簡(jiǎn)介：中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所博士學(xué)位論文人支氣管上皮細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化中DNAPKCS的生物學(xué)功能研究姓名孫敬芬申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)衛(wèi)生毒理學(xué)指導(dǎo)教師吳德昌周平坤20030601KIPLBMMRNCBINERNHEJODPCRPAGEP13KRBRT_PCRSDSTBSTCRTRISVDJXRCCDNADEPENDENTPROTEINKINASEINTERACTIONPROTEINLURIA．BERTANIMEDIUMMISMATCHREPAIRNATIONALCENTERFORBIOTECTMOLOGYINFORMATIONNUCLEOTIDEEXCISIONREPAIRNONHOMOLOGOUSENDJOININGOPTICALDENSITYPOLYMERASECHAINREACTIONPOLYACRYAMIDEGELELECTROPHORESISPHOSPIHC}INOSITIDE3KINASERETINOBLASTOMAPROTEINREVERSETRANSCRIPTIONPCRSODIUMDODECYLSULFATETRISBUFFEREDSALINETRANSCRIPTIONCOUPLEDREPAIRTRISHYDROXYMETHYLAMINOMETHANEVARIABLEDIVERSEJOININGXRAYREPAIRCROSSCOMPLEMENTINGGENE2

簡(jiǎn)介：第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性及移植治療腦梗塞的初步研究姓名桂莉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師李露斯20030401第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文NFNGFNPFNSE0DPBSSEPTGF一6INCUFOFILAMENTNERVEGROWTHFACTORNEUFITEPROMOTINGFACTORNEURONSPECIFICENOLASEOPTICALDENSITYPHOSPHATEBUFFEREDSALINESOMOTOSENSORYEVOKEDPOTENTIALSTRANSFORMINGGROWTHFACTORBL2神經(jīng)絲蛋白神經(jīng)生長(zhǎng)因子促軸索因子神經(jīng)元特異烯醇化酶光密度磷酸鹽緩沖生理鹽水體感誘發(fā)電位轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子BI

簡(jiǎn)介：華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文人體組織神經(jīng)干細(xì)胞的培養(yǎng)及生物學(xué)特性研究姓名陳剛申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)神經(jīng)外科指導(dǎo)教師薛德麟20040401華中科技太拳同濟(jì)區(qū)學(xué)境博士學(xué)位磚文人體組織神經(jīng)T細(xì)胞的培養(yǎng)及生物學(xué)特性研究博士研究生；陳剛導(dǎo)師薛德麟教授中文摘要第一部分人胚腦神經(jīng)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)和鑒定摘要目的探討體外分離培養(yǎng)人胚腦神經(jīng)干細(xì)胞的方法，觀察其生長(zhǎng)特性并進(jìn)行鑒定。方法利用無(wú)痢清培養(yǎng)和單細(xì)胞克隆技術(shù)從人胚腦組織中分離培養(yǎng)神經(jīng)T細(xì)胞并用血清誘導(dǎo)其分化，應(yīng)用免疫熒光細(xì)胞化學(xué)技術(shù)對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞及其分化細(xì)胞進(jìn)行鑒定。結(jié)果從人胚腑組織分離的細(xì)胞群呈懸浮生長(zhǎng)，具有連續(xù)增殖的能力，表達(dá)神經(jīng)干細(xì)胞的標(biāo)志物NESTIN，這種細(xì)胞可分化為神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞并表達(dá)特異性抗原NSE、6FAP和CNP。結(jié)論我們從人胚腦組織中分離出的細(xì)胞具有自我更新能力和多向分化潛能，是神經(jīng)干細(xì)胞，它為進(jìn)～步的神經(jīng)干細(xì)胞基礎(chǔ)研究提供了一個(gè)良好的模型，為臨床應(yīng)_蚪J提供了細(xì)胞來(lái)源。關(guān)鍵詞神經(jīng)干細(xì)胞人類(lèi)胚胎腦培養(yǎng)第二部分入胚腦與脊髓神經(jīng)于細(xì)胞體外培養(yǎng)的差異摘要目的探討人胚腦源性神經(jīng)干細(xì)胞和脊髓源性神經(jīng)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)和分化的差異。