細(xì)顆粒物致人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷及人參皂甙Rgl干預(yù)研究.pdf

1、研究目的：
　　 從氧化應(yīng)激角度探討細(xì)顆粒物(PM2.5)對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞生長的影響以及人參皂甙Rgl(Rgl)的干預(yù)效果。并從基因分子水平研究Nrf2-ARE抗氧化應(yīng)激通路中核因子E2相關(guān)因子2(Nrf2)和其下游蛋白血紅素氧合酶-1(HO-1)的變化規(guī)律。
　　 研究方法：
　　 以人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞為研究對象。篩選PM2.5合適的染毒濃度和人參皂甙Rg1的最適濃度。1、設(shè)空白對照組和PM2.5處理組(濃度分

2、別為0.1，0.2，0.4，0.8mg/ml)。2、再設(shè)空白對照組、0.8mg/mlPM2.5處理組、0.8mg/mlPM2.5+0.04mg/ml人參皂甙Rgl處理組和0.04mg/ml人參皂甙Rgl處理組。各組處理24h后用MTT法測定內(nèi)皮細(xì)胞生長變化，熒光探針標(biāo)記法測定內(nèi)皮細(xì)胞活性氧(ROS)水平，RT-PCR法測定HO-1、Nrf-2mRNA表達(dá)水平。統(tǒng)計學(xué)處理多組間比較采用單因素方差分析檢驗。
　　 研究結(jié)果：

3、　　 在一定的濃度范圍內(nèi)，隨著PM2.5染毒濃度加大，內(nèi)皮細(xì)胞生長受抑，ROS水平升高，HO-1表達(dá)增多，HO-1上游轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)元件Nrf2的表達(dá)無差異。PM2.5染毒濃度分別為0.1、0.2、0.4、0.8mg/ml時，細(xì)胞生長的光密度值（OD值）分別為0.67±0.10、0.63±0.11、0.59±0.06(P＜0.05)、0.48±0.07（P＜0.01）。ROS熒光灰度值分別為179±5、191±6、198±12、211±11

4、(均為P＜0.01)。HO-l平均光密度值分別為0.718±0.061、0.737±0.052、0.737±0.009、0.806±0.037(P＜0.01)。Nrf2平均光密度值分別為0.941±0.074、0.991±0.064、0.996±0.040、1.010±0.039（均為P＞0.05）。Rgl干預(yù)后與0.8mg/mlPM2.5組相比，細(xì)胞存活增多，ROS水平降低，HO-1表達(dá)增多，HO-1上游轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)元件Nrf2表達(dá)仍無差

5、異。細(xì)胞生長OD值為1.06±0.17（P＜0.01），ROS熒光灰度值為147±13（P＜0.01），HO-1平均光密度值為o.874±0.040（P＜0.05>，Nrf2平均光密度值為1.039±0.061（P＞0.05）。
　　 研究結(jié)論：
　　 1、PM2.5抑制內(nèi)皮細(xì)胞生長，氧化應(yīng)激是其損傷機(jī)制之一。2、人參皂甙Rgl能抑制PM2.5損傷內(nèi)皮細(xì)胞，抗氧化應(yīng)激是其保護(hù)機(jī)制之一。3、在Nrf2-ARE抗氧化通路中N