白血病免疫型

1、白血病的免疫分型,,一.急性白血病FAB分型：1976年提出,以形態(tài)為基礎(chǔ)。,ALL,AML,M0 微小分化型急性髓細(xì)胞白血病, 原始細(xì)胞>30%M1 急性髓細(xì)胞白血病未分化型, 原始細(xì)胞》90%M2 急性髓細(xì)胞白血病部分分化型，原始細(xì)胞30-89%M3 急性早幼粒細(xì)胞白血病，異常早幼粒細(xì)胞>30%M4 急性粒單核細(xì)胞白血病，原始細(xì)胞>30%，單核20-80%M5 急性單核細(xì)

2、胞白血病，原單+幼單>30% M5a 未分化型，原單細(xì)胞》80% M5b 部分分化型，原單細(xì)胞30%，有核紅細(xì)胞>50%M7 急性巨核細(xì)胞白血病，原巨核細(xì)胞>30%,L1 以小細(xì)胞為主，大小一致L2 以大細(xì)胞為主，大小不一L3 以大細(xì)胞為主，大小一致,二.急性白血病的MIC分型：1985-1986提出 MIC：Morphology Immunology Cytogenitics,80

3、年代免疫學(xué)研究的進(jìn)展，單克隆抗體的大量涌現(xiàn)，利用特異的單抗可以明確區(qū)分ALL、AML及進(jìn)一步鑒定亞型，對研究白血病的生物學(xué)特性，指導(dǎo)臨床治療及判斷預(yù)后起著重要的作用,三.免疫分型的作用： 1.區(qū)分ALL、AML：形態(tài)、組化難以診斷的病例（不典型、 治療后） 2.將ALL分為B、T細(xì)胞及根據(jù)細(xì)胞發(fā)育階段分為幾種亞型 3.對M0、M6 、M7具有診斷意義： M0：形態(tài)似ALL

4、、組化（-）, 髓標(biāo)志+, T,B- M6：GlyA+，CD71+ M7：CD41+，CD61+（IIb/IIIa）,四.正常血細(xì)胞分化發(fā)育過程中免疫標(biāo)志變化特點(diǎn)及 白血病細(xì)胞免疫標(biāo)志特點(diǎn),常用各系血細(xì)胞CD抗原1.T系：CD1-CD8（CD6不用）2.B系：CD10，CD19-CD24，F(xiàn)MC73.髓系：CD11b,CD13-CD16，CD33，CD644.干祖：CD34，CD117

5、，CD38，HLA-DR,(一）. 正常B細(xì)胞標(biāo)志： CD19 CD22 TdT CD34 CD10 CD20 FMC7 CD23 I期 ： + + + + + II期： + + - - + -/+ III期： + +

6、 - - - + Ⅳ期： + + - - - + + +,泛B標(biāo)志：CD19，HLA-DR，cCD79a/CD22幼稚B標(biāo)志：CD34，TdT， CD10，成熟B標(biāo)志：CD23，F(xiàn)MC7,B-ALL的分型,亞型

7、 CD19 CD34 TdT CD10 CyIg SmIg急性早期B前體細(xì)胞白血病++ + + - -early B-precursor ALL急性前B細(xì)胞白血病+-/+ + + + - Pre B-ALL急性B細(xì)胞白血病 +- -

8、 - -/+ + B-ALL,,,意義：Common B-ALL 預(yù)后相對較好，CD34+B-ALL比CD34- 預(yù)后好，但CD34+患者伴Ph1+預(yù)后差。B-ALL預(yù)后相對 差，但隨化療方案改進(jìn)，預(yù)后有所改善。,CD7 CD2 CD5 CD34 CD1a CD3c/m CD4 CD8 I期 ： + + +

9、 + +/- II期： + + + - + +/- III期： + + + - + +/+ + + Ⅳ期： + + + - -

10、 +/+ +/- +/- 泛T：CD2，CD5，CD7， cCD3 幼稚T：CD34，TdT，CD1a, CD4/8， 成熟T：CD3，CD4，CD8,(二）.正常T細(xì)胞標(biāo)志：根據(jù)在胸腺內(nèi)發(fā)育階段分4期,T-ALL的分型,分型 CD7 CD2

11、 TdT CD3c/m急性早期T前體細(xì)胞白血病 + - + +early T precursor ALL急性T細(xì)胞白血病 + + - +T-ALL,,,,T-ALL特點(diǎn)： 1. 幼稚T細(xì)胞數(shù)量增多：CD34+，TdT+?

