OPN、MMP-9、和MVD與垂體腺瘤侵襲性的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：垂體腺瘤是一種臨床常見的良性顱內(nèi)腫瘤，發(fā)病率大約為1/10萬～7/10萬，約占顱內(nèi)腫瘤的10％-15％，僅次于膠質(zhì)瘤和腦膜瘤。垂體腺瘤一般呈局限性生長，但部分垂體腺瘤的生長可呈侵襲性，即侵襲性垂體腺瘤。侵襲性垂體腺瘤是指腫瘤生長侵襲周圍的硬膜、血管、神經(jīng)、海綿竇、鞍區(qū)骨質(zhì)等，手術(shù)全切除十分困難，導(dǎo)致術(shù)后腫瘤殘余和較高的復(fù)發(fā)率，患者預(yù)后較差。垂體腺瘤的侵襲性是針對垂體腺瘤治療上的一個熱點(diǎn)和難點(diǎn)。
　　 目前針對垂體腺瘤侵襲性

2、的診斷多依靠患者臨床癥狀，影像學(xué)檢查腫瘤有無破壞顱底骨質(zhì)、侵犯海綿竇、包繞頸內(nèi)動脈、視神經(jīng)受壓程度等，術(shù)中觀察有無侵犯硬膜、骨質(zhì)、視神經(jīng)、頸內(nèi)動脈等以及術(shù)中活檢硬膜或鞍區(qū)骨質(zhì)。但上述方法仍然存在較大的局限性，尤其腫瘤早期，瘤體較小的侵襲性垂體腺瘤，僅憑上述標(biāo)準(zhǔn)難以作出正確的診斷，而不能采取積極有效的綜合治療措施。
　　 骨橋蛋白（osteopontin，OPN）是一種磷酸化的分泌性蛋白，其受體包括整合素和CD34受體。大量研究證

3、實(shí)，OPN與許多腫瘤的大小、生長、浸潤、轉(zhuǎn)移和預(yù)后等有關(guān)，是一種新的腫瘤標(biāo)記物?；|(zhì)金屬蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9，MMP-9）是基質(zhì)金屬蛋白酶家族中分子量最大且最重要的蛋白酶，其底物主要有Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型膠原、明膠及彈性纖維組成。MMP-9能夠破壞細(xì)胞基底膜和細(xì)胞外基質(zhì)（ECM），維持ECM的生理動態(tài)平衡，從而促進(jìn)腫瘤的侵潤與轉(zhuǎn)移。在顱內(nèi)腫瘤尤其垂體腺瘤的發(fā)生及侵襲過程中起著重要作用，在判斷垂體腺

4、瘤的侵襲性方面具有也有特異性。腫瘤生長依賴于血管生成，微血管密度（microvessel density，MVD）計(jì)數(shù)被認(rèn)為是能反映腫瘤血管生成的一個指標(biāo)，也是反映腫瘤生物學(xué)行為的一個重要指標(biāo)。MVD與實(shí)體腫瘤的生長、復(fù)發(fā)及預(yù)后密切相關(guān)，MVD值增高提示預(yù)后往往不良。
　　 本試驗(yàn)應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測侵襲性垂體腺瘤和非侵襲性垂體腺瘤中OPN、MMP-9及MVD表達(dá)水平的差異，初步研究OPN、MMP-9、MVD三者與垂體腺瘤及

5、其侵襲性的關(guān)系，探討三者之間的相關(guān)性，為今后垂體腺瘤的診斷、治療及預(yù)后提供一條可能的新途徑。
　　 材料和方法：收集來自于2006年10月至2007年8月間河北醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院神經(jīng)外科手術(shù)切除的30例垂體腺瘤和3例腦外傷減壓術(shù)正常腦組織標(biāo)本。30例垂體腺瘤標(biāo)本中，女性19例，男性11例。年齡16～69歲，平均年齡42歲。依據(jù)術(shù)前影像學(xué)檢查及術(shù)中觀察腫瘤組織有無侵犯鄰近結(jié)構(gòu)，將30例垂體腺瘤分為侵襲性組17例，非侵襲性組13例

