異色瓢蟲HSP70基因的克隆及HSP70與熱脅迫耐受性的關(guān)系.pdf

1、本論文通過研究與異色瓢蟲熱脅迫耐受性密切相關(guān)的熱休克蛋白70(HSP70)，比較了不同發(fā)育時期、不同性別的異色瓢蟲之問熱脅迫耐受性的差異。主要結(jié)果如下： (1)首次成功克隆出異色瓢蟲HSP70基因的cDNA全長序列。該序列全長2200bp，含有1956 bp的完整開放閱讀框，編碼一個651氨基酸的蛋白，計算分子量為70 kDa。同源序列搜索結(jié)果表明，異色瓢蟲HSP70與其它真核生物的HSP/HSC70有著較高的序列同源性(85﹪

2、-93﹪)。其中與赤擬谷盜(Triboliumcastaneum)熱休克蛋白70(HSP70)同源性最高，達(dá)到93﹪。 (2)運用實時定量RT-PCR體系比較和分析了異色瓢蟲在不同發(fā)育時期HSP70的組成型表達(dá)情況。在常溫下，不同發(fā)育時期異色瓢蟲體內(nèi)均有HSP70的轉(zhuǎn)錄發(fā)生，但不同時期轉(zhuǎn)錄水平相差很大。其中，HSP70基礎(chǔ)轉(zhuǎn)錄水平最高的是四齡幼蟲，最低的是三齡和蛹。雌雄成蟲基礎(chǔ)轉(zhuǎn)錄水平無明顯差異。異色瓢蟲HSP70隨發(fā)育期的波動

3、表明，在異色瓢蟲的發(fā)育過程中，異色瓢蟲的HSP70可能起到十分重要的作用，并很可能是參與新生蛋白質(zhì)的折疊與轉(zhuǎn)運。 (3)運用實時定量RT-PCR體系比較了不同熱脅迫溫度對不同性別異色瓢蟲HSP70表達(dá)的影響。不同性別的異色瓢蟲在38℃下HSP70的表達(dá)均出現(xiàn)輕微上調(diào)，44℃時達(dá)到最大，超過基礎(chǔ)轉(zhuǎn)錄水平的2倍，并有繼續(xù)增加的趨勢。這表明，異色瓢蟲的雌成蟲對熱脅迫較雄蟲敏感。 (4)運用實時定量RT-PCR體系比較了異色瓢蟲