簡介：作者姓名學(xué)科專業(yè)導(dǎo)師指導(dǎo)教師張曉梅消化系病楊云生郭明洲裴雪濤／答辯委員會主席釤＼，教授研究員論文答辯日期二。一。年五月十九日院校地址北京市復(fù)興路28號郵政編碼100853軍醫(yī)進修學(xué)院。Y1111111111171111911171111161117111161111研究生學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明秉承我院“敬業(yè)、勤奮、求實、創(chuàng)新”的學(xué)風(fēng)，本人聲明所呈交的論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不含為獲得我院或其他教育機構(gòu)的學(xué)位及證書而使用過的材料，對本文的研究作出貢獻的個人或集體，均已在文中做了明確的說明并表示謝意。申請學(xué)位論文與資料若有不實之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽名；‘嚎坰同期XZ年戶月哆日指導(dǎo)教師簽冬J≥銘日期糾暉J明少日軍醫(yī)進修學(xué)院研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人保證畢業(yè)離院后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時署名單位為軍醫(yī)進修學(xué)院或解放軍總醫(yī)院。學(xué)院有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文原件、復(fù)印件和電子版本，可以采用影印、縮印、掃描或其它手段保存論文以供被查閱和借閱。學(xué)院可以公布學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容保密內(nèi)容除外。論文作者簽名；髟同期。『O每，爿羅日指剝幣簽螄期如年弓矽日

簡介：蘇州大學(xué)碩士學(xué)位論文INV16急性髓細(xì)胞白血病的分子細(xì)胞遺傳學(xué)研究姓名李明申請學(xué)位級別碩士專業(yè)血液內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師薛永權(quán)20030501LNV16急中_衄細(xì)胞由L札塒的分R圳胞遺傳學(xué)LJF究INV16AML的價值③為提高INV16的檢出率，對所有AML均應(yīng)采用FISH和／或RTPCR進行篩選，而不論其是否伴有骨髓嗜酸性粒細(xì)胞異常。關(guān)鍵詞白血病，髓細(xì)胞，急性；16號染色體倒位；熒光原位雜交；細(xì)胞遺傳學(xué)；CBFL3／MYHLL融合基因；逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)著絲粒探針碩士研究生李明指導(dǎo)教師薛永僅

簡介：目的手足縱向括弧型骨骺LONGITUDINALEPIPHYSEALBRACKETLEB是一種罕見的導(dǎo)致手指或足趾畸形的遺傳病。本實驗研究通過隨訪一個遺傳家系，用染色體核型分析及比較基因組雜交對LEB進行遺傳學(xué)初步研究。方法通過隨訪先證者，調(diào)查一個手足縱向括弧型骨骺遺傳家系，繪制遺傳圖譜。經(jīng)家庭成員知情同意后，抽取該家系成員三代6人3名患者外周血備用。對所獲取標(biāo)本進行如下處理1提取外周血中血細(xì)胞，采用常規(guī)方法，經(jīng)植物凝集素PHA及秋水仙素處理后，行染色體核型分析。2用試劑盒提取外周血DNA，用紫外分光光度計對DNA樣本進行檢測，樣本濃度及純度OD260280達標(biāo)后，DNA樣本在遺傳學(xué)專業(yè)實驗室進行比較基因組雜交實驗COMPARATIVEGENOMEHYBRIDIZATIONCGH。3用試劑盒提取外周血DNA，經(jīng)質(zhì)量檢測所提取DNA樣本濃度及純度OD260280達標(biāo)后，進一步運用基因芯片技術(shù)如單核苷酸多態(tài)性SINGLENUCLEOTIDEPOLYMPHISMSNP、全基因組外顯子測序等，尋找并定位候選致病基因。結(jié)果成功繪制出該家系系譜分析圖染色體核型分析發(fā)現(xiàn)染色體數(shù)目無明顯異常，無染色體易位、倒位等異常，比較基因組雜交實驗結(jié)果顯示未發(fā)現(xiàn)染色體片段的重復(fù)與缺失，單核苷酸多態(tài)性檢查結(jié)果尚未得出。結(jié)論根據(jù)家系系譜圖及既往文獻報道，LEB可能為常染色體隱性遺傳，根據(jù)染色體核型分析及比較基因組雜交結(jié)果，未發(fā)現(xiàn)染色體數(shù)目變異，未發(fā)現(xiàn)染色體易位、倒位等異常，未發(fā)現(xiàn)染色體片段的重復(fù)與缺失。為進一步揭示LEB遺傳機制奠定了基礎(chǔ)。

簡介：點擊查看更多系統(tǒng)性紅斑狼瘡的遺傳流行病學(xué)研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：最近十幾年血壓研究中采用遙控測壓技術(shù)是一個重要進展。該技術(shù)現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于幾乎所有的實驗動物。美國心臟學(xué)會AHA在2005年的動物血壓測量指南中明確推薦遙控測壓方法適用于血壓波動性測量。我們的實驗中也采用遙控測壓技術(shù)來獲取血壓波動性表型數(shù)據(jù)。遙控測壓探頭作為該技術(shù)的核心元件其穩(wěn)定性是否可靠對實驗結(jié)果至關(guān)重要。在實驗中觀察到隨時間推移遙控測壓探頭定標(biāo)參數(shù)零點漂移值OFFSET和壓力敏感度SCALE會發(fā)生變化為了準(zhǔn)確校正數(shù)據(jù)在每次植入實驗前和取出測壓探頭后應(yīng)立即對測壓探頭進行定標(biāo)。同時在實驗中VANVLIET等發(fā)現(xiàn)環(huán)境溫度對測壓探頭定標(biāo)參數(shù)有影響。通常將遙控測壓探頭導(dǎo)管植入大鼠腹主動脈術(shù)后大鼠恢復(fù)到正常狀態(tài)所需時間取決于麻醉的種類、手術(shù)的程度和大鼠品系利用不同的評估指標(biāo)確定SPRAGUEDAWLEY大鼠完全恢復(fù)所需時間為3到12天。盡管已發(fā)現(xiàn)溫度可影響測壓探頭的定標(biāo)但是測壓探頭的零點漂移值和壓力敏感度在常溫25℃和接近生理溫度的37℃下的具體變化情況還未見報道。此外現(xiàn)在還沒有自發(fā)性高血壓大鼠SHR測壓探頭植入術(shù)后恢復(fù)時間的研究報道。血壓波動性BLOODPRESSUREVARIABILITYBPV是隨血壓動態(tài)監(jiān)測技術(shù)發(fā)展應(yīng)運而生的新概念。含義是血壓不是恒定的而是連續(xù)可變的這種變化程度稱為BPV。初期小規(guī)模臨床觀察顯示血壓和BPV均與高血壓患者的器官損傷相關(guān)均可預(yù)測高血壓患者的器官損傷。在自發(fā)性高血壓大鼠SPONTANEOUSLYHYPERTENSIVERATSSHR研究中證實了這一現(xiàn)象。隨后在確認(rèn)去竇弓神經(jīng)大鼠為單純性BPV升高不伴有持續(xù)高血壓動物模型基礎(chǔ)上展開研究。