6、。
　　 應(yīng)用免疫組織化學(xué)S-P法對30例垂體腺瘤和3例正常腦組織標(biāo)本中OPN、MMP-9及MVD的表達(dá)分別進(jìn)行檢測，主要包括標(biāo)本固定、蠟塊包埋、組織切片；脫蠟和水化；抗原修復(fù)；滴加一抗；滴加二抗；脫水、透明、封片、鏡檢。
　　 實(shí)驗(yàn)測得數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±S）表示。應(yīng)用SPSS12.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，其中OPN、MMP-9分別采用Crosstabs Test（卡方檢驗(yàn)），MVD采用Independent-Samp

7、les TTest（獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)）。OPN、MMP-9之間的相關(guān)性采用Spearman等級相關(guān)分析。OPN與MVD、MMP-9與MVD之間的相關(guān)性分別作直線相關(guān)回歸分析，并用t檢驗(yàn)分別檢測其顯著性。檢驗(yàn)水準(zhǔn)：α=0.05。
　　 結(jié)果：OPN在正常腦組織中呈陰性表達(dá)，腫瘤細(xì)胞中OPN的表達(dá)主要定位于細(xì)胞胞漿，非侵襲性垂體腺瘤和侵襲性垂體腺瘤中均有表達(dá)，且侵襲性垂體腺瘤明顯高于非侵襲性垂體腺瘤（X2=6.652，P<0.01）；

8、MMP-9在正常腦組織中呈陰性表達(dá)，腫瘤細(xì)胞中MMP-9的表達(dá)主要定位在腫瘤細(xì)胞胞質(zhì)，MMP-9在侵襲性垂體腺瘤組中的表達(dá)明顯高于非侵襲性垂體腺瘤組（X2=8.167，P<0.01）；在腫瘤細(xì)胞中FactorⅧ抗體的陽性染色位于血管內(nèi)皮細(xì)胞上，侵襲性垂體腺瘤組的MVD計(jì)數(shù)顯著高于非侵襲性垂體腺瘤組（t=3.581，P<0.01）。在侵襲性垂體腺瘤中OPN與MMP-9的表達(dá)具有顯著相關(guān)性（rs=0.813，p<0.01）；侵襲性垂體腺瘤中

9、OPN表達(dá)與MVD計(jì)數(shù)之間具有顯著相關(guān)性（r=0.716，p<0.01）；同時(shí)侵襲性垂體腺瘤中MMP-9的表達(dá)與MVD計(jì)數(shù)也具有顯著相關(guān)性（r=0.783，p<0.01）。
　　 結(jié)論：侵襲性垂體腺瘤組與非侵襲性垂體腺瘤組在性別及平均年齡上無顯著差異：P>0.05。
　　 1、與非侵襲性垂體腺瘤相比，在侵襲性垂體腺瘤組中OPN、MMP-9均呈高表達(dá)且兩者之間有相關(guān)性，說明OPN、MMP-9共同參與了垂體腺瘤侵襲性，具有協(xié)

10、同作用。
　　 2、侵襲性垂體腺瘤組中MVD計(jì)數(shù)明顯高于非侵襲性垂體腺瘤組，提示垂體腺瘤的侵襲性與血管生成密切相關(guān)。侵襲性垂體腺瘤中OPN、MMP-9的表達(dá)與MVD計(jì)數(shù)呈正相關(guān)，提示OPN、MMP-9可能通過參與了腫瘤微血管的生成，從而促進(jìn)腫瘤的生長與侵襲。
　　 3、OPN、MMP-9、MVD與垂體腺瘤的侵襲性密切相關(guān)，一定程度上可作為評價(jià)垂體腺瘤侵襲性及其預(yù)后的輔助指標(biāo)，通過檢測手術(shù)切除的垂體腺瘤標(biāo)本中OPN、MMP