褪黑素對約束應(yīng)激小鼠卵母細(xì)胞的保護(hù)作用.pdf

1、約束應(yīng)激會造成卵母細(xì)胞的氧化應(yīng)激，并進(jìn)一步導(dǎo)致卵母細(xì)胞的損傷，影響發(fā)育能力。褪黑素(melatonin，MT)是高效的抗氧化劑。在體外環(huán)境、老化、化學(xué)物質(zhì)等誘發(fā)的卵母細(xì)胞和胚胎氧化應(yīng)激中，適度的褪黑素處理可以有效清除活性氧族(reactive oxygen species，ROS)緩解氧化應(yīng)激，改善卵母細(xì)胞和胚胎發(fā)育能力。因此，我們推測針對母體的褪黑素處理，可以緩解約束應(yīng)激造成的卵母細(xì)胞損傷。本試驗(yàn)將以約束應(yīng)激小鼠為模型，探究母體注射褪

2、黑素對卵母細(xì)胞的保護(hù)作用。
　　試驗(yàn)對小鼠超排后的卵母細(xì)胞進(jìn)行收集統(tǒng)計(jì)，觀察約束應(yīng)激和褪黑素對小鼠超排效果的影響。結(jié)果顯示，與對照組相比，約束應(yīng)激處理48小時(shí)后小鼠排卵數(shù)顯著增加(P＜0.05)，而注射褪黑素后排卵數(shù)恢復(fù)至正常超排水平，表明約束應(yīng)激增強(qiáng)了小鼠的超排反應(yīng)，褪黑素能夠?qū)ζ溥M(jìn)行有效地緩解。
　　通過檢測卵母細(xì)胞活性氧水平、線粒體拷貝數(shù)、線粒體活性和膜電位，以此來評價(jià)褪黑素對約束應(yīng)激小鼠卵母細(xì)胞質(zhì)量的影響。結(jié)果顯示，

3、與對照組相比，約束應(yīng)激后卵母細(xì)胞內(nèi)ROS含量顯著上升(P＜0.05)，線粒體拷貝數(shù)顯著增加(P＜0.05)、線粒體活性顯著降低(P＜0.05)、膜電位異常升高(P＜0.05)，而褪黑素處理后線粒體活性顯著升高(P＜0.05)、膜電位顯著降低(P＜0.05)，但拷貝數(shù)變化不顯著(P＞0.05)。這些結(jié)果表明約束應(yīng)激造成小鼠卵母細(xì)胞氧化應(yīng)激，增加了線粒體的數(shù)量但同時(shí)對線粒體的功能造成損傷，影響了卵母細(xì)胞的質(zhì)量，而母體注射褪黑素可以提高約束應(yīng)

4、激小鼠卵母細(xì)胞的質(zhì)量。
　　利用卵母細(xì)胞體外受精技術(shù)并對獲得的囊胚進(jìn)行細(xì)胞數(shù)和凋亡染色，評價(jià)褪黑素對約束應(yīng)激小鼠卵母細(xì)胞體外發(fā)育能力的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)與對照組相比，約束應(yīng)激小鼠卵母細(xì)胞體外受精后受精率和卵裂率并未顯著降低（P＞0.05），但囊胚率和囊胚細(xì)胞數(shù)顯著下降(P＜0.05)，并且凋亡的囊胚比例顯著上升(P＜0.05)。注射褪黑素后可以顯著提高囊胚率和囊胚細(xì)胞數(shù)，并且顯著降低凋亡的囊胚比例（P＜0.05）。這些結(jié)果表明，約束應(yīng)