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文檔簡介
1、第三軍醫(yī)大學碩士學位論文負載脊髓勻漿蛋白的樹突狀細胞促進小鼠脊髓損傷功能恢復的作用姓名:劉明永申請學位級別:碩士專業(yè):外科學(骨外)指導教師:趙建華20080501第三軍醫(yī)大學碩士學位論文軸突順行示蹤,辣根過氧化物酶(horseradishperoxidase,HRP)軸突逆行示蹤,結合IHC檢測膠質瘢痕與軸突、囊腔的關系。結果1各組小鼠在傷后均出現完全性截癱,1w左右BBB評分逐漸恢復。其中,hpDCs組小鼠恢復最快,于28dpi進入
2、平臺期,BBB評分高達14O2O,最終達到16321,顯著高于DCs組(10020)和hp組(10418)p001)。腹腔注射和局部注射BBB評分結果無統(tǒng)計學差異。2HE染色顯示各組損傷局部均出現反應性膠質瘢痕增生,空洞形成。但是,hpDCs組損傷局部空洞范圍與DCs、hp組比較具有顯著統(tǒng)計學差異pO01),損傷范圍及膠質瘢痕厚度與DCs組具有統(tǒng)計學差異pO05)。3IHC染色發(fā)現,脊髓損傷的囊腔周圍GFAP表達的星形膠質細胞肥大增生,
3、突起豐富,構成膠質瘢痕的主要成分。與其它二組相比,hpDCs組GFAP表達出現較慢,且GFAP細胞分布較稀疏;hpDCs組,Nestin細胞在注射后56dpi仍可見,而其它二組在注射后28dpi基本消失;NF表達可以明確地觀察到損傷后軸突分布的情況,各組無顯著區(qū)別。4各組中,BDA順行示蹤與HRP逆行示蹤觀察到軸突終止于膠質瘢痕外,未到達囊腔內。結論1本實驗制備的小鼠脊髓鉗夾傷模型,造成脊髓嚴重不完全損傷,其病理過程和臨床接近,能夠模擬
4、臨床自然病程,符合實驗要求。2局部或腹腔注射hpDCs,能夠顯著促進小鼠SCI神經功能恢復,而hp具有相對較弱的促進作用,單純DCs效果最差。3腹腔注射和局部注射具有同樣效果,表明hpDCs是通過全身性的系統(tǒng)免疫起作用。4hpDCs可以延緩局部膠質瘢痕形成,降低膠質瘢痕密度和厚度,縮小局部空洞及損傷部位面積,提示可以降低膠質瘢痕對神經再生的屏障作用;可以延長局部Nestin表達,提示可以增加局部存在的內源性再生能力。5免疫組織化學熒光雙
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