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1、,,禽白血病,2017年4月,禽白血病,禽白血?。ˋvian Ieukosis,AL)是一類由禽白血病病毒引起的家禽多種腫瘤性疾病的總稱。在自然條件下以淋巴白血病(LLV)最常見(jiàn),其他如成紅細(xì)胞白血病(AEV)/成髓細(xì)胞白血病(AMV)/髓細(xì)胞瘤/纖維瘤和纖維肉瘤/腎母細(xì)胞/血管瘤/骨石癥等出現(xiàn)頻率很低。(劉功振,2010)大多數(shù)腫瘤侵害造血系統(tǒng),少數(shù)侵害其他組織。由于禽白血病病毒與禽肉瘤病毒在理化特性、病毒形態(tài)以及致病性等方面具有
2、許多相同的特征,因此常常統(tǒng)稱為禽白血?。饬霾《?。,目錄,一 病原學(xué),病原 生物學(xué)特性 抗原性 培養(yǎng)特性 抵抗力,1.病原,ALV是反轉(zhuǎn)錄病毒科,禽C型反錄病毒屬的病毒,俗稱禽C型腫瘤病毒屬。ALV病毒粒子直徑80~120nm,由外部的囊膜和內(nèi)部電子致密的核心構(gòu)成,核心直徑45nm,病毒囊膜上有放射狀突起,直徑約為8nm。ALV的基因組是兩分子的單股、正鏈、線性RNA組成的二聚體,單體長(zhǎng)為7~11Kb.,(核心結(jié)構(gòu)由二倍體RNA和核衣
3、殼、反轉(zhuǎn)錄酶以及整合酶組成。),2.生物學(xué)特性,病毒RNA基因組的結(jié)構(gòu)基因順序從5’端到3’端為gag-pol-env,分別編碼群特異(gs)抗原、依賴RNA的DNA聚合酶(反轉(zhuǎn)錄酶及p32整合酶)和囊膜糖蛋白。 基因組的大小約為7.2Kb。gag基因編碼至少4種非糖基化蛋白質(zhì),其中包括主要gs抗原p27。env基因編碼兩種糖蛋白,其中包括決定亞群特異性的gp85和跨膜蛋白gp37。,3.抗原性,根據(jù)病毒包膜蛋白的抗原性差異、病
4、毒干擾實(shí)驗(yàn)、宿主范圍等生物學(xué)特性,將禽白血病肉瘤病毒群分成A-J共10個(gè)亞群,其中A, B, C, D, E和J亞群的宿主是雞(Darcel et al., 1973 )。 禽白血病病毒A, B, C和D亞群主要誘發(fā)雞淋巴細(xì)胞性白血病,J亞群主要誘發(fā)髓細(xì)胞性白血病。臨床上較常見(jiàn)A和J亞群病毒感染病例,而B(niǎo)亞群病毒感染引起的自然病例較少見(jiàn)。B亞群禽白血病由禽白血病病毒B亞群(ALV-B)引起,主要造成淋巴細(xì)胞性白血病和肉瘤。,4
5、.培養(yǎng)特性,肉瘤病毒可在CEF上生長(zhǎng),產(chǎn)生轉(zhuǎn)化細(xì)胞灶,常用于病毒的定量測(cè)定。包括LLV在內(nèi)的大多數(shù)禽白血病病毒可在敏感的CEF上復(fù)制,但不產(chǎn)生明顯的病理變化。 本群的肉瘤病毒, 接種11日齡雞胚絨毛尿囊膜,在8d后可產(chǎn)生痘斑;接種5~8日齡雞胚卵黃囊則可產(chǎn)生腫瘤;接種1日齡雛雞的翅蹼,也可產(chǎn)生腫瘤。,5.抵抗力,·白血病/肉瘤病毒對(duì)脂溶劑和去污劑敏感,對(duì)熱的抵抗力弱。·病毒材料需保存在-60℃以下,在-20
6、℃很快失活。·本群病毒的pH5~9穩(wěn)定。,二 流行病學(xué),易感動(dòng)物 傳播方式 感染方式,1.易感動(dòng)物,雞是本群所有病毒的自然宿主,所有品系肉用雞都易感,蛋用型雞較少發(fā)病。如Rous肉瘤病毒(RSV)宿主范圍廣,野雞、珠雞、鴨、鴿、鵪鶉、火雞和鷓鴣人工接種均可引起腫瘤。不同品種或品系的雞對(duì)病毒感染和腫瘤發(fā)生的抵抗力差異很大。,2.傳播方式,垂直傳播和水平傳播,(L. N. Payne & V. Nair,2012),3.
