亞低溫聯(lián)合藥物后處理對谷氨酸誘導(dǎo)原代鼠皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的：1探討亞低溫聯(lián)合藥物后處理對大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。2比較亞低溫聯(lián)合依達(dá)拉奉與亞低溫聯(lián)合丙泊酚后處理的保護(hù)作用。
　　方法：取出生24小時(shí)以內(nèi)的新生SD乳鼠的腦皮質(zhì)細(xì)胞,體外培養(yǎng)至第七天隨機(jī)分為五組（每組取30例樣本）：A組（正常細(xì)胞對照組），B組（損傷細(xì)胞對照組），C組（亞低溫處理損傷細(xì)胞組），D組（亞低溫聯(lián)合依達(dá)拉奉處理損傷細(xì)胞組），E組（亞低溫聯(lián)合丙泊酚處理損傷細(xì)胞組）。B、C、D、E組第七天予以20

2、0μmol/L谷氨酸（GLU）損傷30 min，所有組換正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，C、D、E組再0.5 h后放入33℃、5％的二氧化碳溫箱中，同時(shí)D、E組予以對應(yīng)藥物后處理，孵育24小時(shí)后，所有組更換正常培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)24 h。細(xì)胞生長至第九天用ELISA法觀察c-fos蛋白含量、測定乳酸脫氫酶（LDH）漏出率、用MTT法測定神經(jīng)細(xì)胞存活率、用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率、在HE染色下用倒置相差顯微鏡觀察神經(jīng)組細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化和透視電鏡下細(xì)胞器的

3、改變。
　　結(jié)果：與損傷組比，亞低溫后處理組、亞低溫聯(lián)合依達(dá)拉奉后處理組、亞低溫聯(lián)合丙泊酚后處理組細(xì)胞存活率明顯升高[(0.43±0.04)%、(0.82±0.05)%、(0.70±0.05)%比(0.20±0.02)%]，細(xì)胞凋亡率[(2.31±0.40)%、(1.38±0.24)%、(1.90±0.32)%比(9.83±0.45)]、c-fos蛋白濃度[(3.94±0.45)%、(2.95±0.34)、(4.01±0.34)%

4、比(6.96±0.42)%]、LDH漏出率[(0.58±0.03)%、(0.53±0.02)%、(0.57±0.02)%比(0.67±0.03)%]均不同程度的降低（P<0.05或P<0.01）；細(xì)胞形態(tài)受損程度和神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)病變均減輕。三個(gè)后處理組中，以D組后處理組效果最佳，C組與E組在c-fos蛋白濃度、LDH漏出率兩組指標(biāo)中差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：亞低溫、亞低溫聯(lián)合依達(dá)拉奉、亞低溫聯(lián)合丙泊酚后處理對谷氨酸誘導(dǎo)的腦缺血