郝老師單克隆抗體的制備_第1頁
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文檔簡介

1、單克隆抗體的制備,應(yīng)急處置:洗、擠、消毒24小時內(nèi)接種疫苗,5針,28天內(nèi)打完咬傷較嚴(yán)重者先注射狂犬病病毒抗毒血清和破傷風(fēng)桿菌抗毒血清,后接種疫苗。,,閱讀思考,常規(guī)抗體的缺點(diǎn)?為什么血清中分離的抗體純度低?,常規(guī)抗體,(多克隆抗體),純度低、特異性差、產(chǎn)量低,1、單克隆抗體 由一個B淋巴細(xì)胞增殖分化形成的漿細(xì)胞群產(chǎn)生的抗體。化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強(qiáng)。,,,被免疫過的B細(xì)胞(漿細(xì)胞),設(shè)想:,B細(xì)胞,骨髓瘤細(xì)胞,,,,,,,雜交

2、瘤細(xì)胞:既能產(chǎn)生特異性抗體,又能無限增殖,,細(xì)胞融合技術(shù),細(xì)胞培養(yǎng),,,,,,,,,抗原,,,,,2、單克隆抗體制備過程,,,,,B1、B2、B3…多種淋巴細(xì)胞,骨髓瘤細(xì)胞(設(shè)定為A),+,PEG,選擇培養(yǎng)基,,BB AB1 AB2 AB3…AA,細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑,其中D途徑能被氨基喋呤阻斷。試驗(yàn)用骨髓瘤細(xì)胞(缺陷型)只有D途徑,沒有S途徑。,雜交瘤細(xì)胞克隆化培養(yǎng),抗體檢測,產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞,獲取

3、,單克隆抗體體內(nèi)制備,單克隆抗體體外制備,優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備,將以下單克隆抗體的制備步驟排序,3、單克隆抗體的應(yīng)用,①用于治療疾病和運(yùn)載藥物,如生物導(dǎo)彈,131I,制備甲胎蛋白的單克隆抗體,與藥物結(jié)合,定向運(yùn)輸?shù)桨┘?xì)胞位置。,癌細(xì)胞膜具特殊蛋白質(zhì),甲胎蛋白、癌胚蛋白。,“生物導(dǎo)彈” =單克隆抗體+藥物,②作為診斷試劑:,,,,人絨毛膜促性腺激素的單抗,雜交瘤技術(shù)是上世紀(jì)方法學(xué)上的一個重大突破,開創(chuàng)了大量生產(chǎn)具有專一特

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