7、感染方式,無(wú)病毒血癥又無(wú)抗體(V-A-)無(wú)病毒血癥而有抗體(V-A+)有病毒血癥又有抗體(V+A+)有病毒血癥而無(wú)抗體(V+A-)先天感染的胚胎對(duì)病毒產(chǎn)生免疫耐受,出殼后成為V+A-雞,血液和組織含毒很高,到成年時(shí)母雞把病毒傳給子代有相當(dāng)高的比例。V+A-雞死于LL的比V-A+雞高出幾倍。,三 臨床癥狀及病理變化,淋巴細(xì)胞性白血病 成紅細(xì)胞性白血病 成髓細(xì)胞性白血病 骨髓細(xì)胞瘤病 ALV-J,1.淋巴細(xì)胞性白血?。↙L),LL
8、的潛伏期長(zhǎng),自然病例可見(jiàn)于14周齡后的任何時(shí)間,但通常以性成熟時(shí)發(fā)病率最高。LL無(wú)特異臨診癥狀,一旦出現(xiàn)臨診癥狀,通常病程發(fā)展很快??梢?jiàn)雞冠蒼白、皺縮,間或發(fā)紺,食欲不振、消瘦和衰弱。腹部增大,可觸摸到腫大的肝、法氏囊或/和腎。隱性感染可使蛋雞和種雞的產(chǎn)蛋性能受到嚴(yán)重影響。,病理變化,肝臟彌漫性腫大,表面形成大小不一的結(jié)節(jié)狀腫瘤,單個(gè)存在或密集分布;脾臟腫大,表面和切面有灰白色腫瘤,法氏囊腫大;此外,腎、肺和心有時(shí)也發(fā)生腫瘤。
9、,2.成紅細(xì)胞性白血病 (AEV),·此病比較少見(jiàn)。通常發(fā)生于6周齡以上的高產(chǎn)雞。·臨床上分為兩種病型:增生型和貧血型。·癥狀:兩者前期均為嗜睡、雞冠稍蒼白或發(fā)紺;后期下痢、消瘦、部分毛囊出血。,病雞羽毛囊常因血液凝固不良而出血,精神沉郁、 雞冠蒼白、 皺縮,,病理變化,增生型的特征性肉眼病變是肝、脾、腎呈彌漫性腫大,呈櫻桃紅色到暗紅色,有的剖面可見(jiàn)灰白色腫瘤結(jié)節(jié)。貧血型病雞的內(nèi)臟常萎縮,尤以脾最
10、明顯,骨髓色淡呈膠凍樣。,3.成髓細(xì)胞性白血?。ˋMV),此型很少自然發(fā)生。臨床表現(xiàn)為嗜睡,貧血,消瘦,毛囊出血,病程比AEV長(zhǎng)。病理變化:在肝臟偶然也見(jiàn)于其他內(nèi)臟發(fā)生灰色彌散性腫瘤結(jié)節(jié)以及關(guān)節(jié)病變。,4.骨髓細(xì)胞瘤病,此型自然病例極少見(jiàn)。全身癥狀與AMV相似。由于骨髓細(xì)胞的生長(zhǎng),頭部、胸部和跗骨異常突起。病理變化:骨髓細(xì)胞呈淡黃色、柔軟脆弱,脾臟切面呈干酪樣壞死,呈彌散或結(jié)節(jié)狀,且多兩側(cè)對(duì)稱。,脾臟表面有彌漫性或結(jié)節(jié)性腫瘤增生
11、,脾臟切面干酪樣壞死,5.ALV-J,ALV-J感染發(fā)病可發(fā)生在4周齡或更大日齡的肉雞。4-20周齡病雞在肝、脾、腎和胸骨可見(jiàn)病理變化。組織病理學(xué)變化特征是腫瘤由含酸性顆粒的未成熟的髓細(xì)胞組成。,四 診斷,病毒的分離鑒定 血清學(xué)檢測(cè)方法 分子生物學(xué)方法,ALV診斷主要根據(jù)流行病學(xué)和病理學(xué)檢查進(jìn)行判斷。LL需與馬立克氏?。∕D)進(jìn)行鑒別診斷。,1.病毒的分離鑒定,ALV檢測(cè)最常用的樣品為全血、血漿、血清、泄殖腔和陰道拭子及腫瘤。分離病