直接證明BPV升高即血壓不穩(wěn)定可導(dǎo)致心、腎、腦、血管等多個終末器官損傷。首次發(fā)現(xiàn)高BPV因素與高血壓因素的敏感器官可以不同BPV的較敏感器官為主動脈等大血管高血壓的較敏感器官為左心室和組織內(nèi)小血管從而明確指出高BPV是心血管損傷的獨立危險因素不依賴于高血壓因素。在一項研究中闡明高BPV在心血管損傷中的意義至少和高血壓同等重要。同時幾項大規(guī)模臨床研究結(jié)論與我們實驗室的研究結(jié)果不謀而合。例如1542例總體人群85年的隨訪研究表明BPV是總體人群心血管死亡的獨立預(yù)測指標(biāo)BPV升高可使總體人群心血管死亡可能性增加23倍。以上我們實驗室的動物實驗研究和國外大規(guī)模臨床研究均提示BPV升高是獨立而重要的心血管危險因子。鑒于此我們提出降低BPV即穩(wěn)定血壓可作為心血管疾病防治新策略。那么如何降低BPV重要的途徑是發(fā)展能降低BPV的藥物。但是這是一項艱巨的任務(wù)因為BPV的分子基礎(chǔ)目前不清楚。因此為了發(fā)展本身能降低BPV的藥物需要研究BPV的基因調(diào)控機制。研究策略之一就是通過對BPV表型遺傳研究篩選相關(guān)調(diào)控染色體部位確認(rèn)調(diào)控基因以及功能作用途徑。本課題主要開展了以下研究1首先研究了測壓探頭在25℃和37℃兩個溫度下定標(biāo)情況并在SHR及其正常對照WKY大鼠上比較了探頭植入術(shù)后7天與14天的血流動力學(xué)指標(biāo)和活動度以確定SHR術(shù)后恢復(fù)時間。2采用雜交動物模型在親本W(wǎng)KYSHR、F1、F2子代大鼠上測量BPV表型計算BPV表型遺傳決定度估算影響B(tài)PV的基因座數(shù)目。3對大鼠左右心室分別稱重計算心室肥厚指數(shù)與所得血流動力學(xué)指標(biāo)進行兩兩相關(guān)分析和多元回歸分析。第一部分大鼠遙控測壓技術(shù)應(yīng)用實驗一在一年期間內(nèi)測定了探頭在25℃和37℃時零點漂移值和壓力敏感度。在兩個不同溫度下開始時測壓探頭的零點漂移值之間差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義而壓力敏感度之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義；一年后測壓探頭的零點漂移值之間、壓力敏感度之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義。一年中隨著使用時間和次數(shù)增加測壓探頭的零點漂移值向負(fù)值發(fā)展從80±13MMHG到148±16MMHG壓力敏感度變化不大從244±03％到184±02％。實驗二SHR及其正常對照WISTARKYOTOWKY大鼠在探頭植入術(shù)后第7天和第14天分別記錄22小時血流動力學(xué)和活動度指標(biāo)。WKY、SHR的活動度和晝夜活動度差值在第14天與第7天之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義但收縮壓、舒張壓和平均動脈壓在第14天的測量值高于第7天有統(tǒng)計學(xué)意義；SHR的收縮壓波動性、舒張壓波動性、晝夜心率差值在第14天的測量值高于第7天有統(tǒng)計學(xué)意義而WKY的這些指標(biāo)在第14天與第7天之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。第二部分大鼠血壓波動性遺傳學(xué)研究實驗一遺傳學(xué)研究動物選用。已知自發(fā)性高血壓大鼠SHR與WISTARKYOTO大鼠WKY的血壓波動性表型差異明顯。因此本研究以SHR和WKY大鼠作為研究親代動物。1214周齡親代動物血壓選擇標(biāo)準(zhǔn)為收縮壓SHR150MMHGWKY150MMHG。雜交動物繁殖。雄性SHR與雌性WKY大鼠12交配獲得F1子代F1子代雄性與雌性隨機兄妹交配產(chǎn)生F2子代。交配周齡均為1214周每窩數(shù)量在1115只的動物方用于繁殖子代。采用2630周齡雄性動物進行血壓波動性表型測量。最終所得樣本量為17例SHR、19例WKY、29例F1、167例F2。實驗二血壓波動性表型測量。采用目前最先進的血壓遙控測量技術(shù)在清醒自由活動大鼠上記錄28小時表型值。所有實驗動物在環(huán)境控制室23±1℃光照黑暗12小時12小時濕度50±5％預(yù)適應(yīng)2周再進行血壓波動性表型測量。廣義遺傳決定程度DEGREEOFGEICDETERMINATIONDGD計算公式DGDVTVEVT其中VT代表環(huán)境變異加上遺傳變異即F2子代表型總變異；VE代表環(huán)境變異即親本SHR、WKY與F1子代表型變異平均值。分別計算出BPV和其他血流動力學(xué)表型的遺傳決定程度。收縮壓波動性、舒張壓波動性、平均動脈壓波動性、脈壓波動性的遺傳決定度分別為50％、57％、60％、48％理論推測影響B(tài)PV的數(shù)量性狀基因座QTL數(shù)目分別為12、05、07、06收縮壓、舒張壓、平均動脈壓、脈壓的遺傳決定度分別為52％、34％、46％、62％QTL數(shù)目分別為30、34、32、14。進一步的實驗研究包括基因型檢測和遺傳關(guān)聯(lián)分析正在與美國合作尋找調(diào)控BPV的QTL。第三部分大鼠左心室肥厚指數(shù)與血流動力學(xué)指標(biāo)相關(guān)分析。所有實驗動物在表型測量后麻醉處死取出心臟放入中性甲醛溶液保存。在實驗結(jié)束時對左右心室分別進行稱重。包括血壓波動性在內(nèi)的所有血流動力學(xué)指標(biāo)與左心室肥厚指數(shù)左心室重體重進行單因素回歸分析和多元回歸分析。多元回歸顯示只有血壓因素對左心室肥厚有顯著影響在F1子代大鼠上舒張壓對左心室肥厚指數(shù)提供351％的影響；在F2子代大鼠上收縮壓對左心室肥厚指數(shù)提供283％的影響。結(jié)論1為了獲得準(zhǔn)確可靠的SHR血壓數(shù)據(jù)需要對遙控測壓探頭進行定標(biāo)而且應(yīng)該在接近生理溫度的37℃下進行定標(biāo)。SHR在術(shù)后第14天時恢復(fù)得更好在此時測量血流動力學(xué)比較合適。2BPV的遺傳決定度高于BP而可能影響B(tài)PV的QTL數(shù)少于BP。收縮壓波動性、舒張壓波動性、平均動脈壓波動性、脈壓波動性的遺傳決定度分別為50％、57％、60％、48％理論推測QTL數(shù)分別為12、05、07、06。收縮壓、舒張壓、平均動脈壓、脈壓的遺傳決定度分別為52％、34％、46％、62％QTL數(shù)分別為30、34、32、14。3大樣本實驗證實左心室肥厚的主要決定因素為血壓。在F1大鼠上左心室肥厚指數(shù)的變異中有351％可由DBP來解釋P001在F2大鼠上左心室肥厚指數(shù)有283％可由SBP來解釋P0001。

