞免疫和體液免疫。SP是通過與速激肽受體TKR的亞型NK1NEUKININ1NK2NK3受體的結合來發(fā)揮其生物學活性的其中SP與NK1R的親和力最高對NK2R和NK3R有較低的親和力既SP發(fā)揮生理作用的主要途徑是NK1受體。SP受體分布于神經(jīng)細胞、內(nèi)皮細胞、脂肪細胞和成纖維細胞等多種細胞。在免疫系統(tǒng)SP受體幾乎分布于各種免疫細胞包括T、B淋巴細胞、單核巨噬細胞、樹突狀細胞、NK細胞、中性粒細胞和肥大細胞等。自然殺傷細胞NATURALKILLERCELLS參與免疫系統(tǒng)的發(fā)生、發(fā)展及效應等重要環(huán)節(jié)的調(diào)節(jié)過程是機體天然免疫的主要承擔者也是獲得性免疫的核心調(diào)節(jié)細胞NK細胞無需特異性抗原識別便可以直接殺傷腫瘤細胞和病毒感染的細胞。NK細胞殺傷靶細胞主要是通過與靶細胞直接接觸分泌殺傷介質穿孔素、顆粒酶、TNF和NK細胞毒因子LT等導致靶細胞死亡。另一方面NK細胞還可分泌IFNΓ、TNFΑ、GMCSF、LT、IL8和IL5等有免疫調(diào)節(jié)作用的細胞因子來間接殺傷靶細胞。NK細胞功能的發(fā)揮主要依賴于NK細胞能表達多種與主要組織相容性抗原MHC和非MHC類配體結合的受體傳遞抑制和激活信號NK細胞的殺傷活性取決于激活信號與抑制信號的平衡。目前發(fā)現(xiàn)的NK細胞表面的活化性受體包括自然細胞毒受體NATURALCYTOTOXICITYRECEPTSNCRS、NKG2D、活化殺傷免疫球蛋白樣受體KILLERIMMUNOGLOBLINLIKERECEPTSKIRS及其他輔助刺激活化性受體2B4、DNAM1、NTBA、CD59等。目前有關SP對NK細胞生物學功能的調(diào)控及作用機制的研究國內(nèi)外尚少見報道。已有一些研究證據(jù)表明SP對NK細胞的調(diào)節(jié)作用但其作用機制尚不十分清楚。本研究以非IL2依賴的NK92MI細胞株為研究體系首先研究了SP對NK92MI細胞增殖活性和殺傷活性等功能的影響并分析了殺傷介質穿孔素和顆粒酶B的表達和釋放與SP增強NK92MI細胞殺傷活性的關系。其次研究了SP對NK92MI細胞活化性受體NCRS表達的影響進一步闡明SP對NK92MI細胞功能的調(diào)控作用及內(nèi)在作用機制。最后我研究了SP受體NK1R、2R、3R在NK92MI細胞上的組成性表達以及SP對NK92MI細胞NK1R、2R、3R表達的影響并檢測了SP作用于NK92MI細胞后其胞漿CA2濃度的變化探討SP調(diào)控NK92MI細胞功能的受體途徑和信號轉導通路。以揭示SP對NK細胞生物學活性調(diào)控作用的機制。材料和方法1細胞培養(yǎng)NK92MI細胞株為非IL2依賴性NK92細胞株NK92細胞來自一個進行性非霍奇金淋巴瘤患者1998年建系購自中科院上海細胞庫；用含125％胎牛血清和125％馬血清的ΑMEM培養(yǎng)基不含RNA和DNA傳代培養(yǎng)。2MTT法測定SP對NK92MI細胞增殖活性的影響。3MTT法測定SP對NK92MI細胞殺傷活性的影響。4RTPCR測定NK92MI細胞NK1R、2R、3R的組成性表達。5REALTIMEPCR法測定SP對NK92MI細胞殺傷介質穿孔素和顆粒酶B、NCRSNKP46、NKP44和NKP30以及SP受體NK1R、2R和3R的MRNA表達的影響。6WESTERNBLOT法測定SP對NK92MI細胞穿孔素和顆粒酶B的蛋白表達的影響。7Β己糖胺酶釋放實驗測定SP對NK92MI細胞穿孔素和顆粒酶B釋放的影響。8流式細胞術檢測SP對NK92MI細胞NKP44、NKP46、NKP30分子和NK1R的膜表達的影響。9FURA2AM熒光探針法測定NK92MI細胞胞漿CA2濃度。