II型限制性內切酶pstI在合成生物學中的應用.pdf

1、II型限制性內切酶型限制性內切酶pstI在合成生物學中的應用在合成生物學中的應用TheapplicationoftypeIIrestrictionendonucleasePstItosyntheticbiology研究生姓名舒?zhèn)チ紝W號10808069專業(yè)生物化學與分子生物學導師姓名陳國強職稱教授入學日期2008年9月論文答辯日期2011年6月3日汕頭大學碩士學位論文I摘要本論文是以研究PstI限制性內切酶對宿主基因組的影響為目的。把帶有

2、PstI基因的質粒轉入到RosettaTM菌中，在30oC條件下加入終濃度為1mMIPTG誘導表達PstI內切酶，通過體外酶切實驗證實，產生的PstI蛋白具有正常的II型限制性內切酶功能。經研究發(fā)現(xiàn)產生的PstI內切酶可以將宿主基因組切開，被切開的基因組隨后會被DNA酶降解，最后可以得到沒有基因組的細菌空殼。在誘導3小時后，用DAPI進行染色，在激光共聚焦顯微鏡下觀察的結果說明RosettaTM菌的基因組被完全降解。因此使用這個方法可以