豬源益生芽孢桿菌的篩選及發(fā)酵工藝研究.pdf

1、隨著飼用抗生素的濫用所導(dǎo)致的耐藥性、藥物殘留、環(huán)境等問題的出現(xiàn)，抗生素替代品的研究成為熱點(diǎn)。微生態(tài)制劑是通過改善宿主腸道內(nèi)的微生態(tài)平衡從而發(fā)揮益生作用的生物制品，芽孢桿菌是微生態(tài)制劑的一種，其能形成內(nèi)生孢子，具有強(qiáng)耐受性等優(yōu)點(diǎn)。
　　本研究從健康仔豬的糞便中分離篩選出對(duì)腸道常見病原菌具有拮抗作用的豬源益生芽孢桿菌、然后對(duì)其益生特性和安全性進(jìn)行研究，得到一株安全無毒且具有良好益生性能的蠟樣芽孢桿菌 BC158，并通過單因素試驗(yàn)和響應(yīng)

2、面設(shè)計(jì)優(yōu)化其發(fā)酵工藝，從而獲得高密度培養(yǎng)工藝，具體研究結(jié)果如下：
　　1、從健康仔豬（15-40日齡）糞便中分離到46株芽孢桿菌，通過對(duì)腸道常見病原菌拮抗性研究，篩選到3株能夠拮抗病原菌（大腸桿菌 O8、腸炎沙門氏菌和金黃色葡萄球菌）的芽孢桿菌，然后通過生理生化實(shí)驗(yàn)和16SrDNA序列分析，結(jié)果表明，3株菌都是蠟樣芽孢桿菌，分別命名為芽孢桿菌BC158、BC234、BC236。
　　2、對(duì)篩選到的三株蠟樣芽孢桿菌 BC158

3、、BC234、BC236的益生性和安全性進(jìn)行了研究，結(jié)果表明， BC158具有最好的潛在益生性，如粘附和抑菌性，且安全無毒，使其在動(dòng)物飼料工業(yè)中具有良好的應(yīng)用前景。BC158對(duì)前腸、中腸、后腸粘液的的粘附率分別為39.68％、33.49%和33.25%。能夠耐受 pH1和0.9%的膽鹽環(huán)境。在所測試的獸用常用抗生素中，均有不同程度的敏感。且BC158能產(chǎn)生淀粉酶、蛋白酶和纖維素酶。同時(shí)蠟樣芽孢桿菌腸毒素(BCET)的檢測結(jié)果表明，BC1

4、58為腸毒素陰性。接下來對(duì) BC158進(jìn)行了小鼠飼喂試驗(yàn)，飼喂三周期間試驗(yàn)組小鼠生長良好，無腹瀉嘔吐情況出現(xiàn)，且對(duì)小鼠的生長性能有較大的影響，如日增重明顯提高；小鼠解剖也未見任何消化道病變，試驗(yàn)組小鼠的免疫指數(shù)（胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)）較對(duì)照組明顯提高，表明 BC158能刺激小鼠免疫臟器的發(fā)育，提高小鼠的免疫力。
　　3、對(duì) BC158的高密度發(fā)酵工藝進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，該菌的最佳發(fā)酵條件為：溫度37℃，pH7.2，搖床轉(zhuǎn)速180r