自噬在小鼠卵母細(xì)胞體外成熟中的作用研究.pdf

1、卵母細(xì)胞在成熟過程中通過基因組的修飾和不斷積累必要的母源因子為受精及隨后的胚胎發(fā)育做物質(zhì)準(zhǔn)備，在這一過程中卵母細(xì)胞需要大量的氨基酸、葡萄糖、核苷酸等基礎(chǔ)的能量和營養(yǎng)物質(zhì)。然而體外成熟的卵母細(xì)胞由于體外成熟體系不是很完善，有些對成熟及后續(xù)胚胎發(fā)育至關(guān)重要的物質(zhì)不足，進(jìn)而影響了卵母細(xì)胞的成熟質(zhì)量。而類似于氧化應(yīng)激、饑餓、卵丘細(xì)胞缺失或凋亡等各種不良因素的刺激，會使卵母細(xì)胞某些細(xì)胞器受損并產(chǎn)生大量對細(xì)胞有害的組分，從而使我們很難獲得高質(zhì)量的體

2、外成熟卵母細(xì)胞。而自體吞噬是一個將自身受損細(xì)胞器及大分子物質(zhì)通過溶酶體降解再利用的過程。其產(chǎn)生的分解產(chǎn)物進(jìn)入細(xì)胞的新陳代謝，產(chǎn)生新的蛋白質(zhì)和能量物質(zhì)，從而維持了細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)。有研究表明在豬卵母細(xì)胞的體外成熟過程中誘導(dǎo)自噬可提高其胚胎發(fā)育能力，但是其具體的作用機(jī)制尚不明確。所以我們以小鼠為模型，研究卵母細(xì)胞在體外成熟過程中自噬的變化規(guī)律，并選取不同的體外成熟培養(yǎng)體系研究自噬在卵母細(xì)胞體外成熟過程中的作用。我們的研究結(jié)果表明：
　　1、

3、通過檢測成熟不同時間的小鼠卵母細(xì)胞的自噬小體我們發(fā)現(xiàn)在卵母細(xì)胞的整個成熟過程中自體吞噬是一直存在的，且自噬小體的數(shù)量在小鼠卵母細(xì)胞的整個成熟過程中是先升高后下降的。
　　2、通過檢測不同的成熟條件下的小鼠卵母細(xì)胞的自噬小體，我們發(fā)現(xiàn)成熟條件越差的卵母細(xì)胞自噬小體數(shù)量越多。
　　3、通過誘導(dǎo)或抑制不同成熟條件下的卵母細(xì)胞的自噬我們發(fā)現(xiàn)在成熟條件較差的卵母細(xì)胞中調(diào)節(jié)自噬，卵母細(xì)胞的發(fā)育能力變化更明顯，而成熟條件相對較好的卵母細(xì)胞

4、發(fā)育能力反而無明顯變化。
　　4、在誘導(dǎo)或抑制卵母細(xì)胞自噬后，通過檢測卵母細(xì)胞中的活性氧和谷胱甘肽水平我們發(fā)現(xiàn)自噬可通過改善卵母細(xì)胞中的氧化應(yīng)激狀態(tài)而提高卵母細(xì)胞的成熟質(zhì)量。
　　5、在誘導(dǎo)或抑制卵母細(xì)胞自噬后，通過檢測卵丘細(xì)胞中的凋亡相關(guān)基因BCL-2和BAX我們發(fā)現(xiàn)自體吞噬可以通過抑制卵丘細(xì)胞的凋亡而提高卵母細(xì)胞的成熟質(zhì)量。
　　總之，卵母細(xì)胞的體外成熟過程中自噬是一直存在的，并且在營養(yǎng)成分相對不充足的條件下，自噬