豬繁殖與呼吸綜合征病毒GP3蛋白單克隆抗體制備與抗原表位鑒定.pdf

1、C l a s s i f i e dI n d e x ：C o n f i d e n t i a l ( y e s ／n o ) ：n oC o d e ： 1 0 2 2 4N 0 ．1 1 0 6 4 6 1D i s s e r t a t i o nf o r t h eM a s t e r D e g r e eG e n e r a t i o no f aM o n o c l o n a l A n t i b

2、 o d y a g a i n s tP o r c i n e R e p r o d u c t i V e a n d R e s p i r a t o r yS y n d r o m e V i r u sG P 3 P r o t e i n a n dC h a r a c t e r i z a t i o no 兒t sE p i t o p e sC a n d i d a t e ：T a o Y eS u p

3、 e r V i s o r ：P r o f ．R e n X i a o f e n gD e g r e eC a t e g o r y ：M a s t e ro f A g r i c u l t u r eC o l l e g e ：C 0 1 l e g eo f V e t e r i n a r yM e d i c i n eF i r s tl e V e ld i s c i p l i n e ：V e t

4、 e r i n a r yM e d i c i n eS e c o n d l e V e ld i s c i p l i n e ：P r e V e n t i V eV ．e t e “n a r yM e d i c i n eH a r b i n C h i n aJ u n e 2 0 1 4東北農(nóng)業(yè)人學(xué)農(nóng)學(xué)碩．1 ：畢業(yè)論文3 ．2 ．1 免疫B a l b ／C 小鼠血清抗體效價(jià)測(cè)定??????????????

5、????1 73 ．2 ．2 最佳抗原抗體．r ：作濃度的確定????????????????????一1 73 ．2 ．3 盼| 生雜交瘤細(xì)胞的篩選???????????????????????．．1 73 ．2 ．4 雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清效價(jià)的測(cè)定???????????????????一1 83 ．2 ．5 單克隆抗體Ⅱ類(lèi)鑒定????????????????????????1 93 ．2 ．6 腹水制備與純化?????????????

6、?????????????1 93 ．2 ．7 純化后腹水抗體效價(jià)的測(cè)定?????????????????????．2 03 ．2 ．8 間接免疫熒光方法鑒定單克隆抗體與P R R S V 的結(jié)合情況?????????．2 13 ．2 ．9 免疫印跡方法鑒定單克隆抗體與G P 3 蛋白的結(jié)合情況??????????．．2 13 ．2 ．1 0 單克隆抗體特異性分析???????????????????????2 23 ．3P R R S

7、 V G P 3 蛋白抗原表位的篩選?????????????????????2 43 ．3 ．1 噬茵體篩選與擴(kuò)增?????????????????????????2 43 ．3 ．2 親和能力檢測(cè)與測(cè)序????????????????????????一2 43 ．3 ．3 競(jìng)爭(zhēng)性阻斷實(shí)驗(yàn)??????????????????????????2 64 討論?????????????????????????????????????????

8、????．．2 74 ．1 目的基因的選擇????????????????????????????2 74 ．2 免疫抗原和篩選抗原的選擇???????????????????????．2 84 - 3B a l b ／C 小鼠的免疫???????????????????????????2 84 ．4 細(xì)胞融合與克隆????????????????????????????2 84 ．5 抗G P 3 蛋白單克隆抗體1 F 7 的特性分析

9、??????????????????2 94 ．6 單克隆抗體腹水制備與純化???????????????????????．2 94 ．7 通過(guò)噬菌體展示技術(shù)篩選P R R S VG P 3 蛋白抗原表位?????????????2 95 結(jié)論?????????????????????????????????????????????一3 1致 謝??????????????????????????????????．3 2參考文獻(xiàn)????