抑癌基因FHIT治療惡性腦膠質(zhì)瘤的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、腦膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，約占所有原發(fā)性神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤的60％。采用傳統(tǒng)的治療方法療效不佳，即使聯(lián)合手術(shù)、放療和化療，惡性膠質(zhì)瘤病人也往往會(huì)在首次發(fā)病后1-2年內(nèi)死亡。因而在腦膠質(zhì)瘤的治療探索中，人們嘗試用基因治療的方法來改善療效。脆性組氨酸三聯(lián)體基因(fragilehistidinetriad，F(xiàn)HIT)是1996年發(fā)現(xiàn)的一個(gè)新的抑癌基因。FHIT可能通過調(diào)控細(xì)胞周期誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、形成Fhit-底物復(fù)合物及與細(xì)胞微管結(jié)合等

2、途徑發(fā)揮抑癌的功能。許多研究發(fā)現(xiàn)，多種原發(fā)性腫瘤及腫瘤細(xì)胞株中都存在FHIT基因的異常。近年來人們開始將抑癌基因FHIT作為腫瘤的治療因子進(jìn)行研究，結(jié)果顯示FHIT基因能抑制腫瘤的活性。 本課題有兩個(gè)目的：一是檢測(cè)人腦膠質(zhì)瘤中抑癌基因FHIT的突變情況；二是探討運(yùn)用抑癌基因FHIT靶向治療人腦惡性膠質(zhì)瘤。課題由兩部分組成： 第一部分：通過對(duì)11例人腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本和4例正常人腦組織標(biāo)本的FHIT基因進(jìn)行檢測(cè)，了解人腦膠質(zhì)瘤中

3、是否存在抑癌基因FHIT的突變。結(jié)果顯示，11例膠質(zhì)瘤標(biāo)本中有4例發(fā)生FHIT基因的點(diǎn)突變，突變率為36.4％，且高度惡性膠質(zhì)瘤的突變率為42.8％，高于低度惡性膠質(zhì)瘤的突變率(25％)。而正常腦組織無FHIT基因的突變。 第二部分：通過構(gòu)建人FHIT基因的真核細(xì)胞表達(dá)質(zhì)粒，之后轉(zhuǎn)染膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞，觀察其是否能抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)；然后再將轉(zhuǎn)染有FHIT基因的U87細(xì)胞和對(duì)照的U87細(xì)胞接種到裸鼠皮下，在活體上進(jìn)一步觀察抑癌基因

4、FHIT對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的抑制作用。結(jié)果顯示，U87細(xì)胞轉(zhuǎn)染了FHIT基因24小時(shí)后的生長(zhǎng)抑制率為22.2％，48小時(shí)后的生長(zhǎng)抑制率為25.33％，明顯高于未轉(zhuǎn)染的及轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒的U87細(xì)胞；轉(zhuǎn)染了FHIT基因的U87細(xì)胞其48小時(shí)后的凋亡率為16.60％，而轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒的U87細(xì)胞為3.51％，未轉(zhuǎn)染的U87細(xì)胞為2.80％，F(xiàn)HIT基因轉(zhuǎn)染組的凋亡率明顯高于其他兩組?；铙w實(shí)驗(yàn)中，F(xiàn)HIT基因轉(zhuǎn)染組的移植瘤的體積和重量均明顯低于空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組和