對蝦白斑綜合癥病毒(WSSV)膜蛋白VP52B的鑒定和功能研究及極早期基因啟動子的篩選.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩75頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內容提供方，若內容存在侵權，請進行舉報或認領

文檔簡介

1、對蝦白斑綜合癥病毒（WSSV）是危害養(yǎng)殖對蝦的主要病原，致病能力強，傳播范圍廣，給世界對蝦養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的損失，至今依然沒有有效的防治方法。本文圍繞病毒膜蛋白開展研究，此外，還對病毒的極早期基因啟動子進行了初步的篩選鑒定。研究工作主要包括以下幾個方面： （1）本文對WSSV膜蛋白VP52B進行了鑒定和功能分析。該蛋白是病毒基因wsv256的編碼產物。在Ecoli BL—21菌株中表達了GST—VP52B，并制備了相應的抗血清。

2、GST pull—down分析發(fā)現VP52B能與另一個病毒膜蛋白VP26相互作用。之前的研究認為VP26是重要的連接蛋白，為了確定該蛋白與VP52B的結合位點，表達了不同長度的VP26突變體，并發(fā)現VP26和VP52B相互作用的位點位于VP26135～170Aa。 （2）通過超聲法將WSSV基因組隨機斷裂至400～900bp DNA片段，并插入PIZ△IE/V5—EGFP載體以構建文庫，轉染昆蟲細胞H15后，發(fā)現其中部分細胞有增

3、強型綠色熒光蛋白（EGFP）的表達，說明這部分細胞中的DNA片段可能具有極早期啟動子活性。這對于進一步篩選和鑒定WSSV極早期基因及開展極早期啟動子研究具有重要意義。 （3）從WSSV基因組中選擇了20多個有鋅指結構域或其他轉錄調控相關結構域的基因，克隆其上游400～500bp的啟動子序列，連接到檢測啟動子活性的載體中。轉染昆蟲細胞H15發(fā)現有兩個ORF（ORF249、ORF403）上游序列具有較強的啟動子活性。這兩個ORF序列

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網頁內容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容，請與我們聯系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論