簡介：石河子大學(xué)碩士學(xué)位論文腎細(xì)胞癌的臨床病理與分子遺傳學(xué)研究姓名鄒泓申請學(xué)位級別碩士專業(yè)病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師李鋒20070501學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人所呈交的學(xué)位論文是在我導(dǎo)師的指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含其他個人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體，均已在文中作了明確的說明并表示謝意。研究生簽名名P；H時間如1年6月憎日學(xué)位論文版權(quán)授權(quán)書本人完全了解石河子大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并向國家主管部門或指定機構(gòu)送交論文的電子版和紙質(zhì)版。有權(quán)將學(xué)位論文用于贏利目的的少量復(fù)制并允許論文進入學(xué)校圖書館被查閱。有權(quán)將學(xué)位論文的內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)進行檢索。有權(quán)將學(xué)位論文的標(biāo)題和摘要匯編出版。保密的學(xué)位論文在解密后適用本規(guī)定。研究生簽名≥侈乃H時間加7年6月／甲日】。專毫辛導(dǎo)師簽名1時間軸7年。月伸8

簡介：青島大學(xué)博士學(xué)位論文EB病毒相關(guān)胃癌腫瘤相關(guān)基因表現(xiàn)遺傳學(xué)調(diào)節(jié)機制的研究姓名劉霞申請學(xué)位級別博士專業(yè)神經(jīng)生物學(xué)指導(dǎo)教師羅兵20120602意義WNT5AML／M2∥3．500，P0．061；WNT5AM3／M4F一2．286，P0．131。④QPCR檢測結(jié)果顯示，去甲基化藥物AZA作用EBV陽性胃癌細(xì)胞系SUN719可以重新激活WNT5A，恢復(fù)其表達。⑤重組質(zhì)粒PCDNA3．1．WNT5A轉(zhuǎn)染EBV陽性胃癌細(xì)胞系SNU719，WESTERNBLOTTING結(jié)果顯示，外源性WNT5A表達可以顯著抑制WNT／13．CATENIN信號通路中13CATENIN表達。⑥與質(zhì)粒對照組及變異型WNT5A重組質(zhì)粒組比較，轉(zhuǎn)染野生型WNT5A重組質(zhì)粒的SUN719細(xì)胞C．JUN和C．MYC表達水平?jīng)]有發(fā)生顯著變化；而JUNB表達明顯升高，ATF2和EGFR轉(zhuǎn)錄表達顯著降低，差別具有統(tǒng)計學(xué)意義PO．05。⑦EBVAAC和EBVNGC組織中I曲基因啟動子甲基化檢出率分別為80．O％24／30和50．O％19／38，差異有顯著性F6．490，P0．011；EBVAGC和EBVNGC組織中TGF．131啟動子基因甲基化檢出率分別為50．O％，15／30和36．8％，14／38，差異無顯著性薩1．187，P0．276。EBVAGC和EBVNGC組織中RB蛋白表達率分別為43．3％13／30和63．2％24／38，TGF．131蛋白表達率分別為56．7％17／30和63．2％24／38，差異均無顯著性R．B2．656，P0．103TGF．B1FO．295，P0．587。胃癌組織中RB和TGF．131啟動子基因甲基化與其蛋白表達無明顯負(fù)相關(guān)RB2．943，P0．086，R0．208；TGF一131F3．051，P0．081，R0．212。胃癌組織中RB啟動子基因甲基化、RB蛋白表達缺失以及TGF．131蛋白表達與病人年齡、性別、分化程度和腫瘤部位無相關(guān)性，但與腫瘤浸潤深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)滬均0．05；TGF．P1啟動子基因甲基化與病人年齡、性別、分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無相關(guān)性，但與腫瘤浸潤深度和腫瘤部位相關(guān)尸均0．05。⑨與未轉(zhuǎn)染組和轉(zhuǎn)染脂質(zhì)體組比較，SIRNA．LMPL和SIRNA．I。MPITGF．P1轉(zhuǎn)染EBV陽性細(xì)胞GT38，均可導(dǎo)致GT38細(xì)胞MMP9，SURVIVIN和ICAML表達降低，而CDK4表達升高，差異均有顯著性尸均0．05；SIRNALMPITGF．131轉(zhuǎn)染組EGFR表達水平顯著高于對照組尸O．05，而SIRNA．LMPL組與對照組比較無顯著性差異。⑩與對照組比較，TGF．B1作用可導(dǎo)致EBV陽性GT38細(xì)胞ICAM．1的表達顯著降低，差異有顯著性P0．05，而在EBV陽性細(xì)胞系SNU719和EBV陰性細(xì)胞系SGC7901和HGC．27ICAM．1的表達無顯著差異；TGF．131作用對4種細(xì)胞系MMP9．SURVIVIN．CDK4和EGFRMRNA的轉(zhuǎn)錄表達無明顯影響。結(jié)論①EBV陰性細(xì)胞系中WNT5A的表達較為普遍，而在EBV陽性細(xì)胞系中則表達缺失或下調(diào)，去甲基化試劑處理可誘使EBV陽性細(xì)胞系WNT5A的重新表達，WNT5A編碼基因啟動子區(qū)高甲基化是EBV陽性細(xì)胞系WNT5A表達缺失或下調(diào)的重要機制。②EBVAGC組織中WNT5A編碼基因啟動子區(qū)呈高甲基化狀態(tài)，且其甲基化狀態(tài)明顯高于EBVNGC，提示W(wǎng)NT5A參與EBVAGC的發(fā)生發(fā)展，可能是EBVAGC重要的表觀遺傳學(xué)標(biāo)志。③外源性WNT5A的表達可誘導(dǎo)EBV陽性細(xì)胞系SNU719中某蝗細(xì)胞因子，如13CATENIN、JUNB、ATF2、EGFR表達水平的變化，這些變化可以抑制細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，提示W(wǎng)NT5A在EBVAGC發(fā)

簡介：第一部分重慶地區(qū)2型糖尿病家系代謝綜合征及相關(guān)指標(biāo)的遺傳度分析目的了解2型糖尿病T2DM家系中T2DM患者和非糖尿病DM一級親屬代謝綜合征MS及主要組分的患病率，并采用遺傳度分析，了解各種代謝指標(biāo)受遺傳因素影響的程度。方法1選取重慶地區(qū)漢族人群中符合入選條件的T2DM家系。共納入247個家系，1312名研究對象，其中男587名，女725名。家系組共1178名，配偶組134名。研究對象測定人體測量學(xué)參數(shù)、血壓、血脂譜、超敏C反應(yīng)蛋白HSCRP、非酯化脂肪酸NEFA等，行口服葡萄糖耐量試驗OGTT。分別采用IDF和NCEPATPⅢ根據(jù)亞洲人群腰圍切點修正標(biāo)準(zhǔn)診斷MS。2去除家系組中的二級親、配偶組中有DM家族史和患有T2DM者，將剩余成員分為T2DM組、一級親屬FDR組和對照組三組。比較三組人體測量學(xué)參數(shù)、血壓、血糖、血脂、胰島素、HSCRP、NEFA等指標(biāo)的差別；比較三組MS及主要成分的患病率。3采用SAGE軟件，計算各項代謝指標(biāo)在T2DM家系的遺傳度。結(jié)果在校正年齡因素后，F(xiàn)DR組腰圍WAIST和腰臀比WHR顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義P005。FDR組糖調(diào)節(jié)受損IGR、肥胖、腹型肥胖、高血壓、高TG血癥、低HDLC血癥、MSIDF標(biāo)準(zhǔn)和MSNCEPATPⅢ標(biāo)準(zhǔn)的患病率分別為449％、333％、341％、211％、282％、301％、208％和192％。