10統(tǒng)計學分析所得實驗數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準差X±SD表示各組間均數(shù)比較采用一維方差分析ONEWAYANOVAP＜005為差異有統(tǒng)計學意義。結果一、SP對NK92MI細胞的促增殖作用經(jīng)一定濃度1014～106M的SP作用24H后NK92MI細胞的增殖無明顯變化作用48H后1012～LO6M的SP對NK92MI細胞的增殖均有明顯促進作用。二、SP對NK92MI細胞殺傷活性的增強作用一定濃度1014～106M的SP作用24H除較高濃度106M外1014～108M的SP對NK92MI細胞的殺傷活性均顯示有明顯增強作用。三、SP對NK92MI細胞穿孔素和顆粒酶B表達的影響1SP增加NK92MI細胞穿孔素和顆粒酶B的MRNA表達選擇對殺傷活性增強作用較大的濃度1014～1010M的SP作用NK92MI細胞24H各濃度的SP均可顯著提高NK92MI細胞穿孔素和顆粒酶B的MRNA表達水平。2SP增加NK92MI細胞穿孔素和顆粒酶B的蛋白表達選擇對殺傷活性增強作用較大的濃度1014M、1012M、1010M的SP作用NK92MI細胞24H各濃度SP均可增加NK92MI細胞穿孔素和顆粒酶B的蛋白表達僅1014M的SP對穿孔素的表達無明顯作用。四、SP對NK92MI細胞穿孔素和顆粒酶B釋放的影響選擇對殺傷活性增強作用較大的濃度1014M、1012M、1010M的SP作用NK92MI細胞24H后NK92MI細胞的Β己糖胺酶釋放無明顯變化表明SP對穿孔素和顆粒酶的釋放無明顯影響。五、SP對NK92MI細胞活化性受體NCRSNKP44、NKP46、NKP30表達的影響1SP增加NK92MI細胞活化性受體NCRSNKP44、NKP46、NKP30的MRNA表達選擇對殺傷活性增強作用較大的濃度1014M、1012M、1010M的SP作用NK92MI細胞24H各濃度的SP均可顯著增加NK92MI細胞NCRS的MRNA表達。2SP對NK92MI細胞NCRS膜表達的作用選擇對殺傷活性增強作用較大的濃度1014M、1012M、1010M的SP處理NK92MI細胞24H各濃度的SP均可增加NKP46的膜表達僅較低濃度1014M的SP對NKP44的膜表達有增加作用各濃度的SP對NKP30的膜表達均無明顯作用。六、NK1R在NK92MI細胞上的功能性表達1SP誘導NK92MI細胞NK1R的MRNA表達及膜表達增加一定濃度1014～106M的SP作用NK92MI細胞1、4和24H后各濃度SP作用較短時間4H即可增加NK92MI細胞NK1R的MRNA表達。SP作用NK92MI細胞24H后1014～108M的SP均能明顯增加NK92MI細胞NK1R的膜表達。2NK1R特異性拮抗劑對SP調(diào)控NK92MI細胞功能的阻斷作用使用NK1R特異性拮抗劑可完全阻斷SP對NK92MI細胞增殖活性的促進作用大部分阻斷SP對NK92MI細胞殺傷活性的增強作用大部分阻斷SP對NK92MI細胞殺傷介質穿孔素和顆粒酶B的MRNA表達的增加作用。七、SP誘導NK92MI細胞NK2R、3R的MRNA表達增加NK92MI細胞組成性表達NK2R、3R。SP作用1、4、24H后可誘導NK92MI細胞NK2R、3R的MRNA表達增加NK2R的MRNA表達在4H時開始增加24H時達到最高NK3R的MRNA表達趨勢與NK1R相似在4H時表達最高。八、SP提高NK92MI細胞胞漿游離CA2的濃度一定濃度1014～106M的SP作用NK92MI細胞1H后NK92MI細胞胞漿CA2的濃度明顯增高。結論11014～106M濃度范圍的神經(jīng)肽SP對NK92MI細胞的增殖活性和殺傷活性有促進作用。2所觀察濃度范圍的SP可增加NK92MI細胞殺傷介質穿孔素和顆粒酶B的MRNA表達及蛋白表達SP對NK92MI細胞殺傷活性的增強作用是通過直接增加其殺傷介質穿孔素和顆粒酶B的表達來實現(xiàn)的。