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1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文仔豬抗菌肽PR39基因表達(dá)隨日齡的變化及不同鋅源對(duì)其表達(dá)的影響姓名:林文學(xué)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)指導(dǎo)教師:汪以真許梓榮200305012003年浙江大學(xué)碗士學(xué)位論文仔豬抗菌肽PR一39基因表達(dá)隨豳齡的變化及不同鋅源對(duì)其表達(dá)的影響摘要本謙麓先以t、14、28、本2、S6罄齡懿子豬為試驗(yàn)對(duì)象,駁RTPCR法失撿測(cè)手段,研究不鄹墨齡《孑豬摭蘺肽PR39基因表達(dá)的變化援律。根據(jù)已報(bào)道的豬抗菌肽PR39和看
2、家基因8。肌動(dòng)蛋白(pactin)基因序列,分別設(shè)計(jì)PR39和Bactin朗引物,探討了PCR體系中適窟的MgCl2濃度、循環(huán)次數(shù)以及兩對(duì)引物間競(jìng)爭(zhēng)情況。試驗(yàn)揭示MgCl2適宜的濃度為25mmol/L,循環(huán)次數(shù)為29。稷瓣兩對(duì)琴l鐫之聞豹雜交鬻鼴,分澍進(jìn)行了擴(kuò)耀。穩(wěn)建了後純懿RTPCR法,用于仔豬抗菌默PR39基因mRNA襲達(dá)量的測(cè)寇。試駿紿果發(fā)現(xiàn),仔豬顳奶廚PR,39mRNA表達(dá)攮有較大的變化。仔豬剮出生時(shí)PR39相對(duì)于pactin的
3、mRNA表達(dá)量平均為O45,14R齡時(shí)上升為O74,28門(mén)齡時(shí)上升為0,88,42E1齡時(shí)(斷奶聰7天)下降為022,56弱齡時(shí)上畀到230。挑選96頭36fjj齡社長(zhǎng)嘉斷奶仔豬,分成處理l(對(duì)照組)、處理2、處理3、處理4甄個(gè)組(每個(gè)組設(shè)3個(gè)整復(fù),每個(gè)重復(fù)8頭豬,公母各半)。蕊碥疆糧相同(消化能1325MJ/Kg,羊且蛋自185%),處理1日糧中不添加任何鋅源,處理2、3、4分剮飼喂醵硫酸鋅、氯化鋅和納米輟傀鋅的澎式添嬲100mg/k
4、g、3000mg&g、100mg/kg鎊豹鑭糧。鞭試期燕7天,鍶養(yǎng)菠試襄必】5天。試驗(yàn)豬充分喂斟(邂疆洶次),竇由飲水。15天后按體重胡近的要求,從每綴磊選3頭,共12頭,屠宰,淑左腿股骨骨髓,從骨髓組織中提敷總RNA,反轉(zhuǎn)錄成eDNA保存。采用已構(gòu)建的優(yōu)化RTPCR法,邋當(dāng)調(diào)整循環(huán)數(shù)的參數(shù),檢測(cè)各處理組群懿中PR39稽對(duì)于pacfin靜mRNA表達(dá)量。鑭莠試驗(yàn)縫果表明:與對(duì)照緩鞠魄,處理3(添擻3000mg/kgZn的ZnO組)丑增重
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