幾種血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷標(biāo)志物和碘離子的熒光檢測(cè).pdf

1、一些貴金屬納米粒子和貴金屬納米復(fù)合材料在可見(jiàn)光區(qū)具有特征吸收光譜，與能量供體的熒光發(fā)射光譜部分重疊，在基于熒光共振能量轉(zhuǎn)移的化學(xué)/生物傳感中獲得了廣泛的關(guān)注。本文制備了抗體包被的貴金屬納米復(fù)合材料和核殼型貴金屬納米粒子，對(duì)兩種血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷標(biāo)志物開(kāi)展了定量檢測(cè)，并完成了碘離子的高靈敏測(cè)量。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴開(kāi)發(fā)了一種高靈敏度定量檢測(cè)血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）的熒光方法。將TM抗體和牛血清白蛋白(BSA)結(jié)合在金納米顆粒(Au

2、 NPs)上制備了BSA-AuNPs-Ab納米復(fù)合材料，通過(guò)透射電子顯微鏡和紫外可見(jiàn)吸收光譜對(duì)其進(jìn)行表征。吖啶橙(AO)和制備的納米金復(fù)合材料之間的熒光共振能量轉(zhuǎn)移能導(dǎo)致AO的熒光發(fā)生淬滅。在TM的存在時(shí)，AO從納米金復(fù)合材料的表面有效分離而使熒光部分恢復(fù)。在濃度為0.1 pgmL-1-5ngmL-1的范圍內(nèi)，熒光強(qiáng)度增加值與TM濃度的對(duì)數(shù)呈線性關(guān)系，檢測(cè)下限為12 fg mL-1。利用該方法還考察了H2O2誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC

3、-C）受損后可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白(sTM)的釋放。研究發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)基中釋放的sTM含量隨著H2O2與細(xì)胞的接觸時(shí)間的延長(zhǎng)而增大。⑵合成了石墨烯量子點(diǎn)(GQDs)和金包銀核殼型納米粒子(Ag@Au NPs)并用透射電子顯微鏡對(duì)它們進(jìn)行了表征，將血管性血友病因子抗體(vWF Ab)修飾在Ag@Au NPs表面制備了納米復(fù)合物(Ag@Au-Ab NCs)。由于熒光共振能量轉(zhuǎn)移，GQDs的熒光可被Ag@Au-Ab NCs有效淬滅。vWF與Ag@Au

4、-Ab NCs表面抗體的免疫反應(yīng)使得GQDs與復(fù)合材料分離，導(dǎo)致GQDs熒光部分恢復(fù)。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在濃度0.1 pg mL-1到20 ng mL-1范圍內(nèi)，熒光強(qiáng)度變化值與vWF濃度的對(duì)數(shù)值呈良好的線性關(guān)系，檢測(cè)下限為30 fg mL-1?；谠摲椒ㄟ€調(diào)查了H2O2誘導(dǎo)HUVEC-C細(xì)胞受損后vWF的釋放情況。結(jié)果表明，細(xì)胞與H2O2的接觸時(shí)間越長(zhǎng)，細(xì)胞損傷程度越大，培養(yǎng)基中vWF的含量越高。⑶構(gòu)建了一種簡(jiǎn)單的熒光傳感器用于碘離子的定量檢

5、測(cè)。制備了石墨烯量子點(diǎn)(GQDs)和金包銅納米粒子(Cu@Au NPs)，兩者之間的熒光共振能量轉(zhuǎn)移導(dǎo)致前者的熒光發(fā)生猝滅。I-可與Cu@Au NPs反應(yīng)，破壞后者的結(jié)構(gòu)并釋放出粒徑更小的球形納米金顆粒。隨著加入I-濃度的增大，Cu@Au NPs溶液從紫色逐漸轉(zhuǎn)為紅色。在GQDs-Cu@Au NPs混合溶液中加入I-，GQDs的熒光進(jìn)一步淬滅。熒光強(qiáng)度降低程度與I-濃度在0.05μM-5μM范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。該方法成功用于水樣中I