3所觀察濃度范圍的SP可誘導NK92MI細胞中NCRS主要是NKP46分子的表達增加說明SP可以作為一種活化因子來調(diào)節(jié)NK92MI細胞的功能且SP可以通過增加活化性受體的表達來間接調(diào)節(jié)NK92MI細胞的殺傷活性。4NK92MI細胞組成性表達NKIR、2R、3RSP通過與其受體NK1R的正反饋機制來調(diào)節(jié)NK92MI細胞功能SP對NK92MI細胞功能的調(diào)控可能有NK1R、2R、3R幾種受體的協(xié)同或交叉作用。5SP激活NK92MI細胞上NK1R后部分信號轉導是以CA2為第二信使肌醇三磷酸IP3途徑和環(huán)磷酸腺苷CAMP依賴的PAK途徑都可能參與了SP通過NK1R調(diào)節(jié)NK92MI細胞功能的信號轉導。

簡介：目的在體外將人骨髓間充質干細胞HMSCS進行純化、擴增及向心肌樣細胞定向誘導分化，對誘導后的細胞進行心肌樣細胞相關特性分析并探討體外誘導人骨髓間充質干細胞HMSCS向心肌樣細胞分化過程中分化與凋亡的情況，檢測分化過程中心肌細胞特征表達及膜電位變化的情況，為HMSCS臨床移植治療提供實驗參考依據(jù)。方法1采用體外純化、擴增后的第4代HMSCS在體外經(jīng)5ΜMOLL5雜氮胞苷誘導24小時后繼續(xù)培養(yǎng)8周，相差顯微鏡下觀察細胞形態(tài)變化，免疫組化方法鑒定心肌特異性蛋白心房鈉尿肽ANP和連接蛋白CX43的表達，流式細胞儀檢測誘導前后細胞表面抗原CD31、CD34、CD45、CD90的表達情況，全細胞膜片鉗技術檢測不同時期細胞膜電位的變化。2將純化、擴增后的第4代HMSCS，分3組在體外分別經(jīng)0ΜMOLL、25ΜMOLL、50ΜMOLL5AZACYTIDINE5AZA誘導24H后繼續(xù)培養(yǎng)8周，相差顯微鏡下觀察細胞形念變化，流式細胞儀檢測各組細胞周期及凋亡指數(shù)，應用RTPCR技術分析肌球蛋白重鏈ΒMHC、肌鈣蛋白TCTNT、凋亡相關基因BCL2、BAX的MRNA在分化過程中的動態(tài)表達。結果HMSCS誘導前為紡錘形，誘導后第2天部分細胞即開始發(fā)生形變，呈球形或短棒狀，1周后胞漿中顆粒增多，約20～30％細胞邊緣呈毛刷樣變化；HMSCS表面抗原CD31、CD34、CD45在誘導前后差異無統(tǒng)計學意義，CD90未誘導時表達呈弱陽性，誘導后明顯增高PG期細胞比例誘導后較對照組顯著減少P5AZA低濃度誘導可減少細胞凋亡發(fā)生；3HMSCS移植后有致心律失常的潛在危險。

簡介：識別白血病干細胞的新單抗3A4的生物學特性及基因改造研究⑧論文作者簽名盔里墜指導教師簽名廠勿小√論文評閱人1評閱人2評閱人3評閱人4評閱人5匿名評閱匿名評閱匿名評閱匿名評閱匿名評閱答辯委員會主席金洼教授浙江太堂醫(yī)堂院隘屬簋二醫(yī)院孌員1盆墓臻教授浙江太堂醫(yī)堂院隘屬簋三醫(yī)院委員2杜童生數(shù)授浙江太堂醫(yī)堂院隘屬2L童醫(yī)院孌員3高瑞蘭教授浙江省生醫(yī)院委員4錢差坐主任醫(yī)垣浙江省厶民醫(yī)院2委員5答辯日期2011年5月27日⑧AUTHOR’SSIGNATURE＆主￡叢N●●●SUPERVLS0R7SSLGNATURETHESISREVIEWER1THESISREVIEWER2THESISREVIEWER3THESISREVIEWER4THESISREVIEWER5ANONYMOUSREVIEWANONYMOUSREVIEWANONYMOUSREVIEWANONYMOUSREVIEWANONYMOUSREVIEW，、1JIEMPMFESSOR，NLEFIRSTA幣LIATEDHOSPITALOFZHEJI鋤GUILIVERS時SCHOOLOFCNALRMEDICINECOMMITT∞OFO咫LDEFENCECONHNITTEEMAN1COMMITTEEMAN2RONGZHENXUPROFESSOR，TILESECOND蕊LIATEDHOSPITAJOFZHEJIANGUNIVERS時SCH001OFMEDCINE，1‰一’RUILANGAOPROFESSOR，ZHEJIALLGPROVIILCIALOFTRADITIONALCHINESECOMMLTTEEMANJMEDICINEHOSDITALCOMMITTEEMAN4堅重旦堅Q墊FG墮墮壘竺塑圣墮塑曼呈翌∑竺型￡竺趔生蔓旦型型CONLRNITTEEMAN5DATEOFORALDEFENCEMAY27，2011燃三