方法從人胚腦組織和脊髓組織中分離培養(yǎng)神經(jīng)干紐臆。分為E；F組、BFGF組、E6F_BFBF組，在連續(xù)傳代過(guò)程中觀察并比較神經(jīng)干細(xì)胞體外培養(yǎng)特性的差異；用血清誘導(dǎo)神經(jīng)干細(xì)胞分化，觀察其分化狀況的不同。結(jié)果從人胚腦組織分離的細(xì)胞在BFGF犖獨(dú)存在時(shí)無(wú)法形成神經(jīng)球，在EOF或E6FBF6F存在時(shí)形成大量具有連續(xù)增殖能力的神經(jīng)球；從人胚脊髓組織分離的細(xì)胞在EGF單獨(dú)存在時(shí)無(wú)法形成神經(jīng)球，在BFGF單獨(dú)存在時(shí)只形成少量神經(jīng)球，在EGFBFGF存在時(shí)形成大量具有連續(xù)增殖能力的神經(jīng)球，同樣在EGFBFGF存

簡(jiǎn)介：該實(shí)驗(yàn)同時(shí)定時(shí)、定量研究了MSCS對(duì)異基因T淋巴細(xì)胞表型的影響以經(jīng)CO60照射后的不同數(shù)量的MSC作為基底層細(xì)胞接種體外分離純化的相同數(shù)量的異體T淋巴細(xì)胞分別于0小時(shí)、24小時(shí)、72小時(shí)、7天后用流式細(xì)胞技術(shù)測(cè)定各組T細(xì)胞表型的變化并計(jì)數(shù)各組T細(xì)胞數(shù)結(jié)果顯示當(dāng)T細(xì)胞數(shù)與MSC數(shù)比例為251A組、501B組時(shí)CD4CD25細(xì)胞與對(duì)照組相比均明顯增加A組P00023B組P00031CD8細(xì)胞明顯增多A組P00106B組P00148兩者均隨著共培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)而表達(dá)量逐漸增加A組和B組之間無(wú)明顯差別P02350實(shí)驗(yàn)組A組和B組與對(duì)照組相比CD3、CD4、CD25細(xì)胞無(wú)明顯差別當(dāng)T細(xì)胞數(shù)與MSC數(shù)比例為1001C組時(shí)與對(duì)照組相比CD4表達(dá)略上調(diào)但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義CD3、CD8、CD25、CD4CD25細(xì)胞無(wú)明顯差別隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)與MSC共孵育組和單獨(dú)T淋巴細(xì)胞培養(yǎng)組中T淋巴細(xì)胞的數(shù)量均呈下降趨勢(shì)在第7天時(shí)T細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)組細(xì)胞數(shù)減少約215﹪與MSC共孵育組T淋巴細(xì)胞數(shù)A組減少650﹪以上B組減少600﹪C組減少125﹪以上結(jié)果提示MSCS與T淋巴細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí)當(dāng)加入的MSCS達(dá)到一定的數(shù)量時(shí)T細(xì)胞MSC≤501可以引起T淋巴細(xì)胞的表型發(fā)生改變表現(xiàn)為CD4CD25細(xì)胞和CD8細(xì)胞明顯增多并且抑制T淋巴細(xì)胞的增殖而當(dāng)加入的MSCS小于一定的數(shù)量時(shí)T細(xì)胞MSC≥1001T淋巴細(xì)胞的表型無(wú)明顯改變并且刺激T淋巴細(xì)胞增殖表明MSC的負(fù)調(diào)控機(jī)制可能與誘導(dǎo)CD4CD25免疫調(diào)節(jié)性T細(xì)胞以及CD8T細(xì)胞增多有關(guān)同時(shí)也表明MSC對(duì)T淋巴細(xì)胞的作用與MSC的數(shù)量有關(guān)實(shí)驗(yàn)結(jié)果為防治異基因造血干細(xì)胞移植中GVHD和VGHR的發(fā)生、誘導(dǎo)免疫耐受提出了一條新的思路為臨床異基因造血干細(xì)胞移植時(shí)輸注MSCS預(yù)防GVHD的MSCS輸注數(shù)量提供了參考依據(jù)

簡(jiǎn)介：作者姓名劉薇學(xué)科專(zhuān)業(yè)普通外科學(xué)學(xué)院系、所湘雅醫(yī)院指導(dǎo)教師湯恢煥教授論文答辯日期型蘭’7．答辯委員會(huì)主席中南大學(xué)二。一一年五月U枝1從，。Ⅲ搿K缸噬盯磚僧RE甩，翟鬈Y麓，。1}，IR‘}原創(chuàng)性聲明?淵燃＼Y1917905所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作果。盡我所知，除了論文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不包含為獲他單位的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。與我共同工作的同志對(duì)本研究所作的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明。作者簽名剮數(shù)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本人了解中南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并根據(jù)國(guó)家或湖南省有關(guān)部門(mén)規(guī)定送交學(xué)位論文，允許學(xué)位論文被查閱和借閱學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保存學(xué)位論文。同時(shí)授權(quán)中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)，并通過(guò)網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。作者簽名童1墊導(dǎo)師簽名￡圣巫絲日期業(yè)年旦月衛(wèi)日

