RSUME、HIF-1α-VEGF-A通路與垂體腺瘤侵襲的相關性.pdf

1、目的：
　　研究RWD結構小泛素化增強子（RWD containing sumoylation enhancer，RSUME）通過增強小泛素相關修飾因子-1（small ubiquitin related modifiers-1，SUMO-1）表達，穩(wěn)定缺氧誘導因子（hypo xia-ind uc ib le factor1-a lp ha，HIF-1α）/血管內皮生長因子（vascular endothelial growth

2、factor，VEGF）通路在垂體腺瘤中的作用及侵襲的相關性。進一步探討RSUME、SUMO-1、HIF-1α/VEGF與垂體腺瘤侵襲性生物學行為的關系，為垂體腺瘤抗血管新生，降低垂體腺瘤侵襲提供新的理論依據(jù)。
　　方法：
　　1、研究RSUME、SUMO-1、HIF-1α、VEGF-A在垂體腺瘤中的表達及垂體腺瘤侵襲的相關性
　　通過影像學檢查及術中所見，并依據(jù)Hardy-Wilson以及Knosp標準將垂體腺瘤劃分

3、為侵襲性垂體腺瘤組以及非侵襲性垂體腺瘤組。采用免疫組化、wes ter n blo t、qPC R檢測49例非侵襲性垂體腺瘤、34例侵襲性垂體腺瘤以及9例正常垂體包膜中RSUME、SUMO-1、HIF-1α、VEGF-A在蛋白質和mRNA兩個水平上的表達，并進行比較，同時行相關性分析。
　　2、研究RSUME通過HIF-1α/VEGF通路在垂體腺瘤中的作用的機制
　　通過RSUME小干擾RNA（small interferi

4、ng RNA，siRNA）以及氯化鈷干擾小鼠垂體腺瘤 AtT-20細胞，行實時熒光定量 PCR檢測 RSUME、HIF-1α、VEGF-A的mRNA水平的改變，蛋白質印跡法檢測SUMO-1、HIF-1α、VEGF-A蛋白水平的改變，并用Transwell及M TT法檢測垂體腺瘤侵襲的改變。
　　結果：
　　1、垂體腺瘤中RSUME、SUMO-1、HIF-1α、VEGF-A的表達及相關性
　?。?）侵襲性垂體腺瘤中RSU

5、ME、HIF-1α、VEGF-A的mRNA表達水平及SUMO-1、HIF-1α、VEGF-A的蛋白表達水平明顯高于非侵襲性垂體腺瘤及正常垂體包膜組織（p＜0.05）。
　?。?）RSUM E通過促進SUMO-1與 HIF-1α的表達顯著正相關（r=0.687，p<0.05），HIF-1α的表達與VEGF-A顯著正相關（r=0.773，p<0.05）。
　　2、RSUME通過HIF-1α/VEGF通路在垂體腺瘤中的作用的機制<

6、br>　?。?）氯化鈷缺氧處理小鼠垂體腺瘤AtT-20細胞后，RSUME mRNA表達水平明顯升高（p＜0.05），而HIF-1α mRNA的表達水平無明顯改變（p＞0.05）；RSUME及HIF-1α蛋白的表達水平明顯升高。
　?。?）HIF-1α siRNA轉染AtT-20細胞后，與未轉染對照組及NC組相比，HIF-1α siRNA轉染組的mRNA及蛋白水平明顯下降（p＜0.05）；然而 RSUME mRNA和蛋白表達水平在三

7、組之間均無明顯變化。
　　（3）RSUME siRNA轉染AtT-20細胞后，與未轉染對照組及NC組相比，RSUME siRNA轉染組的mRNA水平明顯下降（p＜0.05），HIF-1α mRNA的表達水平三組之間無明顯變化；蛋白水平方面，與未轉染對照組及NC組相比，RSUM E s iRN A轉染組的蛋白水平明顯下降（p＜0.05），HIF-1α蛋白的表達水平也隨著相應下降（p＜0.05）。
　?。?）Transwell侵