在校正年齡、性別影響后，F(xiàn)DR組患IGR的風(fēng)險是對照組的132倍95％CI591～2946，肥胖、腹型肥胖和低HDLC血癥的風(fēng)險分別是對照組的213倍95％CI123～368、192倍95％CI114～321和173倍95％CI101～298，MS患病風(fēng)險是對照組的257倍IDF標(biāo)準(zhǔn)，95％CI114～321或235倍NCEPATPⅢ標(biāo)準(zhǔn)，95％CI117～471。T2DM患者各種代謝紊亂的發(fā)生更為明顯。肥胖、腹型肥胖、高血壓風(fēng)險是對照組的381倍95％CI222～656、391倍95％CI234～651和382倍95％CI217～674，MS風(fēng)險是對照組的796倍IDF標(biāo)準(zhǔn)，95％CI403～1574或1213倍NCEPATPⅢ標(biāo)準(zhǔn)，95％CI614～2396，高TG血癥和低HDLC血癥的患病風(fēng)險分別是251倍95％CI153～411和231倍95％CI138～389。遺傳度分析顯示空腹血糖、空腹胰島素和HOMAΒ的遺傳度最高，分別為071、068和068；HOMAΒ的遺傳度068高于HOMAIR054；BMI、腰圍和HSCRP的遺傳度045左右；血脂譜中TC、HDLC遺傳度較高，分別為051和055，TG稍低，為032；所有指標(biāo)中，SBP和DBP的遺傳度最低，分別為025和028。結(jié)論T2DM及相關(guān)的代謝代謝疾病如肥胖、高血壓、脂代謝紊亂等有明顯的家族聚集性。T2DM家系中非DM一級親屬已表現(xiàn)出程度不同的代謝紊亂。各種代謝指標(biāo)在T2DM家系中具有中等程度的遺傳度，提示相關(guān)代謝指標(biāo)受遺傳因素和環(huán)境因素的共同作用。第二部分PGC1Β基因單核普酸多態(tài)性與2型糖尿病及相關(guān)代謝疾病的關(guān)聯(lián)分析目的研究過氧化物酶體增殖活化受體Γ共活化因子1ΒPGC1Β基因單核苷酸多態(tài)性SNPS與T2DM和相關(guān)代謝疾病的關(guān)聯(lián)。方法1選擇無親緣關(guān)系的18例正常人，39例T2DM患者。PCR擴增PGC1Β基因12個外顯子及側(cè)翼序列和啟動子上游16KB，經(jīng)變性高效液相色譜DHPLC結(jié)合測序技術(shù)篩查SNPS位點，估計變異位點之間的連鎖不平衡LD。2選擇重慶地區(qū)474例T2DM患者，313例對照，對篩查到的編碼區(qū)SNPS行病例一對照分析。結(jié)果在PGC1Β基因共發(fā)現(xiàn)9個SNPS，5個位于編碼區(qū)，其中4個為錯義突變ALA203PRO、ARG265GLN、VAL279ILE、ARG292SER、1個為同義突變LEU42LEU，啟動子區(qū)2個1263GA、985CT，其余2個位于內(nèi)含子區(qū)域IVS2132GA和IVS931GC。4個錯義突變呈強LD，位于同一單倍域內(nèi)，其中ALA203PRO和VAL279ILE完全相關(guān)。4個錯義突變相距僅268BP，采用直接測序技術(shù)進行基因型鑒定。對ALA203PRO、ARG265GLN和ARG292SER位點的病例一對照研究提示這3個SNPS均與T2DM無顯著關(guān)聯(lián)P005。病例一對照研究提示ARG265GLN與肥胖的發(fā)生有關(guān)，與GG基因型個體相比，GA或從基因型的個體對肥胖的易感性顯著增加ADDITIVE模式1436，95％CI1079～1921，P0013；DOMINANT模式1424，95％CI1029～1970，P0033；RECESSIVE模式2648，95％CI1008～6961，P0048。ARG265GLN與肥胖的關(guān)聯(lián)受性別影響。在男性，與GG型比較，GAAA型的BMI、腰圍、腰臀比和DBP均顯著增加P005。4個錯義突變共構(gòu)成3種常見單倍型，占所有單倍型的953％。3種單倍型與T2DM均無顯著關(guān)聯(lián)P005。肥胖者H3單倍型的頻率高于對照組166％VS128％，P0039。結(jié)論PGC1Β基因SNPS與中國重慶地區(qū)T2DM無明顯關(guān)聯(lián)。但ARG265GLN及一個常見單倍型可能與肥胖的發(fā)生有關(guān)，具有A等位基因的265GLN可能作為危險因子參與肥胖發(fā)生的病理過程。ARG265GLN與肥胖的關(guān)聯(lián)在男性更明顯。第三部分PGCLAPGCIP和PPARY基因交互作用與2型糖尿病及相關(guān)代謝疾病的關(guān)系目的研究過氧化物酶體增殖活化受體Β共活化因子1ΑPGC1Α和過氧化物酶體增殖活化受體ΓPPAR?；騍NPS與T2DM和肥胖的關(guān)系。并研究PGC1Α、PGC1Β和PPARΓ三個基因SNPS交互作用對T2DM和肥胖的影響。方法RFLP技術(shù)鑒定基因型。分析PGC1Α基因GLY482SER和THR394THR位點、PPAR?；騊RO12ALA和C161T位點與T2DM和肥胖的關(guān)聯(lián)。采用多因素維度降低法MDR法和LOGISTIC回歸，研究PPARΓ、PGC1Α和PGC1Β基因多個位點之間的交互作用對T2DM和相關(guān)疾病的影響。結(jié)果PPAR?；騊RO12ALA和C161T位點，PGC1Α基因GLY482SER和THR394THR位點均與T2DM無顯著相關(guān)。除DOMINANT模式下PGC1ΑTHR394THR與肥胖關(guān)聯(lián)0697，95％CI0497～0977，P0036，其余三個SNPS與肥胖均無顯著關(guān)聯(lián)。PPARΓ基因C161T位點可能和LR的發(fā)生有關(guān)，CTTT基因型與CC基因型比較，空腹胰島素和HOMAIR顯著增加分別為1113±536MULVS983±550MUL，P0030和247±123VS218±130，P0033。本組人群中，PPARΓ、PGC1Α和PGC1Β3個基因交互作用與T2DM的發(fā)病無關(guān)。通過MDR法，在3個基因5個位點中建立了與肥胖關(guān)聯(lián)的2位點交互模型，PGC1Α基因GLY482SER和PGC1Β基因ARG265GLN對肥胖的發(fā)生有交互作用。該模型的交叉確認(rèn)一致性最高1010，檢驗正確率為05432P00010?；蛐徒M合高危組較低危組發(fā)生肥胖的風(fēng)險增加，為1603495％CI05493～46804，X77275，P00054，經(jīng)LOGISTIC回歸驗證的結(jié)果與MDR法一致。結(jié)論PPAR?；騊RO12ALA和C161T位點，PGC1Α基因GLY482SER和THR394THR位點與重慶地區(qū)T2DM不相關(guān)，但PPARΓC161T位點可能參與IR的發(fā)生，PGC1ΑTHR394THR位點可能與肥胖有關(guān)。MDR法建立了與肥胖關(guān)聯(lián)的2位點交互模式，PGC1Α基因GLY482SER和PGC1Α基因ARG265GLN對肥胖的發(fā)生有交互作用。MDR法可作為研究多基因交互關(guān)系的有力工具。

