中醫(yī)學(xué)綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告

1、實(shí)驗(yàn)報(bào)告 實(shí)驗(yàn)報(bào)告乙酰苯肼制作小鼠血虛證模型及中藥療效觀察 乙酰苯肼制作小鼠血虛證模型及中藥療效觀察——小鼠造模、四診觀測及病理部分 小鼠造模、四診觀測及病理部分******** **血虛證是臨床常見的疾病證型之一。血虛證動物模型是探討該證的實(shí)質(zhì)、研究其病理機(jī)制和防治措施的中藥途徑。本實(shí)驗(yàn)選取了造模方簡便、結(jié)果可靠的乙酰苯肼制作血虛證模型，并用傳統(tǒng)血虛證治療方劑四物湯與當(dāng)歸補(bǔ)血湯進(jìn)行治療，分析、比較治療效果的異同。一、 材料及

2、方法（一） 實(shí)驗(yàn)材料1. 實(shí)驗(yàn)動物造模用清潔級雄性 ICR 小鼠 43 只，體重 26±3g。飼養(yǎng)于內(nèi)鋪墊料的塑料籠，每天自食普通顆粒飼料。2. 儀器及設(shè)備SQF-EA 體式顯微鏡；NIKONCoopix4500 數(shù)碼相機(jī)；自制光源設(shè)備；數(shù)字 WMY-01 型溫度計(jì)；MP200B 型電子天平；YLS-13A 大小鼠抓力測量儀；相機(jī)三腳架，劃有小方格的透明薄膜紙及改造的小鼠移動籠具等；一次性注射器等；眼科剪：直無勾10cm、彎無

3、勾 10cm 各 5 把；組織鑷：12.5cm 2 把；眼科剪：直尖 10cm4 把；解剖剪：cr/4，4 把；普通雙面刀片：10 片/盒×1 盒；染色架：5 個；染色缸：1000ml，14-15 個；切片盒：50 片/盒×3 盒或 100 片/盒×2 盒；玻璃漏斗：φ90 3個；玻璃攪棒 2 支；普通粗孔大張濾紙：20 張；Φ90mm 玻璃培養(yǎng)皿 4 個；中號普通毛筆 2 支；燒杯：500ml、1000m

4、l 各 1 個；量筒：100ml、500ml、1000ml 各 1個；組織切片機(jī)及配套刀片：2 臺；攤片用水浴鍋：2 臺；生物切片石蠟：5 盒，熔點(diǎn)：56-58℃； 37°、60°恒溫箱：各 1 個；磨砂載玻片：50 片/盒×3 盒；蓋玻片：100 片/盒×2 盒；廣口瓶：30ml 或 60ml×20 個；滴管及配套吸頭：4 個；酒精燈：150ml 4 臺；脫水籃：1-2 個；打火機(jī)、

5、標(biāo)簽紙、鉛筆各一，卷筒紙，乳膠手套、口罩足量。3. 藥物及試劑乙酰苯肼溶液（APH，CP，白色粉末狀固體，臨用時配制成 2%溶液） ；0.9%氯化鈉溶液 500ml*1 瓶；苦味酸（2.4.6-三硝基苯酚）：30g/瓶×1 瓶； 37%-40%福爾馬林液：500ml/瓶×1 瓶；無水乙醇：AR，500ml/瓶×1 瓶；二甲苯: AR，500ml/瓶×1 瓶；Hematoxylin 蘇木素（蘇木精

6、）： 10g/瓶×1 瓶；酸性品紅（曙紅丫水溶）： 25g/瓶×1 瓶；碘酸鈉：AR，500g/瓶×1 瓶；檸檬酸：AR，500g/瓶×10.95 陽虛重，＜0.9 陽損。陰盛衰度=各動物體重/正常組均值；辨證標(biāo)準(zhǔn)：與正常組比較，＞1.2 為形豐，＜0.85 為陰虛，＜0.7 為陰虧，＜0.6 為液脫。血盛衰度=各動物爪 r/正常組均值×0.6+各動物尾 r/正常組均值×0

7、.4；辨證標(biāo)準(zhǔn)：與正常組比較，＞1.1 為血充盈，＜0.9 為血虛，＜0.8 為血虛重，＜0.7 為血虧。（3）病理切片制作及讀片第 8 天處死小鼠，取脾臟和十二指腸固定，常規(guī)方法制作病理切片，主要負(fù)責(zé)脾臟和腸的讀片。病理組織切片的制作：a.固定液、染色液的配置；b.組織取材：取肝、脾、胃和十二指腸等臟器；c.固定與修塊；d.脫水和透明；e.浸蠟、包埋與修蠟塊；f.切片；g.脫蠟、染色與脫水；h.封片。 5. 統(tǒng)計(jì)方法計(jì)量四診指標(biāo)以平均

8、值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用 SPSS 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析（ANOVE） ，組間比較采用 LSD 法得出 P 值，檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn) p=0.05。二、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果（一） 動物死亡情況實(shí)驗(yàn)過程中，共死亡小鼠 21 只，正常組死亡 1 只，模型組死亡 7 只，當(dāng)歸補(bǔ)血湯組死亡 7 只，四物湯組死亡 6 只。（二） 動物全身狀態(tài)外觀1. 正常組。實(shí)驗(yàn)第 5 日，小鼠仍然較為活躍2. 模型組。實(shí)驗(yàn)第 5 日，小鼠出現(xiàn)少動、扎堆，欠活躍，