侵襲性垂體腺瘤的臨床與相關(guān)基因研究.pdf

1、目的: 垂體腺瘤是顱內(nèi)最常見(jiàn)的腫瘤之一，標(biāo)準(zhǔn)經(jīng)蝶竇入路可以安全地切除大部分垂體腺瘤，患者預(yù)后良好。但是如腫瘤呈侵襲性生長(zhǎng)，廣泛侵襲鞍旁區(qū)及斜坡區(qū)，會(huì)引起嚴(yán)重的臨床癥狀，由于標(biāo)準(zhǔn)經(jīng)蝶竇入路顯露范圍相對(duì)局限，難以完全切除腫瘤。此外，侵襲性垂體腺瘤具有獨(dú)特的生物學(xué)行為，發(fā)病機(jī)理尚不明確。這些因素導(dǎo)致侵襲性垂體腺瘤的治療效果較差，而且存在遠(yuǎn)期復(fù)發(fā)問(wèn)題。因此，侵襲性垂體瘤的臨床與相關(guān)基因研究是制定有效診療策略的基礎(chǔ)。 擴(kuò)大經(jīng)蝶竇入

2、路通過(guò)擴(kuò)大顱底骨質(zhì)的切除范圍，增加了顯露范圍，提高了腫瘤切除程度。上皮鈣粘蛋白是一種細(xì)胞粘附分子，與腫瘤的侵襲關(guān)系密切，但其與垂體腺瘤侵襲性的關(guān)系尚未完全明確。Bmi—1和PIK3CA均系癌基因，與細(xì)胞的增殖、侵襲和凋亡等有關(guān)，在惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中起重要作用，它們是否與侵襲性垂體腺瘤的發(fā)病相關(guān)尚未見(jiàn)報(bào)道。 本研究的目的是：總結(jié)采用擴(kuò)大經(jīng)蝶竇入路治療侵犯前顱底、海綿竇及斜坡的垂體腺瘤手術(shù)經(jīng)驗(yàn)；闡明上皮鈣粘蛋白與垂體腺瘤侵襲

3、性的關(guān)系及其臨床意義；明確侵襲性垂體腺瘤中Bmi—1與PIK3CA的表達(dá)情況及其與腫瘤侵襲的關(guān)系。 資料與方法: 1、回顧性分析北京協(xié)和醫(yī)院自1999年9月至2008年3月采用擴(kuò)大經(jīng)蝶竇入路手術(shù)治療的126例侵襲性垂體腺瘤連續(xù)病例資料。 2、根據(jù)改良Hardy分級(jí)及Knosp分級(jí)，將11例垂體腺瘤患者分成非侵襲組和侵襲組，采用免疫組織化學(xué)和RT-PCR方法檢測(cè)兩組垂體腺瘤原代細(xì)胞的上皮鈣粘蛋白表達(dá)水平。選用甲基轉(zhuǎn)

4、移酶抑制劑5—氮—2’—脫氧胞苷對(duì)侵襲組原代細(xì)胞進(jìn)行去甲基化處理，通過(guò)免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)處理后的上皮鈣粘蛋白表達(dá)水平，采用BoydenChamber體外侵襲模型檢測(cè)處理前后細(xì)胞侵襲能力的變化。 3、以改良Hardy分級(jí)為標(biāo)準(zhǔn)，并結(jié)合病理學(xué)表現(xiàn)，將臨床垂體腺瘤病例分為非侵襲組與侵襲組。收集手術(shù)切除的19例新鮮腫瘤標(biāo)本，液氮保存，Trizol法提取總RNA，反轉(zhuǎn)錄成cDNA，real-TimePCR法檢測(cè)兩組中Bmi—1基因與PI

5、K3CA基因mRNA表達(dá)水平。對(duì)60例垂體腺瘤以及2例正常垂體的福爾馬林固定石蠟包埋標(biāo)本，采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)細(xì)胞增殖指標(biāo)Ki—67以及P53蛋白、Bmi—1蛋白和PIK3CA蛋白的表達(dá)情況。通過(guò)SPSS13.0軟件對(duì)兩組病例的real-TimePCR結(jié)果及免疫組化結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果: 1、本組患者男性55例，女性71例。大腺瘤82例，巨大腺瘤44例。腫瘤向前顱底生長(zhǎng)14例；向側(cè)方生長(zhǎng)包繞海綿竇111例，其中

6、有3例侵入顳葉下方；向后方生長(zhǎng)累及斜坡28例；同時(shí)突破鞍底向蝶竇方向生長(zhǎng)47例；同時(shí)向兩個(gè)方向以上呈侵襲性生長(zhǎng)者59例。腫瘤全切除78例(61.9％)，次全切除43例(34.1％)，大部切除5例(4.0％)。術(shù)后并發(fā)癥包括一過(guò)性腦脊液鼻漏7例；顱神經(jīng)不全麻痹5例；全垂體功能低下5例；頸內(nèi)動(dòng)脈損傷2例；單眼失明2例；永久性尿崩癥1例；鼻中隔穿孔2例；無(wú)死亡病例。 2、在mRNA水平和蛋白水平，侵襲組上皮鈣粘蛋白表達(dá)明顯低于非侵襲組

7、(P<0.05)。加入5—氮—2’—脫氧胞苷后，侵襲組原代細(xì)胞的上皮鈣粘蛋白表達(dá)增強(qiáng)(P<0.01)，并且侵襲能力降低(P<0.01)。 3、侵襲組的Bmi—1基因與PIK3CA基因mRNA表達(dá)水平高于非侵襲組(P=0.020，P=0.013)。Bmi蛋白和PIK3CA蛋白在腺垂體中不表達(dá)。侵襲組Bmi—1蛋白和PIK3CA蛋白的表達(dá)高于非侵襲組(P<0.001，P=0.005)。Bmi—1蛋白的表達(dá)水平與腫瘤的預(yù)后相關(guān)(P=0

8、.007)。 結(jié)論: 1、擴(kuò)大經(jīng)蝶竇入路可以充分暴露向前顱窩底、海綿竇及斜坡生長(zhǎng)的垂體腫瘤，提高了腫瘤全切除率，并發(fā)癥相對(duì)較少。質(zhì)地硬韌、侵犯包繞海綿竇以及呈多方向侵襲的腫瘤不容易徹底切除。該入路增加了顯微鏡下直視操作空間，有利于辨認(rèn)腫瘤與神經(jīng)、血管的關(guān)系，便于手術(shù)操作。術(shù)前影像學(xué)研究及內(nèi)鏡、神經(jīng)導(dǎo)航等新技術(shù)的應(yīng)用提高了腫瘤切除的療效和安全性。 2、上皮鈣粘蛋白表達(dá)下調(diào)與侵襲性垂體腺瘤有關(guān)，原因可能是基因啟動(dòng)子區(qū)