簡介：分類號R3943密級⑧厶單位代碼10422學(xué)號201013069菇辦孑碩士學(xué)位論文論文題目兩個神經(jīng)系統(tǒng)遺傳病家系致病基因的分子遺傳學(xué)研究TITLEIDENTIFICATIONOFTHECAUSATIVEMUTATIONFORTWOFAMILIESWITHHEREDITARYNEUROMUSCULARRAREDISEASES作者姓名學(xué)院名稱專業(yè)學(xué)位名稱指導(dǎo)教師合作導(dǎo)師馮亞佩醫(yī)學(xué)院遺傳學(xué)劉奇跡教授2013年5月15日論文目錄中文摘要1英文摘要6符號說明12第一部分一個X連鎖腓骨肌萎縮癥家系致病基因的突變分析14材料和方法16結(jié)果22討論29小結(jié)32第二部分一常染色體顯性遺傳性痙攣性截癱家系致病基因的鑒定33材料和方法35結(jié)果52討侖63小結(jié)66參考文獻67致謝73攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄74

簡介：第一部分研究目的研究原發(fā)性骨髓增生異常綜合征MDS患者染色體核型特征。研究方法對染色體核型可供分析的351例成人原發(fā)MDS患者進行回顧性分析。結(jié)果染色體核型異常者237例675％。其中僅有染色體數(shù)目異常者99例417％，僅有染色體結(jié)構(gòu)異常者70例295％，同時有數(shù)目與結(jié)構(gòu)異常者68例288％；單一異常130例548％，2種異常54例228％，復(fù)雜異常3種53例224％。整倍體數(shù)目改變有多倍體4例17％；非整倍體及染色體臂的異?？梢娪谒腥旧w，常見的依次有8、2020Q、77Q、55Q、18、1111Q、21、Y、21、10、16、22、9、DEL12P12。55Q51％的發(fā)生率低于西方國家87％234％，5Q綜合征的發(fā)生率極低03％，8191％和2020Q94％發(fā)生率高于西方國家分別為12％70％和20％35％。237例染色體核型異常的患者中染色體易位有31例131％，其中12種染色體易位在MDS中迄今尚無文獻報道。I17Q10有9例38％，其中6例667％為單一異常。染色體重復(fù)有7例30％，主要累及1號染色體4例。按IPSS染色體核型分組，預(yù)后差的染色體核型檢出率在RA、RARS、5Q綜合征組，RCMD、RCMDRS組，RAEBⅠ組，RAEBⅡ組依次升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義X22854，P005。累及7號染色體異常的24例患者MS為1095％CI4～16個月，較其他核型異常的患者MS分別為5195％CI30～72個月明顯縮短P0001。按WPSS評分，極低危組、低危組、中危組、高危組和極高危組的2年P(guān)S率分別為100％、96％、81％、38％和14％，5年P(guān)S率分別為100％、83％、54％、20％和0，LOGRANK檢驗各組總體生存OS率差異有統(tǒng)計學(xué)意義P0001。結(jié)論染色體核型分析是MDS患者預(yù)后分層實現(xiàn)個體化治療的重要依據(jù)。與WHO分型相適應(yīng)的WPSS適合用于判斷我國MDS患者的預(yù)后。

簡介：山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文先天性肌營養(yǎng)不良的臨床、分子病理與分子遺傳學(xué)研究姓名羅靜申請學(xué)位級別碩士專業(yè)兒科學(xué)指導(dǎo)教師郝青英熊暉20080320山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文MRI示腦白質(zhì)信號異常。6例患者肌肉活檢病理診斷符合肌營養(yǎng)不良。采用特異抗體行活檢肌肉免疫組織化學(xué)染色，顯示均為MEROSIN染色陰性，ADG、J3DG、DYSC呈陽性表達。另外6例患兒缺少病理資料，但臨床表現(xiàn)與輔助檢查結(jié)果與以上6例患兒完全相似。2、3例肌眼腦病患兒中有2例進行了肌肉活檢，臨床均表現(xiàn)為生后～1個月內(nèi)發(fā)病，智力落后、運動發(fā)育里程碑延遲以及肌營養(yǎng)不良表現(xiàn)肌力、肌張力低下、關(guān)節(jié)攣縮、腱反射消失。輔助檢查均表現(xiàn)為血清CK水平顯著增高，EMG呈肌源性損害。特征性表現(xiàn)均存在眼部異常及腦畸形，包括注視差、對光反應(yīng)遲鈍、視神經(jīng)萎縮，以及頭顱MRI顯示小腦多發(fā)小囊灶、腦干發(fā)育不良。2例患兒肌肉活檢病理診斷符合肌營養(yǎng)不良，采用特異抗體進行活檢肌肉免疫組織化學(xué)染色，顯示均為抗ⅡDG糖鏈抗體IIH6染色陰性，3DG、MEROSIN、DYSC呈陽性表達，提示存在ADG糖基化缺陷，支持了抗肌萎縮相關(guān)糖蛋白病的診斷。另外1例患兒缺少病理資料，但臨床表現(xiàn)與輔助檢查結(jié)果與以上2例患兒完全相似。3例患兒均進行了肌眼腦病致病基因POMGNTL、FKRP、FCMD、POMT2突變分析，基因篩查發(fā)現(xiàn)了31個單核苷酸多態(tài)SINGLENUCLEOTIDEPOLYMORPHISMS，SNPS及5個同義突變SAMESENSEMUTATION，4個基因均未發(fā)現(xiàn)編碼區(qū)的致病突變。結(jié)論我們在國內(nèi)首次從臨床及分子病理水平確診了6例MDCLA和2例抗肌萎縮相關(guān)糖蛋白病患兒；初步明確了我國MDCIA患兒的臨床特點；在國內(nèi)首次建立了部分先天性肌營養(yǎng)不良的臨床、分子病理及分子遺傳學(xué)診斷方法。關(guān)鍵詞先天性肌營養(yǎng)不良，層粘連蛋白，A抗肌萎縮相關(guān)糖蛋白，免疫組織化學(xué)，基因突變

簡介：分類號UDC博士學(xué)位論文密級非綜合征型先天性缺牙一家系與外胚層發(fā)育不良八家系的遺傳學(xué)分析GENETICALRESEARCHOFAFAMILYWITHNONSYNDROMICCONGENITALTOOTHAGENESISANDEIGHTFAMILIESWITHECTODERMALDYSPLASIASYNDROME作者姓名學(xué)科專業(yè)學(xué)院系、所指導(dǎo)教師副指導(dǎo)教師薛晉杰遺傳學(xué)中國醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)國家重點實驗室鄔玲仟教授梁德生教授、∥一?一一員堿中南大學(xué)2012年03月原創(chuàng)性聲明水人聲明，所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)帥指導(dǎo)下進行的研究．【作及耿得的研究成果。盡我所知，除了論文R}1特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含≥E他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中南大學(xué)或其他單位的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我共同作的刷志對本研究所作的貢獻均已在論文1葉}了明確的|兌明。作者簽名窿塑臣建L{J％_2￡睦一年蚯JJ亞同學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書小人R解巾南大學(xué)柯哭1；I{留、使JTJ學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文井根據(jù)幽家或湖南省有火部門規(guī)定送交學(xué)位論義，允許學(xué)位論文被查閱和借閱；學(xué)校可以公布學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，I、J以采用復(fù)印、縮印或1L它手段保存學(xué)位論文。同時授權(quán)中凼科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到州國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾提供信息服務(wù)。作者簽私{L；L毛K導(dǎo)師棼私羔￡61H蝴絲年叢J{J幺IL

