燃煤細(xì)顆粒物不同組分對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞ea.hy926細(xì)胞增殖及氧化損傷研究

1、山東大學(xué)碩士學(xué)位論文燃煤細(xì)顆粒物不同組分對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞EA.hy926細(xì)胞增殖及氧化損傷研究姓名：劉芳盈申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：勞動(dòng)衛(wèi)生與環(huán)境衛(wèi)生學(xué)指導(dǎo)教師：李杰；王菲菲20110524山東人學(xué)碩十學(xué)位論文l ：2 傳代，用含1 0 0 ／6 0 胎牛血清、1 ％雙抗的D M E M 培養(yǎng)液，在3 7 * ( 2 、5 ％C 0 2 條件下傳代培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。2 ．燃煤P M 2 ．5 采集及組分提取選擇大同散煤為樣煤，利用固定源稀釋

2、通道采集燃煤P M 2 ．5 ，超聲提取燃煤P M 2 ．5 全顆粒物和無(wú)機(jī)組分，索氏提取有機(jī)組分，并配制成1 0 0 、2 5 0 、5 0 0 、1 0 0 0 、2 0 0 0 g g ／m L 染毒母液，- 2 0 ℃保存?zhèn)溆谩? ．細(xì)胞毒性檢測(cè)采用M T S 法檢測(cè)燃煤P M 2 ．5 不同組分對(duì)E A ．h y 9 2 6 細(xì)胞毒性影響。根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞E A ．h y 9 2 6 染毒2 4 h ，設(shè)置l

3、 O 、2 5 、5 0 、1 0 0 、2 0 0 9 9 ／m l五個(gè)劑量組，全顆粒物和無(wú)機(jī)組分以P B S 為溶劑對(duì)照，有機(jī)組分以D M S O 為溶劑對(duì)照，分別于染毒結(jié)束f i i i l 小時(shí)加入M T S ( 優(yōu)于M T T 的新型四唑化合物，檢測(cè)原理與M n ’相同) ，l 小時(shí)后用酶標(biāo)儀測(cè)吸光度值( o D ) 。4 ．氧化損傷檢測(cè)將大同燃煤P M 2 ．5 不同組分對(duì)E A ．h y 9 2 6 進(jìn)行染毒2 4 h ，

4、選擇氧化應(yīng)激指標(biāo)超氧化物歧化酶( S O D ) 、脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物丙二醛( M D A ) 、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶( G S H - P x ) 、過(guò)氧化氫酶( C A T ) 及炎性因子( N o ) 。按試劑盒要求用可見分光光度計(jì)測(cè)定細(xì)胞中氧化損傷指標(biāo)的含量。研究結(jié)果1 燃煤P M 2 ．5 排放因子測(cè)定1 ．1 燃煤P M 2 ．5 可溶性離子含量捧放分析大同散煤燃燒排放P M 2 ．5 可溶性離子含量測(cè)定：S 0 4 2 ‘含量最