簡介：碩士學位論文論文題目RNA干擾靶向沉默PAUF基因對結腸癌細胞生物學行為影響的實驗研究研究生姓名劉鵬飛指導教師姓名朱新國專業(yè)名稱普外科研究方向胃腸外科論文提交日期2013年3月RNA干擾靶向沉默PAUF基因對結腸癌細胞生物學行為影響的實驗研究中文摘要IRNA干擾靶向沉默PAUF基因對結腸癌細胞生物學行為影響的實驗研究中文摘要目的目的檢測胰腺腺癌上調(diào)因子（PANCREATICADENOCARCINOMAUPREGULATEDFACT，PAUF）和Β連環(huán)蛋白（ΒCATENIN）在結腸癌患者中的表達情況，并通過RNA干擾靶向沉默PAUF表達，觀察其對人結腸癌細胞HCT116增殖凋亡及侵襲能力的影響，探討PAUF基因在結腸癌中的作用，為進一步研究結腸癌的基因治療奠定基礎。方法方法1收集48例結腸癌標本，每份標本同時收取腫瘤組織和癌旁正常組織。分別采用RTPCR，免疫組化檢測各組織中PAUF和ΒCATENIN的表達水平。培養(yǎng)5株結直腸癌細胞株，RTPCR檢測各細胞株中PAUF表達水平，進而篩選出高表達細胞株HCT116以備后續(xù)實驗用。2以脂質體（LIPOFECTAMIM2000）為載體將帶熒光標記的SIRNA轉染HCT116細胞并用流式細胞儀檢測從而篩選出最佳轉染條件。設計制備針對PAUF基因的3組不同小干擾RNA序列，以最佳轉染條件轉染細胞后分別采用RTPCR以及WESTERN法驗證干擾效果并進而篩選出最佳干擾片段以備后續(xù)實驗用。3將先前篩選出的最佳干擾片段PAUFSIRNA2按最佳轉染條件對PAUF高表達細胞株HCT116進行RNA干擾，再分別采用四甲基偶氮唑藍（MTT）法，流式細胞術（FCM），侵襲實驗，粘附實驗，遷移實驗檢測RNA沉默PAUF后對結腸癌HCT116細胞增殖，凋亡、周期及侵襲、粘附、遷移性的影響。結果結果1癌旁組織中PAUF和ΒCATENIN的表達量明顯低于腫瘤組織P005。并且，在腫瘤組織和癌旁組織中PAUF的表達與ΒCATENIN的表達均呈現(xiàn)相關性P005。PAUF在5株結直腸癌細胞中均有不同程度的表達，但在HCT116中表達量最高。2細胞數(shù)約為每孔15105個、SIRNA濃度約為80PMOL，LIPOFECTAMINE2000與SIRNA比例為4UL4UL6孔板時，有較佳的轉染效率，繼續(xù)提高SIRNA濃度并不能明顯提高轉染效率。將三組SIRNA轉染細胞后PAUF表達量均有不同程度下降，其中以PAUFSIRNA2干擾效果最明顯，轉染細胞后PAUF和ΒCATENIN的MRNA和蛋白表達明顯下降。3轉染了PAUFSIRNA2的結腸癌細胞HCT116吸光度值降低，增殖

簡介：後多大學碩士學位論文專業(yè)學位學校代碼10246學號L1211220041SIRNA沉默TUBB2C基因對SKM1細胞系生物學特性的影響B(tài)IOCHARACTERISTICEFFECTSOFTUBB2CGENESILENCINGBYSMALLINTERFERINGRNAONSKM1CELLLINE院系復旦大學附屬華山醫(yī)院專業(yè)內(nèi)科學ST液病學姓名朱晨指導教師許小平教授導師組成員陳波斌教授陳字副教授馬燕博士完成日期2014年4月復旦大學碩士學位論文英文符號及縮略語英文符號及縮略語按首寫字母排序

