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1、目的:建立適合該實(shí)驗(yàn)室條件的胚胎源性神經(jīng)干細(xì)胞(NSC s)分離培養(yǎng)、擴(kuò)增的方法,探討NSCs移植與堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)應(yīng)用對(duì)脊髓損傷(SCI)的修復(fù)作用及其可能機(jī)制.方法:取E16-18SD大鼠胚胎端腦,采用酶消化、機(jī)械吹打獲取單細(xì)胞懸液,以無(wú)血清培養(yǎng)基加bFGF、B27刺激細(xì)胞增殖,進(jìn)行傳代;采用免疫細(xì)胞化學(xué)法分別以nestin、NSE、GFAP及GC鑒定神經(jīng)干細(xì)胞、分化的神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞與少突膠質(zhì)細(xì)胞.65只SD
2、大鼠,隨機(jī)分為5組:A組為正常組,不行SCI手術(shù),與其他四組同期飼養(yǎng)檢測(cè)指標(biāo);其他四組均行T<,12>脊髓左半側(cè)切除手術(shù),B組為損傷對(duì)照組,SCI處僅植入含生理鹽水的明膠海綿;C組為NSCs組,損傷處移植無(wú)bFGF的NSCs懸液;D組為bFGF應(yīng)用組,損傷處植入含bFGF但不含NSCs的明膠海綿;E組為NSCs+bFGF組,損傷處移植含NSCs懸液和bFGF的明膠海綿.移植術(shù)后2h各組行iNOS、c-fos免疫細(xì)胞化學(xué)標(biāo)記等,觀察iNO
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