熒光衍生試劑的設(shè)計制備及在反相高效液相色譜—質(zhì)譜分析中的應(yīng)用.pdf

1、反相高效液相色譜（RP—HPLC）因其強大的分離分析能力被廣泛應(yīng)用于許多研究和應(yīng)用領(lǐng)域如分析化學(xué)、生物化學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、藥物化學(xué)、食品衛(wèi)生和環(huán)境監(jiān)測等。其超強的分離能力使之成為諸多領(lǐng)域積極采納的分析手段之一，并成為分析化學(xué)中發(fā)展最快、應(yīng)用廣泛的研究領(lǐng)域之一。然而，對于反相液相色譜的并沒有合適的高靈敏的通用檢測器，研究人員一直采用化學(xué)衍生化來提高分析物檢測靈敏度，同時能夠改善分離。新型衍生化試劑的開發(fā)和新型衍生化試劑在高效液相色譜中的應(yīng)用研

2、究一直是色譜領(lǐng)域中最為活躍的研究方向之一。本論文重點研究了幾種新熒光衍生試劑的設(shè)計合成和表征，考察了試劑的光譜性質(zhì)，優(yōu)化了衍生反應(yīng)條件、色譜分離條件，建立相應(yīng)的反相高效液相色譜分析方法，并應(yīng)用于多種有意義的實際樣品的分析中。具體工作內(nèi)容如下： 第一章：簡述了高效液相色譜和高液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用研究進展。介紹了化學(xué)衍生化，熒光衍生化及其最新研究進展。最后概述了柱前衍生高效液相色譜分析的應(yīng)用進展，以及計算機輔助方法建立在柱前衍生高效液相

3、色譜方法建立中的意義和研究進展。 第二章：總結(jié)了熒光衍生試劑的設(shè)計思路，進行了熒光衍生試劑：10—乙基吖啶酮—2—磺酰氯（EASC）、10—乙基吖啶酮—2—磺酰肼（EASH）等吖啶酮磺酰氯類熒光衍生試劑的設(shè)計合成和表征、5—（2—羥乙基）苯并[b]吖啶酮（HEBA）等苯并吖啶酮類衍生試劑的設(shè)計合成和表征，熒光衍生試劑苯并香豆素—3—羧酸的設(shè)計合成。 第三章：熒光衍生試劑EASC用于雌激素的高效液相色譜—質(zhì)譜分析。通過對衍

4、生化條件、色譜分離條件、質(zhì)譜檢測條件的優(yōu)化，分別建立了柱前衍生高效液相色譜質(zhì)譜檢測的方法和柱前衍生高效液相色譜熒光檢測方法，并將兩種方法應(yīng)用于血漿、尿樣、藏羚羊糞便等實際樣品的測定，實現(xiàn)了這些樣品中激素雌二醇和雌三醇的高靈敏質(zhì)譜檢測和熒光檢測。該試劑的衍生產(chǎn)物物在紫外、熒光和質(zhì)譜的檢測靈敏度高于常用的試劑丹磺酰氯衍生產(chǎn)物的檢測靈敏度。 第四章：熒光衍生試劑EASC用于胺類化合物的高效液相色譜—質(zhì)譜分析。通過對衍生化條件和色譜分離

5、條件的優(yōu)化，建立了多種脂肪胺的柱前衍生反相高效液相色譜熒光檢測方法，并將該方法應(yīng)用于環(huán)境水樣中脂肪胺的測定，實現(xiàn)了環(huán)境樣品中脂肪胺的高靈敏檢測。探討了該試劑衍生物的質(zhì)譜增敏機理，并通過軟件計算對其質(zhì)譜增敏程度進行了預(yù)測估計。 第五章：熒光衍生試劑10—乙基吖啶酮—3—磺酰肼，通過對衍生反應(yīng)、色譜條件的優(yōu)化，建立了多種脂肪醛類化合物同時測定的柱前衍生高效液相色譜分離熒光檢測分析方法，并同時進行了柱后質(zhì)譜檢測分析，并將此方法成功應(yīng)用

6、于飲料酒中脂肪醛的檢測中。 第六章：設(shè)計開發(fā)了一種醛類化合物測定的新型衍生化反應(yīng)，通過對衍生反應(yīng)、色譜分離條件的優(yōu)化，建立了多種脂肪醛類化合物同時測定的柱前衍生高效液相色譜分離熒光檢測分析方法。 第七章：熒光衍生試劑5—（2—羥乙基）苯并[b]吖啶酮（HEBA），通過對衍生化條件和色譜分離條件的優(yōu)化，建立了20種脂肪酸的柱前衍生化高效液相色譜熒光檢測法，并將方法應(yīng)用于食品木耳中脂肪酸的測定，實現(xiàn)了木耳樣品中20種脂肪酸的