Rho-ROCKⅡ的抑制劑促進(jìn)大鼠脊髓損傷后功能恢復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：觀察ROCKⅡ抑制劑Y-27632對(duì)脊髓損傷后軸突再生與功能恢復(fù)的影響。方法：（1）選擇健康雌性成年SD大鼠140只，隨機(jī)分成4組，每組35只，其中A、B、C三組的大鼠用WD法制成T8-T10平面以下完全性截癱的脊髓損傷模型，同時(shí)在L4平面的蛛網(wǎng)膜下腔植入注藥用的軟導(dǎo)管，D組僅咬開(kāi)椎板，不損傷脊髓。A組為Y-27632治療組，B組為PBS治療對(duì)照組，C組為空白對(duì)照組，D組為假手術(shù)組。（2）A、B組于傷后1h開(kāi)始，分別用微量注射器注

2、入12μL的Y-27632和PBS，每天一次，共14天，C、D組未作處理。（3）各組：術(shù)后8、24、168 h各組分別進(jìn)行HE染色和TUNEL染色觀察，并計(jì)算凋亡細(xì)胞數(shù)；術(shù)后1d、1、2 w觀察生長(zhǎng)相關(guān)蛋白-43的表達(dá)；術(shù)后3，8w作體感誘發(fā)電位觀察潛伏期和波幅；術(shù)后第6w用腦立體定位儀在大腦運(yùn)動(dòng)感覺(jué)皮質(zhì)區(qū)注射示蹤劑，術(shù)后8w順行示蹤觀察各組軸突的生長(zhǎng)情況；3、6、8w作BBB評(píng)分。（4）各項(xiàng)統(tǒng)計(jì)指標(biāo)用x±s表示，應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)

3、計(jì)軟件作單因素方差分析。結(jié)果：（1）HE染色：A組與B、C組相比，24小時(shí)后，神經(jīng)細(xì)胞與膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量更多，變性細(xì)胞及紅細(xì)胞數(shù)量明顯更少；組織水腫和空洞形成也較輕。（2）TUNEL法測(cè)定凋亡細(xì)胞數(shù)：8h時(shí)，A、B、C、D組分別為50.5±4.70，58.9±2.46，58.5±2.1，8.3±1.44；24h時(shí)，分別為45.0±4.00，55.4±4.94，54.5±3.11，8.3±1.44；168h時(shí)，分別為9.9±1.58，15.7

4、±1.50，15.6±1.68，8.3±1.44。各時(shí)間段A組與B、C、D組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，B、C組間比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，B、C組分別與D組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（3）生長(zhǎng)相關(guān)蛋白-43的表達(dá)：1d時(shí)，A、B、C、D組分別為76.9±3.71，43.3±3.99，42.3±4.77，37.3±2.69；1w時(shí)，分別為104.9±3.83，70.1±3.57，68.2±3.34，37.3±2.69；2w時(shí)，分別為159.1±4.73，9

5、4.5±3.91，96.13±3.56，37.27±2.69。各時(shí)間段A組與B、C、D組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，B、C組間比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，B、C組分別與D組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（4）體感誘發(fā)電位潛伏期：3w時(shí)，A、B、C、D組分別為30.2±0.57，36.0±1.41，35.9±0.89，14.5±0.79；8w時(shí)分別為23.1±1.52，28.5±1.27，27.9±1.43，14.5±0.79；波幅：3w時(shí)分別為3.58±0.08

6、4，14.18±1.604，1.64±0.089，1.32±0.192；8w時(shí)分別為6.80±0.274，3.00±0.339，2.80±0.374，14.18±1.604。各時(shí)間段A組與B、C、D組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，B、C組間比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，B、C組分別與D組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（5）熒光順行示蹤：8w時(shí)，A、B、C組分別為74.8±22.49，35.0±1.58，33.7±1.30。A組與B、C組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，B、C組間比