丁香苷的抗炎免疫作用及部分機(jī)制研究.pdf

1、炎癥是感染及許多疾病最基本的病理過(guò)程。臨床上常用的抗炎藥物主要有非甾體抗炎藥和甾體抗炎藥，其臨床療效顯著，但副作用頻見(jiàn)報(bào)道。炎癥和免疫在組織、細(xì)胞、分子水平上是緊密聯(lián)系不可分割的過(guò)程，故單獨(dú)應(yīng)用抗炎藥或免疫抑制藥或免疫增強(qiáng)藥治療慢性炎癥性疾病療效均不理想。因此，尋找低毒高效的新型抗炎免疫調(diào)節(jié)藥一直是藥物研究的一個(gè)重要領(lǐng)域。丁香苷(Syringin)是從刺五加根莖中提取分離得到的一種典型的酚苷類化合物，也是祖師麻、救必應(yīng)、天女木蘭、關(guān)東丁

2、香等中藥的主要成分，是藥材及其制劑含量測(cè)定的指標(biāo)成分之一。從其化學(xué)結(jié)構(gòu)分析，丁香苷的苷元為芥子醇，其衍生物屬于苯丙醇類物質(zhì)，具有抗氧化活性。目前丁香苷的研究多集中在含量測(cè)定方法的建立上，而對(duì)其生物活性的研究還較少。
　　 本課題采用多種急、慢性炎癥和免疫性炎癥模型，以及機(jī)體免疫藥理實(shí)驗(yàn)，研究丁香苷(Syringin)抗炎免疫作用并探討其部分作用機(jī)制。實(shí)驗(yàn)分為三個(gè)部分：
　　 1、丁香苷抗炎作用及部分機(jī)制研究
　　

3、 以阿司匹林作陽(yáng)性對(duì)照藥，觀察丁香苷對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹、醋酸致小鼠毛細(xì)血管通透性增加、角叉菜膠致大鼠足趾腫脹、棉球致大鼠肉芽腫的抗炎作用；同時(shí)測(cè)定角叉菜膠致大鼠炎足炎性滲出物中的PGE2、MDA和血清中的NO、SOD，初步探討丁香苷抗炎的部分機(jī)制。結(jié)果表明，丁香苷對(duì)急慢性炎癥反應(yīng)有明顯抑制作用，能明顯降低角叉菜膠致炎足炎性滲出物中PGE2、MDA和血清中NO含量，明顯提高血清中SOD的活性。因此，丁香苷具有較強(qiáng)的抗炎作用，其機(jī)制可能

4、與抑制PGE2、NO等炎癥介質(zhì)生成、增強(qiáng)自由基清除能力有關(guān)。
　　 2、丁香苷的免疫調(diào)節(jié)作用
　　 腹腔注射環(huán)磷酰胺復(fù)制免疫功能低下的動(dòng)物模型。采用碳廓清實(shí)驗(yàn)測(cè)定單核巨噬細(xì)胞吞噬功能；血清溶血素抗體生成實(shí)驗(yàn)、脾細(xì)胞溶血素生成實(shí)驗(yàn)測(cè)定體液免疫功能；MTT法檢測(cè)刀豆蛋白(ConA)和脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)，二硝基氟苯(dinitrofluorobenzene，DNFB)誘導(dǎo)遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(delayed-t

5、ypehypersensitivity，DTH)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蜏y(cè)定細(xì)胞免疫功能。結(jié)果表明，丁香苷可提高免疫低下小鼠的碳廓清指數(shù)K值，提高免疫低下小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能。丁香苷可提高免疫功能低下小鼠血清中和脾細(xì)胞溶血素水平，提高免疫低下小鼠的體液免疫功能。丁香苷可提高免疫低下小鼠的脾淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)，拮抗免疫低下小鼠耳腫脹度的減輕，使其接近正常水平，提高免疫低下小鼠的細(xì)胞免疫功能。這些結(jié)果提示丁香苷通過(guò)提高免疫低下小鼠非特異性免疫、體液免疫和細(xì)胞

6、免疫，而增強(qiáng)免疫低下小鼠的免疫功能。
　　 3、丁香苷對(duì)大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎的治療作用及機(jī)制
　　 采用大鼠足跖皮內(nèi)注射弗氏完全佐劑誘發(fā)大鼠AA模型。足容積法測(cè)量繼發(fā)側(cè)足腫脹度，進(jìn)行疼痛評(píng)分和多發(fā)性關(guān)節(jié)炎評(píng)分，MTT法檢測(cè)刀豆蛋白(ConA)和脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)，酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA)測(cè)定刀豆蛋白(ConA)誘導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞產(chǎn)生IL-2的水平以及脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的腹腔巨噬細(xì)胞(PMΦ)產(chǎn)生

7、IL-1β和TNF-α的水平。結(jié)果表明，大鼠致炎后第14天，繼發(fā)性關(guān)節(jié)炎出現(xiàn)，同時(shí)灌胃給予不同劑量的丁香苷及陽(yáng)性對(duì)照藥雷公藤多苷，連續(xù)給藥16天。丁香苷劑量組于第22天開(kāi)始不同程度降低AA大鼠繼發(fā)側(cè)關(guān)節(jié)腫脹度、關(guān)節(jié)疼痛評(píng)分、多發(fā)性關(guān)節(jié)炎指數(shù)；同時(shí)各劑量組可不同程度地提高AA大鼠低下的脾淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)和脾細(xì)胞IL-2的產(chǎn)生，降低AA大鼠PMΦ產(chǎn)生過(guò)高的IL-1β和TNF-α。這些結(jié)果提示丁香苷改善AA大鼠異常的細(xì)胞免疫功能，調(diào)節(jié)細(xì)胞因子