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多Fas信號(hào)激活樹(shù)突狀細(xì)胞炎性復(fù)合體形成的生物學(xué)意義與分子機(jī)制研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：分類(lèi)號(hào)密級(jí)國(guó)際十進(jìn)分類(lèi)號(hào)（UDC）第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)位論文高氟對(duì)成釉細(xì)胞生物學(xué)特性影響的體外研究（題名和副題名）楊婷（作者姓名）指導(dǎo)教師姓名段小紅副教授指導(dǎo)教師單位第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院口腔生物學(xué)教研室申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)口腔基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)（口腔生物學(xué)）論文提交日期201104答辯日期201105論文起止時(shí)間2010年10月至2011年04月學(xué)位授予單位第四軍醫(yī)大學(xué)高氟對(duì)成釉細(xì)胞生物學(xué)特性影響的體外研究研究生楊婷學(xué)科專(zhuān)業(yè)口腔基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)（口腔生物學(xué)）所在單位第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院導(dǎo)師段小紅副教授資助基金項(xiàng)目資助基金項(xiàng)目國(guó)家自然科學(xué)基金（項(xiàng)目編號(hào)81070819）陜西省科技計(jì)劃項(xiàng)目（項(xiàng)目編號(hào)2009K1706）關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞氟；成釉細(xì)胞；內(nèi)吞；吞噬；氯離子通道；凋亡；增殖中國(guó)人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)二O一一年四月

簡(jiǎn)介：上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文乳腺癌干細(xì)胞生物學(xué)特性及調(diào)控機(jī)制研究姓名黃明主申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師張鳳春20090401上海交通人學(xué)醫(yī)學(xué)院2006級(jí)博士研究生論文單層培養(yǎng)細(xì)胞中CD44CD24胡OW的比例為204O1％，而來(lái)源不同狀態(tài)的MCF7細(xì)胞進(jìn)行微球體培養(yǎng)，微球體細(xì)胞中CD44CD24卅刪的比例分別為118403％和824O8％，胙001。MDAMB23L及原代乳腺癌細(xì)胞中CD44CD24譏刪的表達(dá)分別為922431％和938424％。結(jié)論MCF7細(xì)胞通過(guò)微球體培養(yǎng)富集了腫瘤干細(xì)胞，而MDAMB231及原代乳腺癌細(xì)胞則不能。MDAMB231及原代乳腺癌細(xì)胞中CD44CD24舶W的表達(dá)與微球體形成不呈正相關(guān)。二、表阿霉素對(duì)乳腺癌微球體細(xì)胞和單層培養(yǎng)細(xì)胞作用的比較目的探討表阿霉素對(duì)乳腺癌微球體細(xì)胞和單層培養(yǎng)細(xì)胞的不同作用。方法MCF7細(xì)胞在干細(xì)胞培養(yǎng)條件下進(jìn)行微球體培養(yǎng)，噻唑藍(lán)THIAZOLYLBLUE，MTT法檢測(cè)表阿霉素對(duì)MCF一7微球體細(xì)胞和單層培養(yǎng)細(xì)胞的抑制率，流式細(xì)胞術(shù)分析表阿霉素作用下，MCF7微球體細(xì)胞和單層培養(yǎng)細(xì)胞中CD44CD24。的表達(dá)及細(xì)胞周期變化。結(jié)果相同濃度100NG／ML的表阿霉素對(duì)MCF7微球體細(xì)胞的抑制率明顯低于對(duì)單層培養(yǎng)細(xì)胞的抑制率，腳01；400NG／IJL的表阿霉素作用72H，MCF7微球體細(xì)胞的CD44CD24帕W比例為228448％，高于單層培養(yǎng)細(xì)胞334O8％，氏O01；MCF7微球體細(xì)胞含有較高比例的G0／G1期74334320％細(xì)胞，高于MCF7單層培養(yǎng)細(xì)胞53404345％，氏001，表阿霉素對(duì)微球體細(xì)胞與單層培養(yǎng)細(xì)胞的G0／GI期影響較小，但顯著影響S