12、毒還可以采用以下材料:新鮮的蛋清、10日齡陽(yáng)性雞胚、羽髓及精液。 絕大多數(shù)ALV毒株接種細(xì)胞后均不能產(chǎn)生明顯的細(xì)胞病變,因此,檢測(cè)ALV主要根據(jù)以下方法: 一是檢測(cè)ALV主要基因gag, pol和env編碼的一種或多種特異性蛋白; 二是用PCR檢測(cè)特異性的前病毒DNA或用RT-PCR檢測(cè)病毒的RNA序列; 三是采用ELISA方法檢測(cè)p27抗原來(lái)確定病毒是否在細(xì)胞上增殖,也可以利用各亞群特異性的單克隆抗體,
13、使用間接免疫熒光的方法來(lái)檢測(cè)病毒。,J亞群的分離鑒定: 疑似患病雞的血清、血漿、血液、腫瘤組織、骨髓、脾臟、肝臟以及排泄物等都可以在處理后接種到成長(zhǎng)至70-80%的單層CEF或者DF-1細(xì)胞上,在進(jìn)行培養(yǎng)復(fù)制病毒9天以后,對(duì)接種病料的細(xì)胞上清進(jìn)行ELISA檢測(cè)ALV的群特異性抗原p27,若是結(jié)果呈現(xiàn)陽(yáng)性,即可初步判定雞體中存在ALV的感染。,2.血清學(xué)檢測(cè)方法,病毒中和實(shí)驗(yàn)(NT)瓊脂擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)免疫熒光檢測(cè)方法(IFA)酶聯(lián)
14、免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法,3.分子生物學(xué)檢測(cè)方法,直接PCR法RT-PCR法實(shí)時(shí)熒光定量PCR環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(LAMP),五 防制,,防制要點(diǎn),由于本病垂直傳播占主要位置,先天感染的免疫耐受雞是最重要的傳染源,所以疫苗免疫對(duì)防制的意義不大,目前也沒(méi)有可用的疫苗。減少種雞群的感染率和建立無(wú)白血病的種雞群是防制本病最有效的措施。目前通常的做法是通過(guò)檢測(cè)和淘汰帶毒母雞以減少感染。由于剛出雛的小雞對(duì)感染最敏感,故應(yīng)在每批之間對(duì)
15、孵化器、出雛器以及育雛室進(jìn)行徹底清掃消毒。,加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,提高環(huán)境控制水平 飼養(yǎng)、生產(chǎn)以及經(jīng)營(yíng)等場(chǎng)所必須符合《動(dòng)物防疫條件審核管理辦法》(農(nóng)業(yè)部15號(hào)令)的要求,并取得動(dòng)物防疫合格證。飼養(yǎng)場(chǎng)實(shí)行全進(jìn)全出飼養(yǎng)方式,控制人員出入,嚴(yán)格執(zhí)行清潔和消毒程序。加強(qiáng)消毒管理,做好基礎(chǔ)防疫工作 各飼養(yǎng)場(chǎng)、屠宰場(chǎng)(廠)、動(dòng)物防疫監(jiān)督站等要建立嚴(yán)格的衛(wèi)生(消毒)管理制度。加強(qiáng)監(jiān)測(cè)工作,接受防疫機(jī)構(gòu)監(jiān)督 養(yǎng)禽場(chǎng)應(yīng)做好死亡雞腫瘤發(fā)
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