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文檔簡介
1、該研究采用PK<,15>細(xì)胞培養(yǎng)豬瘟石門毒,經(jīng)蔗糖密度梯度離心純化后免疫小鼠,取免疫脾細(xì)胞與SP<,2/0>-Ag<,14>在PEG4000作用下融合,經(jīng)間接ELISA法篩選,有限稀釋法克隆3次,最終獲得4株穩(wěn)定分泌抗CSFV-Shimen的McAb雜交瘤細(xì)胞株,分別命名為AC9、CF8、DG5和EC9,并接種小鼠腹腔生產(chǎn)單抗腹水,ELISA效價(jià)為1:2000至1:8000不等.四株單抗與基因工程CSFV E2蛋白反應(yīng)結(jié)果表明AC9、C
2、F8和EC9是抗CSFV E2蛋白的單抗.單抗AC9.DG5和EC9與SDS處理前后的CSFV反應(yīng)無明顯差異,而CF8不與SDS處理后的CSFV反應(yīng),CF8針對(duì)的抗原表位的抗原性與空間構(gòu)象密切相關(guān).用AC9和CF8單抗對(duì)CSFV進(jìn)行抗原捕獲間接ELISA試驗(yàn)(ACI-ELISA),通過一元單抗和二元單抗CAI-ELISA試驗(yàn)的比較,結(jié)果表明AC9與CF8兩種單抗協(xié)同作用可使ELISA反應(yīng)值提高1倍.封閉對(duì)比試驗(yàn)表明封閉與否對(duì)試驗(yàn)結(jié)果無顯
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