簡(jiǎn)介：Y。警踟7墨。■』_分類(lèi)毒一密緞T二‘U口C；三I每貸塞纏號(hào)_；壬I“’學(xué)‘一__位論掣A辨EN9ESI號(hào)；白藜蘆醇誘導(dǎo)髓母紐胞瘤細(xì)胞NF一曲括化_J、一√、眵蜷意激析’，，I’、”。_。一J范少華，，R|。，一，。?！?。，1“大連醫(yī)科大學(xué)7一1，～’。H，學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本學(xué)位論文作者及指導(dǎo)教師完全_『解大連醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意大連醫(yī)科大學(xué)保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交學(xué)位論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)大連醫(yī)科大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。論文作者簽名塹窆竺指導(dǎo)教師簽名主LI互簽字日期D6年6月歹日FRR

簡(jiǎn)介：目的研究MDS來(lái)源的成骨細(xì)胞的生物學(xué)特性及其體外造血支持能力，探討成骨細(xì)胞在MDS發(fā)病中的作用方法1第一部分采用酶聯(lián)免疫夾心ELISA法檢測(cè)12例MDS患者骨髓上清液中SDF1A水平，探討MDS骨髓微環(huán)境是否存在異常。2第二部分以人成骨細(xì)胞系HFOB119為對(duì)象，研究成骨細(xì)胞的生物學(xué)特性，初步探討成骨細(xì)胞在造血調(diào)控中的作用。應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)FLOWCYTOMETRY，F(xiàn)CM分析人成骨細(xì)胞系HFOB119的免疫表型，RTPCR檢測(cè)生長(zhǎng)因子的表達(dá)情況。3第三部分研究MDS來(lái)源的成骨細(xì)胞的生物學(xué)特性，探討成骨細(xì)胞在MDS發(fā)病中的作用。采集MDS患者和正常供者骨髓標(biāo)本，分離、培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞MESENCHYMALSTEMCELL，MSC，進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察、免疫表型及成纖維細(xì)胞集落CFUF形成分析。取第3代MSC體外誘導(dǎo)為成骨細(xì)胞，絲裂霉素C處理后做為滋養(yǎng)層細(xì)胞。在無(wú)外源性細(xì)胞因子的條件下，將經(jīng)FICOLL分離獲取的正常供者來(lái)源的單個(gè)核細(xì)胞MNC接種到成骨細(xì)胞上共培養(yǎng)，研究成骨細(xì)胞體外支持造血祖細(xì)胞生存的作用；應(yīng)用RTPCR在MRNA水平上分析由骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化的成骨細(xì)胞生長(zhǎng)因子的表達(dá)情況。結(jié)果1第一部分MDS難治性貧血伴有原始細(xì)胞增多RAEB組患者骨髓上清液中SDF1A水平明顯低于難治性貧血RA環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞性難治性貧血RAS組及對(duì)照組均P005。2第二部分FCM顯示，HFOB119表達(dá)CD44、CD73SH3、CD105SH2及CD90THY1，而不表達(dá)CD34、CD45、HLADR等造血細(xì)胞標(biāo)記；RTPCR顯示HFOB119表達(dá)OCT4、REX1等胚胎干細(xì)胞標(biāo)志但不表達(dá)HTERT，并經(jīng)證實(shí)具有多向分化的潛能，此外HFOB119還能表達(dá)SCF，IL6，IL11，SDF1，GMCSF和GCSF等多種生長(zhǎng)因子。3第三部分MDS患者M(jìn)SC在體外呈典型的成纖維樣細(xì)胞形態(tài)，細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)模式與正常供者來(lái)源的MSCS無(wú)明顯差異。MDS患者和正常供者骨髓細(xì)胞的成纖維集落形成能力CFUF也沒(méi)有差異P005。和MNC共培養(yǎng)后，發(fā)現(xiàn)MDS患者來(lái)源的成骨細(xì)胞在無(wú)外源性細(xì)胞因子的情況下仍能夠短期3周維持GMCFC造血祖細(xì)胞的存活。MDS成骨細(xì)胞組培養(yǎng)上清中的細(xì)胞形成的CFUGM集落數(shù)與對(duì)照組比較無(wú)明顯差異P005。