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文檔簡介
1、目的:分別構(gòu)建腺相關(guān)病毒載體質(zhì)粒pSNAV-His-FGL-IRES-ZsGreen、pSNAV-HA-IKVAV-IRES-tdTomato、pSNAV-His-FGL-IRES-HA-IKVAV,轉(zhuǎn)染HEK293細胞檢測目的基因的表達,并進行病毒包裝。
方法:應(yīng)用分子克隆技術(shù)獲取His-FGL、HA-IKVAV、His-FGL-IRES-HA-IKVAV基因片段,克隆至pSNAV腺相關(guān)病毒載體上,構(gòu)建相應(yīng)質(zhì)粒,轉(zhuǎn)染HE
2、K293細胞,檢測質(zhì)粒的活性及表達,成功表達后進行腺相關(guān)病毒包裝。
結(jié)果:經(jīng)基因測序及酶切鑒定證實 pSNAV包裝質(zhì)粒pSNAV-His-FGL-IRES-ZsGreen、 pSNAV-HA-IKVAV-IRES-tdTomato、pSNAV-His-FGL-IRES-HA-IKVAV構(gòu)建成功,轉(zhuǎn)染HEK293細胞后,熒光免疫組化顯示His-FGL、HA-IKVAV、His-FGL-IRES-HA-IKVAV成功表達,腺相
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