簡介：1研究背景細(xì)胞不斷經(jīng)受內(nèi)源性和外源性的各種應(yīng)激和損傷，體外培養(yǎng)的人成纖維細(xì)胞具有一定的增殖能力，經(jīng)過一系列傳代之后，逐漸變得衰老，即細(xì)胞復(fù)制性衰老。氧化應(yīng)激可以導(dǎo)致DNA損傷或干擾異染色質(zhì)，因而誘導(dǎo)早期傳代的細(xì)胞過早衰老，即應(yīng)激誘導(dǎo)的細(xì)胞早衰。過氧化氫可短期內(nèi)作用于細(xì)胞獲得氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的早衰。細(xì)胞復(fù)制性衰老與應(yīng)激誘導(dǎo)的早衰具有相似的衰老表型，如細(xì)胞變大扁平，伴隨有核和核仁的體積增大，失去細(xì)胞與細(xì)胞間接觸，衰老相關(guān)Β半乳糖苷酶表達等等，而兩者具體的內(nèi)在調(diào)控機制可能存在差異。細(xì)胞衰老的機制可能是人類衰老及衰老相關(guān)性疾病的分子基礎(chǔ)。延緩衰老及治療衰老相關(guān)性疾病是人類最大的夢想之一，目前對于衰老機制的認(rèn)識仍很局限。近來研究表明，表觀遺傳學(xué)，也稱外遺傳學(xué)，是研究機體發(fā)育及細(xì)胞增殖過程中基因表達調(diào)控的改變，這些改變可受環(huán)境因素的影響，其修飾的改變可能是細(xì)胞衰老一個決定性因素。表觀遺傳學(xué)修飾包括DNA甲基化和組蛋白的轉(zhuǎn)錄后修飾，即組蛋白甲基化、乙?；土姿峄揎?，ATP依賴的染色質(zhì)結(jié)構(gòu)重塑。然而，在表觀遺傳學(xué)和細(xì)胞及器官衰老方面的研究資料尚較匱乏，這可能跟衰老本身的復(fù)雜性有關(guān)。目前有限的資料表明，DNA甲基化可能修飾一些衰老相關(guān)調(diào)控基因，隨著年齡增加，這種修飾作用減弱或增強，確定這些改變是隨機的或“程序性”的，及是否受環(huán)境氧化應(yīng)激的影響十分重要。組蛋白H3和H4N末端共價修飾可促進染色質(zhì)重建，組蛋白修飾及其不同組合參與基因轉(zhuǎn)錄的活化或沉默。衰老是內(nèi)、外因素共同作用的結(jié)果，是一種多基因的復(fù)合調(diào)控過程，但衰老的始動因素及其發(fā)生、發(fā)展機制仍有待探究。表觀遺傳學(xué)修飾可能提供了細(xì)胞衰老所需的表觀微環(huán)境，如果能通過此途徑揭示衰老的分子機制，且找到延緩衰老進程的方法，將具有重大的生物學(xué)意義和臨床應(yīng)用前景。本研究應(yīng)用體外培養(yǎng)的人胚肺二倍體成纖維細(xì)胞為研究對象，檢測正常細(xì)胞復(fù)制性衰老及過氧化氫誘導(dǎo)的細(xì)胞早衰過程中表觀遺傳學(xué)調(diào)控的作用，包括全基因組DNA甲基化、整體的組蛋白乙?；凹谆兓?；表觀遺傳學(xué)相關(guān)酶的表達變化及其活性改變；衰老相關(guān)基因MRNA水平表達變化及其轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)域DNA甲基化改變和組蛋白修飾狀況；并尋找正常年輕細(xì)胞及復(fù)制性衰老細(xì)胞基因組轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)域未知的差異甲基化基因，為細(xì)胞衰老過程中表觀遺傳學(xué)調(diào)控作用提供理論依據(jù)。2材料與方法21建立細(xì)胞復(fù)制性衰老及過氧化氫誘導(dǎo)的細(xì)胞早衰模型建立體外培養(yǎng)的正常人胚肺成纖維細(xì)胞復(fù)制性衰老模型及400ΜM過氧化氫誘導(dǎo)的細(xì)胞早衰模型，觀察在細(xì)胞正常復(fù)制性衰老及早衰過程中，細(xì)胞的一般生物學(xué)特性改變，包括細(xì)胞形態(tài)，生長曲線，壽命周期，細(xì)胞周期分布及衰老相關(guān)Β半乳糖苷酶表達的變化。22檢測基因組DNA甲基化調(diào)控以5甲基胞嘧啶抗體免疫熒光方法及3H甲基摻入法檢測人胚肺成纖維細(xì)胞基因組DNA整體甲基化變化趨勢；基于ELISA樣反應(yīng)方法檢測甲基轉(zhuǎn)移酶總的活性改變；并以QPCR和WESTERNBLOT方法檢測甲基轉(zhuǎn)移酶和甲基化結(jié)合蛋白MRNA和蛋白水平的表達變化，同時觀察了5氮雜胞苷對各甲基轉(zhuǎn)移酶和甲基化結(jié)合蛋白表達的影響。23組蛋白整體乙酰化與甲基化調(diào)控以相應(yīng)抗體的細(xì)胞免疫熒光方法觀察組蛋白H3，H4整體乙?；厔菁敖M蛋白H4LYS20整體甲基化趨勢的改變；基于ELISA樣反應(yīng)方法檢測組蛋白總體去乙?；傅幕钚宰兓?；并以QPCR方法檢測乙?；傅腗RNA表達，以QPCR方法和WESTERNBLOT方法檢測去乙酰化酶的MRNA和蛋白水平的表達，同時觀察曲古霉素A對乙?；负腿ヒ阴；副磉_的影響。24檢測衰老相關(guān)基因的表達及其啟動子區(qū)甲基化狀況以QPCR方法檢測P53，PI6，IGF2，P66，F(xiàn)OXA2的MRNA表達水平；在亞硫酸氫鹽修飾基因組DNA的基礎(chǔ)上，以甲基化特異性PCR檢測上述基因啟動子區(qū)域的甲基化狀況；同時對年輕細(xì)胞，復(fù)制性衰老細(xì)胞及早衰細(xì)胞組的P66，F(xiàn)OXA2啟動子區(qū)域的CPG島進行克隆測序，全面觀察其CPG島甲基化修飾狀況。25衰老相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)域的組蛋白乙?；凹谆揎椧匀旧|(zhì)免疫沉淀結(jié)合定量PCR的方法檢測年輕細(xì)胞，中年細(xì)胞，復(fù)制性衰老細(xì)胞及早衰細(xì)胞組P53，P16，IGF2，P66，F(xiàn)OXA2基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)域的組蛋白修飾情況，包括組蛋白H3，H4乙?；揎椉敖M蛋白H3LYS4，H4LYS20的甲基化修飾狀況。26檢測年輕細(xì)胞及復(fù)制性衰老細(xì)胞轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)域CPG島差異表達基因以甲基化的DNA免疫沉淀結(jié)合基因芯片技術(shù)檢測年輕細(xì)胞及復(fù)制性衰老細(xì)胞啟動子及第一外顯子區(qū)域CPG島差異表達的基因，并進行兩組細(xì)胞差異的甲基化基因感興趣分類。