荷斯坦奶牛熱休克蛋白70基因(HSP70)3’-側(cè)翼區(qū)遺傳變異與耐熱性的關(guān)系.pdf

1、本研究以魯西黃牛和荷斯坦奶牛為研究對象，研究與奶牛熱應激相關(guān)的HSP70基因3'-側(cè)翼區(qū)的單鏈核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphisms，SNPs)及其與產(chǎn)奶性狀這間的關(guān)系。
　　 1、設(shè)計一對引物，擴增HSP70基因3'-側(cè)翼區(qū)3274-3773bp處，采用PCR-SSCP技術(shù)分析所得到擴增片段的SNPs。用最小二乘法分析SNPs與泌乳性狀的關(guān)系。結(jié)果表明:
　　 (1)72頭魯西黃牛

2、和601頭荷斯坦奶牛的PCR產(chǎn)物經(jīng)SSCP檢測均發(fā)現(xiàn)三種基因型，分別為AA、AB和BB型。通過測序發(fā)現(xiàn)HSP70基因的3'-側(cè)翼區(qū)在3494位點發(fā)生1個新的突變，由T突變?yōu)镃，導致HSP70基因3'-側(cè)翼區(qū)產(chǎn)生多態(tài)性。魯西黃牛的AA、AB、BB基因型頻率分別為1.39％、48.61％、50％。荷斯坦奶牛的AA、AB、BB基因型頻率分別為72.71％、24.79％、2.5％。經(jīng)過x2適合性檢驗，荷斯坦牛在該位點的x2值為0.2895(p＞

3、0.05)，說明該群體在此位點的突變達到Hardy-Weinberg平衡。
　　 (2)研究表明，BB基因型的荷斯坦奶牛個體，乳脂率、乳蛋白章、305d產(chǎn)奶量相對于從基因型的個體都要高;紅細胞鉀含量和產(chǎn)奶量下降率比AA類型的個體要低，且達顯著水平(p＜0.05)。魯西黃牛B基因的基因頻率為74.31％，而荷斯坦奶牛B基因的基因頻率卻比較低，為14.89％。由于魯西黃牛的耐熱性顯著強于荷斯坦奶牛，且耐熱性最高的BB型奶牛產(chǎn)奶量下降

4、率顯著低于耐熱性差的AA型奶牛。因此等位基因B可作為選育抗熱應激奶牛的潛在的分子遺傳標記。
　　 2、設(shè)計一對引物，擴增HSP70基因3'-側(cè)翼區(qū)6244-6742bp處，采用PCR-SSCP技術(shù)分析所得到擴增片段的SNPs。用最小二乘法分析SNPs與泌乳性狀的關(guān)系。結(jié)果表明:
　　 (1)541頭荷斯坦奶牛的PCR產(chǎn)物經(jīng)SSCP檢測發(fā)現(xiàn)六種基因型，分別為AA、AB、BB、AC、BC和CC型。通過測序發(fā)現(xiàn)HSP70基因的

5、3'-側(cè)翼區(qū)的第6400bp、6600bp和6601bp處分別發(fā)生了G/C、C/T和G/A突變。經(jīng)過x2適合性檢驗，荷斯坦牛在該位點的x2值為14.59(p＜0.01)，說明Hardy-Weinberg平衡檢驗不處于平衡狀態(tài)。
　　 (2)分析表明，BB基因型的荷斯坦奶牛，305d產(chǎn)奶量相對于AB、BC、AA、AC和CC基因型的個體都要高，且與AA、CC和AC類型相比達到顯著水平(p＜0.05)，上述結(jié)果顯示在我們所研究的荷斯坦