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文檔簡介
1、本研究從重慶地區(qū)分離和鑒定了豬繁殖與呼吸綜合征病毒,并對分離病毒的M蛋白基因進行了克隆和序列分析。試驗對疑似為PRRS病豬的病料采集處理后,接種Marc-145細胞進行病毒培養(yǎng),從病料中分離了一株PRRSV,命名為C14-2。試驗對分離病毒進行了鑒定,電鏡觀察結果可見胞漿內(nèi)散布大量呈球形的病毒粒子,直徑為40-60nm;病毒的TCID50為10-5.70/0.1ml;病毒為RNA病毒;C14-2株經(jīng)56℃處理20-30min后喪失對細胞
2、的感染力;病毒培養(yǎng)的最佳PH值是6.8-7.0;分離病毒能夠被美洲型的PRRSV標準陽性血清所中和,其中和指數(shù)為1:27;病毒動物回歸試驗表明,分離病毒接種40日齡的仔豬,臨床表現(xiàn)體溫升高和一定程度的呼吸癥狀。 試驗設計了PRRSV M蛋白基因引物,對C14-2株的M基因進行了RT-PCR擴增,擴增出約550bp的基因片段。試驗對擴增的M基因以PMD18-T載體進行克隆,篩選獲得重組質(zhì)粒PMD-M,對重組質(zhì)粒進行序列測定,結果顯
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