2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁
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1、根據(jù)GenBank中已經(jīng)發(fā)表的羊傳染性膿皰病毒毒株NZ2株的VIR基因序列，設(shè)計合成1對引物。采用PCR技術(shù)對內(nèi)蒙古分離株OV/nm-05的VIR基因進行特異性擴增，然后將其克隆到pEASY-T1載體中。將經(jīng)過PCR鑒定和酶切鑒定后的陽性重組質(zhì)粒進行測序，得到大小為779bp的核苷酸片段，其中完整的VIR基因長為552bp。序列分析表明，OV/nm-05株與1710/03株同源性最高，達98.0％，與513/04株的同源性最低，為95.

2、4%，與其他8株參考毒株的同源性都在95.5%以上，說明羊傳染性膿皰病毒各株之間VIR基因的差異不大。
　　用上述引物進行PCR退火溫度的優(yōu)化。采用該PCR方法對OV/nm-05株、犢牛睪丸細胞和山羊痘病毒GVX/nm株的DNA進行PCR擴增，結(jié)果只有OV/nm-05株能擴增出相應(yīng)的片段，其余均為陰性，說明該PCR反應(yīng)體系具有良好的特異性；對OV/nm-05株的DNA模板10倍梯度稀釋后進行PCR擴增，結(jié)果最低可檢測出38pg的模

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