簡介：重慶醫(yī)科大學密級碩士學位論文論文題目作者姓名EPHRINB2對結腸癌SW480細胞生物學行為的影響及其機制研究陳旺盛指導教師姓名職稱、單位名稱傅仲學教授重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院胃腸外科申請學位級別碩士學科、專業(yè)名稱外科學論文答辯年月2013年05月2013年05月目錄英漢縮略語名詞對照1中文摘要3英文摘要。6論文正文沉默EPHRINB2基因對結腸癌SW480細胞生物學行為的影響及其機制研究9前言91材料和儀器、設備122方法2L3結果354討論425結論47參考文獻48全文總結56文獻綜述57致謝67攻讀碩士學位期間發(fā)表文章情況68

簡介：點擊查看更多鎂離子對成骨細胞生物學行為的促進作用及其機制研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：中南大學博士學位論文上皮性腫瘤細胞表達IGALPHA重鏈及其生物學功能的研究姓名鄭慧申請學位級別博士專業(yè)病理學與病理生理學指導教師曹亞20060501鄭慧博士學位論文中文摘要與B細胞中IGIDCA胚系轉錄本和VDJCA成熟轉錄本的大小基本一致。進一步，我們設計了兩對引物，通過RTPCR來確證這兩個轉錄本的表達。結果在五種上皮性腫瘤細胞中擴增出IGIACA，VDJCA兩個轉錄本的基因片段。因此適塞工土廛絲臟疸紲照壹達G垡￡垡YQ』￡垡西仝掛丞奎由于不同的細胞中IGVOJ基因片段可能存在不同的重組方式，從而產(chǎn)生不同的CDR3COMPLEMENTARITYDETERMININGREGION3序列。因此，我們通過RTPCR分析并測序，發(fā)現(xiàn)不同上皮組織來源的腫瘤細胞中存在不同的IGCDR3序列，并且這些癌細胞表達的IGCDR3序列是B細胞中暫未發(fā)現(xiàn)的新序列。因此，我們認為丕回土廛塞退的勝疸紲照查在羞丕園笪G直隆這一發(fā)現(xiàn)也提示上皮性腫瘤細胞表達的IG分子與B細胞來源的IG分子存在差異。在分析了IGALPHA重鏈MRNA的表達之后，我們進一步分析IGALPHA重鏈蛋白質在上皮性腫瘤細胞中的表達。我們利用抗IGALPHA單克隆抗體經(jīng)WESTERNBLOTTING檢測HELA，MCF一7，SW480，MGC，CNEL五種上皮性腫瘤細胞系中IGALPHA重鏈蛋白。結果發(fā)現(xiàn)，五種上皮性腫瘤細胞均表達56KD的IGALPHA重鏈蛋白。同時，我們采用FACSFLUORESCENTACTIVATEDCELLSONEO來分析IGALPHA重鏈蛋白在上皮性腫瘤細胞中的表達。為了排除上皮性腫瘤細胞系中存在B細胞系的污染，我們以CDL9分子作為B細胞系特異性標志，通過雙參數(shù)FACS，同時檢測五種上皮性腫瘤細胞中IGALPHA蛋白和CDL9蛋白。結果五種上皮性腫瘤細胞中均發(fā)現(xiàn)IGALPHA重鏈蛋白的表達，而不存在CDL9蛋白的陽性信號。因此我們確證I土廑絲勝疸紲照麥鯊IG壘B墮重壁蛋自廈同時也證實了所有五種上皮性腫瘤細胞系中均不存在B淋巴細胞系的污染。進一步，我們采用質譜分析從氨基酸水平證實IGALPHA蛋白在腫瘤細胞中的表達。將CNEL全蛋白通過SDSPAGE膠分離，切下5060KD蛋白質分子量范圍的膠條，利用質譜分析蛋白的氨基酸序列。質譜結果匹配到20種不同的蛋自，其中包含ANTICOLORECTALCARCINOMAIGHEAVYCHAINPROTEIN，其匹配的氨基酸序列位于IG重鏈V區(qū)。雖然我們沒有獲得IG重鏈CA區(qū)的直接信息，但IG重鏈V區(qū)的信息仍然叢氫基壁丕王適塞工土廛性旦生疸紲照篚笪麥達K重焦蛋白。在上皮性腫瘤細胞系分析的基礎上，我們進一步以宮頸癌組織為材料分析IGALPHA重鏈的表達。考慮到上皮組織細胞中的IGALPHA蛋白無法區(qū)分是來源于粘膜層中漿細胞，還是自身合成的，所以我們選擇原位雜交ISH檢測上皮性腫瘤組織中IGALPHA重鏈MRNA的表達。我們以IGALPHA重鏈的C區(qū)為探針，利用9例宮頸炎癥組織和10例宮頸癌組織進行了ISH分析。結果發(fā)現(xiàn)，9例富II