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1、背景:脊髓損傷(SpinalCordInjury,SCI)及其繼發(fā)的病理生理效應(yīng)可直接導(dǎo)致神經(jīng)功能的喪失,造成組織器官功能的障礙,具有相當(dāng)高的致殘率和死亡率。到目前為止,修復(fù)人類損傷脊髓的目標(biāo)仍然是一個(gè)非常棘手的難題。目前的研究認(rèn)為導(dǎo)致?lián)p傷脊髓的結(jié)構(gòu)和功能難以恢復(fù)的主要原因是:損傷后不適宜的內(nèi)部微環(huán)境導(dǎo)致絕大部分軸突的再生努力歸于失敗,即所謂“夭折性再生”。神經(jīng)干細(xì)胞(NeuralStemCell,NSC)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(central
2、neuralsystem,CNS)中具有自我更新能力和多向分化潛能的細(xì)胞,能被大量擴(kuò)增,并可在體內(nèi)和體外誘導(dǎo)分化成CNS內(nèi)主要的三種細(xì)胞:神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞,是CNS損傷后再生修復(fù)的理想材料和基因載體。本實(shí)驗(yàn)首次探索以同時(shí)攜帶神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3(NT-3)和綠色熒光蛋白(GFP)的lentivirus為載體,構(gòu)建分泌NT-3的鼠胚基因工程N(yùn)SC和以lentivirus為載體構(gòu)建表達(dá)多基因的人胚NSC的可行性,目的是為SCI
3、的實(shí)驗(yàn)研究和臨床研究提供可供移植的重要細(xì)胞資源。在此基礎(chǔ)上探索了移植分泌NT-3的鼠胚基因工程N(yùn)SC、移植普通鼠胚NSC以及l(fā)entivirus介導(dǎo)的直接體內(nèi)轉(zhuǎn)基因治療三種方法對(duì)損傷脊髓功能恢復(fù)的影響,比較和評(píng)價(jià)三種治療方法對(duì)損傷脊髓功能恢復(fù)的作用和潛在應(yīng)用前景,目的是探索基因調(diào)控和基因治療修復(fù)SCI的新途徑。 第一部分Lentivirus介導(dǎo)分泌NT-3的鼠胚基因 工程神經(jīng)干細(xì)胞構(gòu)建實(shí)驗(yàn)研究 目的:探索以len
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