12、 2. 泛T標(biāo)志丟失 3. CD4/8雙+或CD4/CD8單陽,意義：兒童：ALL發(fā)病率占腫瘤的25%， B-ALL 預(yù)后比T-ALL相對好 成人：ALL 發(fā)病率20% T-ALL 預(yù)后比B-ALL 好。,(三).正常粒細(xì)胞標(biāo)志,全粒細(xì)胞標(biāo)志：CD13，CD33， cMPO幼稚粒細(xì)胞：CD34，CD

13、117，HLA-DR，成熟粒細(xì)胞：CD15，CD11b，CD10，CD64,cMPO CD13 CD34 CD117 HLA-DR CD33 CD11b CD15 CD64 CD10幼稚粒 + + + + + ++ - - - -成熟粒 + + - -

14、 - + + + + +,,(四).正常單核細(xì)胞標(biāo)志：,全單核細(xì)胞標(biāo)志：CD33，CD13，HLA-DR幼稚單核細(xì)胞標(biāo)志：CD34，CD117，成熟單核細(xì)胞標(biāo)志：CD14，CD64,HLA-DR CD33 CD13 CD34 CD117 CD14 CD64 幼稚單 + + +

15、 + + - - 成熟單 + + + - - + +,(五).成熟粒、單核細(xì)胞主要區(qū)別：成熟粒細(xì)胞：CD33+ HLA-DR- CD14- CD64+dim成熟單核細(xì)胞：CD33++ HLA-DR+ CD14+ CD64++,正常BM各系細(xì)

16、胞比率： 淋巴：20-30%：T：70%，B：20%，NK：10%； 單核：2-6%±；粒細(xì)胞：40-60%；有核紅：<50%,FCM的主要測定指標(biāo)：FSC，SSC，F(xiàn)L1，F(xiàn)L2，F(xiàn)L3（FL4） FSC：反應(yīng)細(xì)胞的大小。SSC：反應(yīng)細(xì)胞內(nèi)顆粒性。FCM設(shè)門法： FSC/SSC： 缺點(diǎn)： 不能將淋巴、單核及幼稚細(xì)胞區(qū)分開 CD45/SSC：CD4

17、5是WBC抗原，RBC、Plt為陰性。 CD45在成熟細(xì)胞表達(dá)強(qiáng)，幼稚細(xì)胞表達(dá)弱， 在淋巴、單核及粒細(xì)胞表達(dá)強(qiáng)度不同。 優(yōu)點(diǎn)：能將淋巴、單核及幼稚細(xì)胞區(qū)分開。 特異分析白血病細(xì)胞免疫表型,FCM標(biāo)記方法： 單標(biāo)：一種單抗/tube: FL

18、1,FSC,SSC(三參數(shù)） 雙標(biāo)：(兩種單抗/tube/)：FL1,FL1,FSC.SSC（四參數(shù)） 三/四標(biāo)：(三種單抗/tube)(四種單抗/tube)：FL1-FL3/4,FSC,SSC,Side scatter,CD45,CD7,CD117,CD34,CD5,CD19,HLA-DR,CD11b,CD117,Pre-B-ALL,,CD10-,CD34-,Side scatter,CD45,CD

19、20,CD117,CD34,CD19,CD34,HLA-DR,CD5,HLA-DR,CD10,CD117,CD33,CD33,CD38,CD23,CD23,Lamda,Forward Scatter,AML-M0:R3細(xì)胞表達(dá)—CD34,CD38,CD117,HLA-DR,CD33,AML-M1:R3細(xì)胞表達(dá)—CD117,CD7,CD34,CD33,HLA-DR,CD13,CD64,AML-M2:R3細(xì)胞表達(dá)—CD117,CD34,CD

20、19,HLA-DR,CD33,CD64,CD13,CD7,CD33,CD10,CD7,CD45,CD5,CD64,CD34,CD11b,CD117,Side scatter,CD64,CD11b,CD34,CD19,CD13,HLA-DR,Forward Scatter,CD14,Side Scatter,AML-M4:R3表達(dá)—CD117,CD34,CD33,HLA-DR,CD64,CD13;R414.35%,CD45,CD5,CD1

21、4,CD34,CD11b,CD117,Side scatter,CD64,CD11b,CD10,CD13,HLA-DR,Forward Scatter,CD14,Side Scatter,AML-M5:R3,R4表達(dá)—CD117,CD34,CD33,HLA-DR,CD11bCD64,CD13,CD14,CD19,CD33,CD10,CD7,CD7,CD64,CD45,CD64,CD34,CD5,CD19,CD11b,CD11b,GlyA

22、,GlyA,CD45,CD5,CD19,CD64,CD34,CD11b,CD64,CD11b,CD117,,診斷白血病主要標(biāo)志：B-ALL：CD34，HLA-DR，CD19，CD10+/-，cCD79aT-ALL： CD34，CD38, CD7,CD2+/-,CD5+/-,cCD3AML： CD34，CD117，CD33，CD13，cMPO M3：CD34 -，HLA-DR- M2