RTPCR發(fā)現(xiàn)，正常供者來(lái)源的MSC表達(dá)SCF，IL6，IL11，SDF1等生長(zhǎng)因子MRNA，當(dāng)誘導(dǎo)分化為成骨細(xì)胞時(shí)開(kāi)始表達(dá)GCSFMRNA，但始終未見(jiàn)GMCSF表達(dá)。MDS患者來(lái)源的MSCS也能表達(dá)上述生長(zhǎng)因子的MRNA，當(dāng)誘導(dǎo)分化為成骨細(xì)胞后開(kāi)始表達(dá)GCSFMRNA，同樣未見(jiàn)GMCSF表達(dá)。結(jié)論1MDS患者SDF1CXCR4系統(tǒng)存在異常，檢測(cè)SDF1A水平可能有助于MDS的診斷、判斷其預(yù)后，并為治療MDS提供新思路。2人成骨細(xì)胞系HFOB119可能是處于較早階段的成骨祖細(xì)胞，表達(dá)多種造血相關(guān)的生長(zhǎng)因子，成骨細(xì)胞可能對(duì)骨髓正常造血具有重要的調(diào)控作用。3MDS患者來(lái)源的成骨細(xì)胞表達(dá)多種造血相關(guān)的生長(zhǎng)因子，并能維持GMCFC造血祖細(xì)胞的存活，提示MDS的病變可能并不累及成骨細(xì)胞。

簡(jiǎn)介：R7342密級(jí)密級(jí)培美曲塞聯(lián)合索拉非尼對(duì)肺癌細(xì)胞株的生物學(xué)作用及其機(jī)制探討培美曲塞聯(lián)合索拉非尼對(duì)肺癌細(xì)胞株的生物學(xué)作用及其機(jī)制探討THEEFFECTOFCOMBINEDADMINISTRATIONOFPEMETREXEDSAFENIBITSMECHANISMINNSCLCCELLLINES作者姓名蔣延文學(xué)科專(zhuān)業(yè)呼吸病學(xué)導(dǎo)師陳良安教授答辯委員會(huì)主席趙鳴武論文答辯日期二0一二年五月三十日院校地址北京市復(fù)興路28號(hào)郵政編碼100853作者姓名蔣延文學(xué)科專(zhuān)業(yè)呼吸病學(xué)導(dǎo)師陳良安教授答辯委員會(huì)主席趙鳴武論文答辯日期二0一二年五月三十日院校地址北京市復(fù)興路28號(hào)郵政編碼100853目錄目錄中文摘要1英文摘要2前言4正文7第一部分第一部分培美曲塞和索拉非尼不同用藥方式對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株生長(zhǎng)的抑制作用培美曲塞和索拉非尼不同用藥方式對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株生長(zhǎng)的抑制作用第一節(jié)A549和H1975細(xì)胞株EGFR、KRAS基因突變檢測(cè)分析1、材料72、方法83、結(jié)果124、討論195、結(jié)論19第二節(jié)培美曲塞和索拉非尼IC50值的確定1、材料202、方法213、結(jié)果224、討論225、結(jié)論24第三節(jié)培美曲塞和索拉非尼不同給藥方式對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株生長(zhǎng)的抑制作用1、材料252、方法263、結(jié)果284、討論315、結(jié)論33第四節(jié)聯(lián)合用藥指數(shù)分析培美曲塞和索拉非尼不同給藥方式對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株生長(zhǎng)的抑制作用

簡(jiǎn)介：目的從胎盤(pán)組織中分離培養(yǎng)獲得間充質(zhì)干細(xì)胞MESENCHYMALSTEMCELLS，MSCS已成為干細(xì)胞研究領(lǐng)域的一大熱點(diǎn)。MSCS在胎盤(pán)的分布并不均衡，如何取材直接影響到胎盤(pán)問(wèn)充質(zhì)干細(xì)胞PLACENTADERIVEDMESENCHYMALSTEMCELLS，PMSCS在體外的有效獲取及擴(kuò)增。目前尚無(wú)特異性的標(biāo)記物可用于成體MSCS的識(shí)別。本實(shí)驗(yàn)旨在利用一些通用的MSCS標(biāo)記物，探索MSCS在人胎盤(pán)的分布規(guī)律，并在此基礎(chǔ)上通過(guò)分組分離培養(yǎng)PMSCS，觀察細(xì)胞生物學(xué)的特性，初步驗(yàn)證其規(guī)律，為MSCS的基礎(chǔ)研究和臨床應(yīng)用奠定良好的基礎(chǔ)。方法取無(wú)指征剖宮產(chǎn)之足月健康產(chǎn)婦的新鮮胎盤(pán)組織，按中央帶A、中間帶B和邊緣帶C、絨毛板層A、中間層B和基底板層C分為九組AA、AB、AE、BA、BB、BE、CA、CB、CC，連續(xù)切片，以CDL66、CD44、CD29分別做免疫熒光和免疫組化染色。顯微鏡下觀察陽(yáng)性細(xì)胞分布區(qū)域，采用HPIAS1000彩色病理圖象分析系統(tǒng)進(jìn)行圖象分析，檢測(cè)陽(yáng)性細(xì)胞區(qū)域的光密度值OD，以平均光密度值作為衡量表達(dá)強(qiáng)弱的標(biāo)準(zhǔn)。所測(cè)數(shù)據(jù)采用SPSS軟件進(jìn)行分析。再按上述分組取材分離培養(yǎng)PMSCS，觀察各組細(xì)胞增殖情況有無(wú)差異，進(jìn)一步驗(yàn)證上述標(biāo)記物定位的可靠性；同時(shí)檢測(cè)所培養(yǎng)細(xì)胞的表面抗原，誘導(dǎo)傳代后的細(xì)胞向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化，證實(shí)其具有MSCS的特點(diǎn)。