3結(jié)果31細(xì)胞復(fù)制性衰老與細(xì)胞早衰具有相同的形態(tài)學(xué)特征和增殖能力體外培養(yǎng)的正常人胚肺成纖維細(xì)胞于52PDL進入不可逆的復(fù)制性衰老狀態(tài)，依據(jù)細(xì)胞的群體倍增水平PDL，分為22PDL年輕細(xì)胞組，35PDL中年細(xì)胞組和49PDL復(fù)制性衰老細(xì)胞組。同步培養(yǎng)的22PDL人胚肺成纖維細(xì)胞，以400ΜMH2O2連續(xù)染毒4次，每天1次，每次2H，染毒后繼續(xù)培養(yǎng)7天，細(xì)胞呈現(xiàn)不可逆的早衰狀態(tài)，分為早衰起始組和早衰持續(xù)組。復(fù)制性衰老及早衰細(xì)胞處于衰老狀態(tài)后均可維持存活1個月以上，細(xì)胞變大扁平，飽和度降低。復(fù)制性衰老模型中各組細(xì)胞群體倍增時間為22PDL48H，35PDL52H，49PDL96H。細(xì)胞早衰模型中，4次染毒期間，細(xì)胞均有不同程度的增殖，染毒4次后，細(xì)胞幾乎停止增殖，處于明顯的不可逆早衰狀態(tài)。復(fù)制性衰老的細(xì)胞壽命周期為110天，早衰的為50天。細(xì)胞周期分布中G1％分別為22PDL355％，35PDL726％和49PDL895％及早衰起始組616％，早衰持續(xù)組772％細(xì)胞增殖指數(shù)隨增齡呈現(xiàn)降低的變化趨勢。衰老相關(guān)Β半乳糖苷酶染色陽性細(xì)胞率分別為22PDL51％，35PDL157％和49PDL907％及衰老起始組438％，衰老持續(xù)組913％。32衰老的細(xì)胞呈現(xiàn)較低的基因組DNA甲基化水平，復(fù)制性衰老與早衰甲基化調(diào)控存在差異甲基化免疫熒光實驗結(jié)果顯示，細(xì)胞復(fù)制性衰老過程中，基因組DNA甲基化水平逐漸降低；染毒組細(xì)胞早衰過程中，基因組DNA甲基化水平也逐漸降低；【3H甲基摻入實驗得到一致的結(jié)果，甲基化的CPG％分別為22PDL682％，35PDL419％和49PDL161％及早衰起始組635％，早衰持續(xù)組180％。復(fù)制性衰老及早衰的細(xì)胞都呈現(xiàn)出明顯的低甲基化水平。33衰老的細(xì)胞呈現(xiàn)整體組蛋白H3，H4低乙?；癏4K20高甲基化水平，復(fù)制性衰老與早衰組蛋白修飾調(diào)控存在差異細(xì)胞免疫熒光結(jié)果顯示，細(xì)胞衰老過程中，與年輕細(xì)胞相比，組蛋白H3，H4整體乙?；厔葜饾u降低，早衰起始組略低于中年細(xì)胞組，早衰持續(xù)組同復(fù)制性衰老細(xì)胞組；組蛋白H4LYS20整體甲基化趨勢，復(fù)制性衰老細(xì)胞組升高，早衰持續(xù)組同復(fù)制性衰老細(xì)胞組。34細(xì)胞衰老相關(guān)基因表達發(fā)生改變，與其啟動子區(qū)甲基化調(diào)控有不同程度關(guān)聯(lián)在細(xì)胞衰老過程中，與年輕細(xì)胞組MRNA表達水平相比，復(fù)制性衰老細(xì)胞組P53表達升高，中年細(xì)胞組顯著升高，而早衰持續(xù)組無明顯變化；中年細(xì)胞組P16表達降低，而復(fù)制性衰老細(xì)胞組明顯升高，早衰持續(xù)組也升高中年細(xì)胞組及復(fù)制性衰老細(xì)胞組IGF2表達升高，早衰持續(xù)組顯著升高；中年細(xì)胞組及復(fù)制性衰老細(xì)胞組P66表達升高，早衰持續(xù)組升高顯著復(fù)制性衰老細(xì)胞組及早衰持續(xù)組FOXA2表達均明顯降低。4結(jié)論41獲得人胚肺成纖維細(xì)胞體外復(fù)制性衰老模型及成功建立穩(wěn)定的過氧化氫誘導(dǎo)細(xì)胞早衰模型，細(xì)胞復(fù)制性衰老與細(xì)胞早衰具有相同的形態(tài)學(xué)特征和增殖能力。42基因組DNA低甲基化，整體組蛋白H3，H4低乙?；虷4K20高甲基化狀態(tài)是細(xì)胞衰老發(fā)生的表觀微環(huán)境，表觀遺傳學(xué)相關(guān)酶的表達與活性改變參與其形成與維持。43在細(xì)胞衰老過程中，特異基因表達發(fā)生變化，其轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)域特定的DNA甲基化和組蛋白修飾參與基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控。44細(xì)胞復(fù)制性衰老與細(xì)胞早衰的表觀遺傳學(xué)調(diào)控機制存在差異，氧化應(yīng)激可能通過表觀遺傳學(xué)修飾的變化作用于細(xì)胞早衰的發(fā)生。45獲得人胚肺成纖維細(xì)胞年輕階段及復(fù)制性衰老階段轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)域高甲基化的特異基因譜?；谏鲜鼋Y(jié)果，表觀遺傳學(xué)修飾是細(xì)胞衰老發(fā)生的重要調(diào)控機制，其作用的表觀微環(huán)境及對特異靶基因的特定修飾，是重要的表觀遺傳學(xué)改變，參與細(xì)胞衰老的發(fā)生，發(fā)展和持續(xù)，而細(xì)胞復(fù)制性衰老與細(xì)胞早衰其內(nèi)在的表觀遺傳學(xué)機制存在差異。

簡介：一、2個WOLFHIRSCHHN綜合征家系的遺傳學(xué)分析目的通過2個WOLFHIRSCHHN綜合征家系的遺傳學(xué)分析，探討家系成員中4P部分單體和4P部分三體的來源及基因型與表型的關(guān)系，為患者及其家庭提供準(zhǔn)確的診斷和遺傳咨詢。方法核型分析、熒光原位雜交（FLUESCENTINSITUHYBRIDISATION，F(xiàn)ISH）、SNPARRAY全基因組拷貝數(shù)分析。結(jié)果家系1中先癥者及其妹妹為WOLFHIRSCHHN綜合征患者，4P末端缺失片段大小為2，767，380BP（NT635082830888），先癥者母親為T（4；14）（P163；P12）平衡易位攜帶者；家系2中先癥者為WOLFHIRSCHHN綜合征患者，弟弟及叔叔為4P部分三體患者，缺失和重復(fù)片段大小為5，047，291BP（NT649835112274），先癥者父親及祖母為T（4；15）（P16；P112）平衡易位攜帶者。結(jié)論本研究綜合利用核型分析、FISH、SNPARRAY技術(shù)對2個WOLFHIRSCHHOM綜合征家系中平衡易位攜帶者及4P部分單體和4P部分三體患者明確了診斷，并對重復(fù)及缺失區(qū)間進行了精確定位，進一步確定了基因型和表型的關(guān)系距4P末端277MB～5MB的缺失區(qū)間可能跟WHS面部特征和宮內(nèi)發(fā)育遲緩相關(guān)；距4P末端277MB的范圍內(nèi)可能存在導(dǎo)致牙齒發(fā)育不良和耳前皮贅的相關(guān)基因。二、5例瞼裂狹小綜合征患者的遺傳學(xué)分析目的通過5例瞼裂狹小綜合征患者FOXL2基因的突變分析，探討其基因型與表型的關(guān)系，為患者及其家庭提供準(zhǔn)確的診斷和遺傳咨詢。方法應(yīng)用核型分析、熒光原位雜交（FISH）、SNPARRAY技術(shù)對1例瞼裂狹小綜合征伴智力障礙患者行遺傳學(xué)分析；應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）及DNA測序技術(shù)對4例單純瞼裂狹小綜合征患者行FOXL2基因突變分析。結(jié)果瞼裂狹小伴智力障礙患者3Q221Q23存在包含F(xiàn)OXL2基因在內(nèi)約94MB的雜合性缺失；病例2和3FOXL2基因存在C704DELG雜合突變，已報道該突變病例的臨床表型為Ⅰ型BPES，但病例3臨床表現(xiàn)為Ⅱ型BPES；病例4和5未檢測到突變。結(jié)論（1）3Q221Q23存在導(dǎo)致智力障礙的相關(guān)基因；（2）FOXL2基因C704DELG雜合突變（表達截短蛋白）可導(dǎo)致Ⅰ和Ⅱ型瞼裂狹小綜合征，因此，產(chǎn)生截短蛋白的突變基因型與Ⅰ型女性患者卵巢早衰的表型之間不存在對應(yīng)關(guān)系。

