中國荷斯坦奶牛HSP70-1基因多態(tài)性與耐熱性能相關性分析.pdf

1、熱應激對奶牛的健康造成巨大傷害，并且降低奶牛生產(chǎn)性能，給生產(chǎn)帶來嚴重損失。熱應激蛋白70（HSP70）作為分子伴侶，在奶牛發(fā)生熱應激時能保護機體免受或減輕傷害。本文以溫濕指數(shù)（THI）作為參照指標，比較中國荷斯坦奶牛熱應激期和非熱應激期生理常數(shù)、血液生化指標及生產(chǎn)性能變化。采用PCR-SSCP檢測HSP70-1基因單核苷酸多態(tài)性，使用Western-blot方法檢測奶牛熱應激時淋巴細胞HSP70蛋白表達水平。通過SPSS軟件對SNPs與

2、HSP70表達水平、生理常數(shù)、血清生化指標及生產(chǎn)性能進行關聯(lián)分析。
　　實驗一。從福建長富某牛場核心群隨機選擇458頭中國荷斯坦泌乳牛進行實驗，分別于非熱應激期（2013年11月至2014年1月）和熱應激期（2014年7月至9月）期間，測定牛舍溫濕指數(shù)（THI）、奶牛生理常數(shù)、血清生化指標及生產(chǎn)性能。結果表明：處于中度熱應激時，奶牛直腸溫顯著升高（P<0.05），呼吸頻率極顯著加快（P<0.01）；血清T4和Cor濃度分別下降23

3、.80％（P<0.01）和36.20%（P<0.01），血清T3和INS濃度下降，但差異均不顯著（P>0.05）；血清Glu下降25.50%（P<0.01），血清BUN濃度升高32.14%（P<0.01），血清TG濃度沒有顯著變化；產(chǎn)奶量、乳蛋白率和乳脂率分別下降了17.75%（P<0.05）、5%（P<0.05）和23%（P<0.01）。
　　實驗二。采用PCR-SSCP方法，檢測458頭處于泌乳期中國荷斯坦奶牛的HSP70-1

4、基因單核苷酸多態(tài)性，與耐性能進行關聯(lián)分析。根據(jù)CNKI登錄號為AY149619的HSP70-1基因，使用primer5.0設計12對引物。結果發(fā)現(xiàn)：在HSP70-1基因1112位點發(fā)生了C-A突變，有AA、AB及BB3種基因型；3390位點發(fā)生T-C突變，有CC、CD及DD3種基因型；4583位點發(fā)生T-C突變，有EE和EF2種基因型；5886位點A堿基缺失，有HH和HI2種基因型。采用Western-blot結合光密度分析檢測奶牛HS

5、P70表達水平。使用SPSS軟件建立一般線性模型，對SNPs與生理常數(shù)、血清生化指標、HSP70表達水平及生產(chǎn)性能進行關聯(lián)分析。結果表明：C1112A位點與HSP70表達水平、直腸溫度、產(chǎn)奶量、體細胞數(shù)顯著相關。其中：AB及AA型個體直腸溫度顯著低于BB型個體（P<0.05）；AB型個體血清T3濃度顯著低于AA和BB個體（P<0.05），T4濃度顯著低于BB個體（P<0.05），低于AA個體，但差異不顯著（P>0.05）；AB型個體HS