結(jié)果1首次證實(shí)3個(gè)標(biāo)記物CDL66、CD44、CD29陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞的分布情況較一致，主要集中于血管內(nèi)皮下及血管附近間質(zhì)內(nèi)，胎盤(pán)中央帶中間層AB陽(yáng)性細(xì)胞較集中，陽(yáng)性表達(dá)的強(qiáng)度較強(qiáng)，其OD值與其它組相比差異有顯著性P＜005，邊緣帶陽(yáng)性細(xì)胞稀少，陽(yáng)性表達(dá)的強(qiáng)度較弱；2分組分離培養(yǎng)PMSCS結(jié)果顯示在相同處理方法下和相同條件培養(yǎng)基中，各組間細(xì)胞增殖情況有差異，其中AB組生長(zhǎng)速率和細(xì)胞數(shù)量的增加較其它組顯著；3流式細(xì)胞儀檢測(cè)表面抗原表明，培養(yǎng)所獲細(xì)胞表達(dá)CDL66、CD44、CD29、CDL05，而不表達(dá)CD45、CD34以及HLADR，提示呈MSCS表型；4向神經(jīng)細(xì)胞誘導(dǎo)分化結(jié)果表明，培養(yǎng)細(xì)胞有MSCS跨胚層分化的潛能。結(jié)論胎盤(pán)各部位均存在CDL66、CD44、CD29陽(yáng)性表達(dá)的細(xì)胞，但臍帶附著處下方胎盤(pán)中間層AB相對(duì)其他部位而言可能為MSCS富集區(qū)域。各組MSCS的數(shù)量與MSCS的體外分離培養(yǎng)效率呈正相關(guān)。CDL66、CD44和CD29作為成體MSCS的定位指標(biāo)有較好的可信度。

簡(jiǎn)介：誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞（IPS），具有和胚胎干細(xì)胞類(lèi)似的發(fā)育多潛能性，由于其避開(kāi)了胚胎干細(xì)胞研究面臨的倫理和法律等問(wèn)題，在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。目前有關(guān)缺氧低氧對(duì)IPS細(xì)胞的生物學(xué)功能的影響尚不清楚。IPS對(duì)腎缺血再灌注損傷ISCHEMIAREPERFUSIONINJURY，IRI有否治療作用，目前尚無(wú)報(bào)道。目的本工作擬在IPS細(xì)胞，研究缺氧對(duì)IPS細(xì)胞的增值、遷移、黏附、凋亡以及基因表達(dá)等的影響；進(jìn)而用缺氧誘導(dǎo)因子1?。℉IF1?。㏒IRNA轉(zhuǎn)染IPS細(xì)胞，觀察降低HIF1Α表達(dá)后，缺氧對(duì)IPS細(xì)胞作用的影響；建立小鼠急性腎缺血模型，觀察IPS細(xì)胞是否對(duì)腎缺血再灌注損傷有保護(hù)作用。方法應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄病毒載體向原代培養(yǎng)的MEF細(xì)胞導(dǎo)入SOX2、KLF4、OCT4和CMYC四種基因，誘導(dǎo)出IPS細(xì)胞。IPS細(xì)胞實(shí)驗(yàn)分為四組①常氧（NMOXIA）組、②缺氧（HYPOXIA）組、③缺氧轉(zhuǎn)染隨機(jī)序列SIRNA（HYPOXIACONSIRNA）組、④缺氧轉(zhuǎn)染HIF1ASIRNA（HYPOXIAHIF1ASIRNA）組，向③④組IPS細(xì)胞分別轉(zhuǎn)染CONSIRNA和HIF1ASIRNA，然后將②③④同時(shí)置缺氧盒里缺氧處理12小時(shí)，應(yīng)用REALTIMEPCR、流式細(xì)胞儀等技術(shù)檢測(cè)各組IPS細(xì)胞的基因表達(dá)、凋亡、增殖、遷移、粘附等情況。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)建立腎缺血再灌注模型，采用摘除右腎，左腎動(dòng)靜脈扎閉50分鐘的方法，分別向各組左腎包膜內(nèi)注射以下不同處理過(guò)的IPS細(xì)胞常氧IPS細(xì)胞、低氧處理IPS細(xì)胞、低氧CONSIRNAIPS細(xì)胞、低氧HIF1ASIRNAIPS細(xì)胞和PBS，觀察上述IPS細(xì)胞干預(yù)對(duì)腎缺血再灌注損傷的影響。結(jié)果1缺氧及HIF1A對(duì)IPS細(xì)胞增殖的影響與常氧組（1±0）相比，HYPOXIA組（086±004）IPS細(xì)胞數(shù)明顯下降，下降至缺氧前的86±4％，P結(jié)論1缺氧處理12小時(shí)可抑制IPS細(xì)胞增殖；降低IPS細(xì)胞HIF1A表達(dá)可加重缺氧對(duì)IPS細(xì)胞增殖的抑制作用。2缺氧處理12小時(shí)可促進(jìn)IPS細(xì)胞遷移；降低HIF1A表達(dá)，可明顯抑制缺氧促進(jìn)IPS細(xì)胞遷移的作用。3IPS細(xì)胞可自由穿過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞；缺氧處理可明顯抑制IPS細(xì)胞穿內(nèi)皮細(xì)胞遷移；降低HIF1A表達(dá)又會(huì)逆轉(zhuǎn)缺氧抑制遷移的現(xiàn)象，促進(jìn)IPS細(xì)胞穿內(nèi)皮遷移。