簡介：近二十余年來，輔助生育技術(shù)和分子生物學(xué)技術(shù)蓬勃發(fā)展，植入前遺傳學(xué)診斷PREIMPLANTATIONGEICDIAGNOSISPGD在二者有機結(jié)合的基礎(chǔ)上應(yīng)用而生。1990年，HYSIDEAH成功地完成了世界上第一例PGD，近年來PGD自身檢測技術(shù)的不斷完善，新的分子生物學(xué)技術(shù)不斷應(yīng)用，除了聚合酶鏈反應(yīng)POLYMERASECHAINREACTION，PCR及熒光原位雜交FLUESCENCEINSITU，F(xiàn)ISH兩種技術(shù)應(yīng)用于PGD，在此基礎(chǔ)上還衍生了一些新的技術(shù)。如核轉(zhuǎn)化誘導(dǎo)的染色體進行光譜核型分析SPECTRALKARYOTYPING，SKY或24色多色FISH技術(shù)MULTIFLUOCHROMEKARYOTYPING分析，單細(xì)胞全基因組擴增及比較基因組雜交技術(shù)COMPARATIVEGENOMICHYBRIDIZATIONCGH，引物原位標(biāo)記技術(shù)PRIMEDINSITULABELING，PRINS等，這些技術(shù)的出現(xiàn)為PGD的進一步發(fā)展拓展了更為廣闊的空間。PGD應(yīng)用范圍不斷擴大，除了可以進行性連鎖疾病、單基因遺傳性疾病、染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目的異常的檢測，還可用于人類腫瘤易感綜合征的易感性分析及一些遲發(fā)性疾病的基因預(yù)測，以及應(yīng)用PGD技術(shù)進行HLA配型。到2004年為止，全世界已進行了超過6000個臨床PGD周期，誕生了1000多個健康嬰兒。染色體易位是一種常見的遺傳缺陷，它是指兩條及兩條以上染色體的斷裂產(chǎn)生的染色體片段位置的改變。平衡易位是最常見的染色體結(jié)構(gòu)異常。據(jù)報道，群體中相互易位的發(fā)生率約為1500～11000，羅式易位的發(fā)生率約為1900～11000。而在不育及反復(fù)自然流產(chǎn)患者中，易位的發(fā)生率顯著增高達1％～10％。染色體易位的攜帶者一般都沒有遺傳物質(zhì)的丟失或者是丟失不多，因而表型正常，但可將不平衡的染色體傳給子代，導(dǎo)致流產(chǎn)、死胎、畸形兒或不孕不育等。部分男性攜帶者還可能因染色體斷裂區(qū)域涉及精子發(fā)生相關(guān)基因或調(diào)控基因而伴有生精障礙導(dǎo)致不育。因此染色體結(jié)構(gòu)異常伴隨的生育障礙對患者的身體及精神方面均帶來極大的危害。對于渴望生育健康正常后代的夫婦來說，以前所能借助的方法是在孕早期或孕中期行產(chǎn)前診斷取羊水細(xì)胞或絨毛對胎兒進行遺傳學(xué)診斷，和借助于B超診斷胎兒有無形態(tài)學(xué)異常，但往往面臨要選擇流產(chǎn)或引產(chǎn)的難題，植入前遺傳學(xué)診斷的出現(xiàn)，為這些患者提供了除產(chǎn)前診斷以外另一種選擇，能早期同時解決生育及遺傳診斷這兩大難題，實現(xiàn)他們生育正常后代的愿望。目前對染色體異?；颊哌M行PGD有兩種途徑，即對極體或卵裂球進行染色體分析，最常用的分析方法是熒光原位雜交。在用FISH技術(shù)診斷染色體易位時，主要有以下幾種方法1活檢處于分裂間期的卵裂球，采用兩種易位染色體的端粒探針和其中一條染色體斷裂點近端探針聯(lián)合的方法進行FISH對于羅氏易位攜帶者，采用易位的染色體的位點特異性探針。用卵裂球進行PGD存在的問題主要是難以區(qū)分正常和平衡的胚胎，不能真正實現(xiàn)優(yōu)生的目的，另外卵裂階段的胚胎嵌合體發(fā)生率很高，卵裂階段單個卵裂球的檢測并不能代表整個胚胎的狀態(tài)，可能造成漏診和誤診。2采用跨斷裂點探針篩選跨越或是臨近斷裂點的克隆，并標(biāo)記上不同的顏色，通過不同顏色信號的分離和重疊，可分辨各類染色體結(jié)構(gòu)異常，包括染色體平衡和非平衡易位、倒位、染色體內(nèi)部重組和微缺失等，但由于跨斷裂點探針制作周期較長，費用較高，該技術(shù)亦未能廣泛應(yīng)用于臨床。3間期核轉(zhuǎn)換，近年來有學(xué)者發(fā)展了從間期核獲得中期染色體的技術(shù)，VERLINSKY等進一步發(fā)展了該技術(shù)并將其應(yīng)用于PGD，用活檢獲得的卵裂球與去核的鼠合子融合，得到分裂期的染色體，用全染色體涂抹探針WHOLECHROMOSOMEPAINTINGPROBWCP結(jié)合著絲粒探針CENTROMEREENUMERATIONPROBE，CEP和端粒探針，可應(yīng)用于各種染色體易位的PGD，但這種方法較為復(fù)雜，需要特殊的儀器設(shè)備如電融合儀等、顯微操作技術(shù)和中期核固定技術(shù)，耗時、費力，有效性有限，難以臨床普遍開展。4近年來，也有學(xué)者嘗試將比較基因組雜交應(yīng)用于染色體易位的分析，該技術(shù)不需染色體培養(yǎng)，一次雜交實驗即可檢測出待測樣本整個基因組情況，彌補了FISH僅能檢測個別染色體或部分位點的不足，但CGH實驗過程繁瑣，對操作人員和圖像分析系統(tǒng)要求高，且整個過程需要時間較長，診斷后的胚胎需要冷凍，該技術(shù)普遍應(yīng)用于臨床尚需一段時間。5對于女方染色體易位攜帶者，還可以采用第一極體進行分析。由于第一極體的染色體在排卵后有限的時間內(nèi)處于分裂期，可用WCP探針通過FISH方法檢測第一極體的染色體結(jié)構(gòu)來推斷卵子染色體組成。應(yīng)用第一極體進行植入前診斷具有安全性高、避免倫理道德的沖突以及胚胎期高比例的嵌合型的影響等優(yōu)點，能夠區(qū)分正常和平衡易位胚胎，還能為研究卵子分離的規(guī)律提供信息。1998年MUNNé等首次應(yīng)用第一極體對女性染色體易位攜帶者進行PGD，獲得了成功妊娠。但由于極體活檢和固定的難度高，以及極體本身一些生物學(xué)特性的限制，應(yīng)用全染色體涂抹探針對第一極體進行FISH的研究不多，我國尚未見相關(guān)報道。本研究將針對染色體易位攜帶者引起的不育及反復(fù)自然流產(chǎn)等生育難題采用第一極體進行PGD研究，包括兩部分，第一部分建立應(yīng)用WCP進行第一極體染色體分析的方法，了解該方法對女性染色體易位攜帶者進行PGD的可行性并探討具體操作方法；第二部分用第一極體FISH方法對染色體易位攜帶者進行植入前遺傳學(xué)診斷，降低染色體易位患者的自然流產(chǎn)率，使其能夠生育表型和基因型均正常的健康后代。