4缺氧處理12小時(shí)，對(duì)IPS細(xì)胞早期凋亡和晚期凋亡沒(méi)有顯著作用；但轉(zhuǎn)染HIF1ASIRNA降低缺氧誘導(dǎo)因子表達(dá)后，可在一定程度上抑制晚期凋亡。5缺氧處理IPS細(xì)胞明顯抑制IPS細(xì)胞與IPS細(xì)胞黏附以及IPS細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的粘附，降低缺氧誘導(dǎo)因子表達(dá)能逆轉(zhuǎn)此效應(yīng)。6缺氧處理可抑制IPS細(xì)胞SOD1、FGFR2、CCS、TEK、PLAU、NME4、MTA2等基因的RNA表達(dá)，降低IPS細(xì)胞HIF1A表達(dá)能抑制缺氧對(duì)IPS細(xì)胞上述基因表達(dá)的影響。7缺氧處理能促進(jìn)IPS細(xì)胞在小鼠缺血腎臟中的遷移，降低HIF1A表達(dá)后，IPS細(xì)胞遷移距離相對(duì)縮短。8腎包膜下給予缺氧處理過(guò)的IPS細(xì)胞，與PBS組以及正常IPS組相比，小鼠血清肌酐值明顯下降，表明缺氧處理過(guò)的IPS細(xì)胞能改善缺血再灌注損傷腎臟的功能。9IPS細(xì)胞可明顯減小缺血再灌注損傷腎臟缺血面積；降低缺氧處理的IPS細(xì)胞的HIF1A表達(dá)，可抑制缺氧IPS細(xì)胞對(duì)缺血再灌注腎臟的作用。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多肺結(jié)核患者外周淋巴細(xì)胞亞群及協(xié)同刺激分子PD-1-PD-L1的表達(dá)特性與生物學(xué)意義.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：背景氣道結(jié)構(gòu)重塑尤其是氣道平滑肌重塑是支氣管哮喘病程中的重要病理改變之一。已有研究顯示這一改變與氣道平滑肌細(xì)胞的增殖、凋亡、遷移等生物學(xué)特性的異常有關(guān)但具體機(jī)制尚不十分明確。業(yè)已證實(shí)網(wǎng)狀蛋白家族4RETICULARPROTEINFAMILYRTN4成員中的NOGOB參與了血管平滑肌細(xì)胞的凋亡、增殖、遷移等生物學(xué)過(guò)程。對(duì)于具有同樣胚胎起源的氣道平滑肌細(xì)胞AIRWAYSMOOTHMUSCLECELLASMCNOGOB在該細(xì)胞中的表達(dá)情況及生物學(xué)作用目前尚未見(jiàn)報(bào)道。因此探討NOGOB在氣道平滑肌細(xì)胞中的的表達(dá)進(jìn)一步闡明其對(duì)氣道平滑肌細(xì)胞的生物學(xué)功能的影響并揭示其在哮喘氣道結(jié)構(gòu)重塑中所起的作用具有重要的學(xué)術(shù)價(jià)值。目的明確NOGOB在原代培養(yǎng)的人支氣管平滑肌細(xì)胞表達(dá)情況及其表達(dá)下調(diào)對(duì)平滑肌細(xì)胞增殖、凋亡、遷移等生物學(xué)特性的影響。同時(shí)觀察哮喘相關(guān)炎癥介質(zhì)作用對(duì)氣道平滑肌細(xì)胞NOGOB表達(dá)的影響以探討NOGOB在哮喘氣道結(jié)構(gòu)重塑中的可能作用。方法一、人支氣管平滑肌細(xì)胞中NOGOBMRNA及蛋白的表達(dá)情況選用體外培養(yǎng)的原代人支氣管平滑肌細(xì)胞以HELA細(xì)胞作為陽(yáng)性對(duì)照先提取細(xì)胞總RNA及蛋白然后通過(guò)RTPCR及WESTERNBLOTTING等方法觀察了支氣管平滑肌細(xì)胞中NOGOBMRNA及蛋白表達(dá)情況。二、下調(diào)NOGOB表達(dá)對(duì)氣道平滑肌細(xì)胞增殖、凋亡和遷移的影響一在采用陽(yáng)離子脂質(zhì)體介導(dǎo)的SIRNA干擾的方法下調(diào)入支氣管平滑肌細(xì)胞NOGOB的表達(dá)后檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞總數(shù)CCK8法并比較其差異以評(píng)價(jià)NOGOB表達(dá)下調(diào)對(duì)人支氣管平滑肌細(xì)胞增殖的影響。二在采用SIRNA干擾的方法有效下調(diào)了人支氣管平滑肌細(xì)胞NOGOB的表達(dá)后以TNFΑ刺激各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞一定時(shí)間以誘導(dǎo)凋亡然后采用ANNEXINVPI雙染法于流式細(xì)胞儀上計(jì)數(shù)各實(shí)驗(yàn)組早期凋亡的細(xì)胞占總細(xì)胞數(shù)的比例以評(píng)價(jià)NOGOB表達(dá)下調(diào)對(duì)TNFΑ誘導(dǎo)的人支氣管平滑肌細(xì)胞凋亡的影響。三將人支氣管平滑肌細(xì)胞接種于MILLICELL小室中繼而采用SIRNA干擾的方法下調(diào)細(xì)胞NOGOB的表達(dá)。在RNA干擾起效后通過(guò)調(diào)高M(jìn)ILLICELL小室外室的血清濃度以開(kāi)始細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)。通過(guò)檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組發(fā)生遷移的細(xì)胞總數(shù)以評(píng)價(jià)NOGOB表達(dá)下調(diào)對(duì)人支氣管平滑肌細(xì)胞遷移的影響。三、哮喘相關(guān)炎癥介質(zhì)對(duì)氣道平滑肌細(xì)胞NOGOB表達(dá)的影響在完成上述實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上選擇哮喘相關(guān)的炎癥介質(zhì)IL4、IL13分別以IL410NGML、IL1310NGML及兩者的組合各10NGML刺激體外培養(yǎng)的原代人支氣管平滑肌細(xì)胞采用REALTIMEPCR及WESTERNBLOTTING等方法分別檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)MRNA及蛋白表達(dá)的變化以評(píng)價(jià)哮喘相關(guān)炎癥介質(zhì)對(duì)支氣管平滑肌細(xì)胞NOGOB表達(dá)的影響。結(jié)果一、人支氣管平滑肌細(xì)胞中NOGOBMRNA及蛋白的表達(dá)情況提取人支氣管平滑肌細(xì)胞及HELA細(xì)胞的總RNA及蛋白后RTPCR結(jié)果顯示在300BP處HELA細(xì)胞及人支氣管平滑肌細(xì)胞均可見(jiàn)NOGOBMRNA特異性條帶表達(dá)。而WESTERNBLOTTING顯示在約37KD處人支氣管平滑肌細(xì)胞及HELA細(xì)胞均可見(jiàn)NOGOB蛋白表達(dá)。從而證實(shí)人支氣管平滑肌細(xì)胞中存在NOGOB的表達(dá)。二、下調(diào)NOGOB表達(dá)對(duì)人支氣管平滑肌細(xì)胞增殖、凋亡和遷移的影響一采用SIRNA干擾下調(diào)人支氣管平滑肌細(xì)胞中NOGOB表達(dá)后72小時(shí)細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果顯示CCK8法與陰性SIRNA對(duì)照組比NOGOB表達(dá)下調(diào)組細(xì)胞數(shù)高于陰性對(duì)照組但兩者無(wú)顯著性差異。NOGOB表達(dá)下調(diào)組1244±0188陰性對(duì)照組11974±0114P＞005。提示NOGOB表達(dá)下調(diào)對(duì)人支氣管平滑肌細(xì)胞的增殖無(wú)明顯影響。二在采用SIRNA干擾下調(diào)入支氣管平滑肌細(xì)胞NOGOB表達(dá)的基礎(chǔ)上ANNEXINVPI雙染法結(jié)果顯示TNFA處理前后NOGOB表達(dá)下調(diào)組凋亡細(xì)胞增加數(shù)明顯低于陰性對(duì)照組兩者有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異陰性對(duì)照組965±042％NOGOB表達(dá)下調(diào)組002±011％P＜001。提示NOGOB表達(dá)下調(diào)可減少TNFA誘導(dǎo)的支氣管平滑肌細(xì)胞凋亡。三在采用SIRNA干擾下調(diào)人支氣管平滑肌細(xì)胞NOGOB表達(dá)的基礎(chǔ)上分別對(duì)NOGOB下調(diào)組、陰性SIRNA對(duì)照組發(fā)生遷移的細(xì)胞總數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)結(jié)果顯示與陰性SIRNA對(duì)照組相比NOGOB表達(dá)下調(diào)組減少了44倍兩者有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異陰性對(duì)照組0616±004NOGOB表達(dá)下調(diào)組0164±0006P＜001。提示NOGOB表達(dá)下調(diào)可抑制人支氣管平滑肌細(xì)胞的遷移功能。三、哮喘相關(guān)炎癥介質(zhì)對(duì)氣道平滑肌細(xì)胞NOGOB表達(dá)的影響一IL410NGML、IL1310NGML單獨(dú)刺激24小時(shí)未能使人支氣管平滑肌細(xì)胞中NOGOB的表達(dá)水平發(fā)生顯著變化而IL4和IL13各10NGML共同作用后NOGOBMRNA表達(dá)出現(xiàn)降低其中1H時(shí)表達(dá)量較OH基礎(chǔ)值下降約7倍相對(duì)CT值0小時(shí)11小時(shí)0136±0009P＜001隨著時(shí)間推移其表達(dá)逐漸恢復(fù)。且IL4、IL13共同作用12小時(shí)后人支氣管平滑肌細(xì)胞中NOGOB蛋白表達(dá)開(kāi)始下降至24小時(shí)時(shí)下降最為明顯各時(shí)間點(diǎn)的空白對(duì)照無(wú)明顯變化。提示NOGOB可能作為哮喘氣道炎癥導(dǎo)致氣道重塑的下游通路蛋白而參與了哮喘的氣道結(jié)構(gòu)重塑。結(jié)論一、體外培養(yǎng)的原代人支氣管平滑肌細(xì)胞存在NOGOB的表達(dá)下調(diào)NOGOB的表達(dá)可抑制人支氣管平滑肌細(xì)胞的凋亡和細(xì)胞遷移能力但對(duì)細(xì)胞的增殖無(wú)明顯影響。二、哮喘相關(guān)的炎癥介質(zhì)IL4、IL13共同作用可時(shí)間依賴(lài)性的下調(diào)人支氣管平滑肌細(xì)胞的NOGOBRNA及蛋白水平的表達(dá)。