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1、廣東醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文苦參堿誘導(dǎo)人肺癌SPC-A-1細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究姓名:王云申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):內(nèi)科學(xué)(呼吸內(nèi)科)指導(dǎo)教師:龍發(fā)20050501苦參堿誘導(dǎo)人肺癌S P C .A .1 細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究中文摘要【目的】研究苦參堿對(duì)肺癌細(xì)胞S P C - A .1 細(xì)胞系的生長(zhǎng)抑制作用、機(jī)制及其相關(guān)凋亡基因F a s 、B c l .2 的變化。【方法】不同濃度苦參堿作用于體外培養(yǎng)人肺癌細(xì)胞株S P C - A - 1 ,使用光鏡
2、觀察細(xì)胞凋亡情況:利用倒置顯微鏡e I /H o e c h s t3 3 2 5 8 雙染結(jié)合熒光技術(shù)觀察細(xì)胞形態(tài):通過(guò)M T T 法測(cè)定細(xì)胞增殖的抑制率;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)其凋亡率、凋亡相關(guān)基因B c l - 2 、F a s 蛋白表達(dá)的改變?!窘Y(jié)果】在苦參堿作用4 8 小時(shí)后,2 5 0 u g /m l 、5 0 0 u g /m l 、7 5 0 u g /m l 、1 0 0 0 l a g /m l 、1 2 5 0 “g /
3、m l 、1 5 0 0 I a g /m l 的S P C —A - 1 細(xì)胞抑制率分別為I .3 0 %、6 .0 3 %、1 0 .6 7 %、1 5 .5 6 %、2 0 .0 6 %、3 4 .3 1 %( P < 0 .0 1 ) 。不同濃度的苦參堿處理人肺癌S P C .A 一1細(xì)胞后,光鏡下可見(jiàn)細(xì)胞由貼壁脫落,懸浮于培養(yǎng)液中,細(xì)胞變圓,體積縮小,核顏色加深,折光性增強(qiáng);熒光顯微鏡下可見(jiàn)到染色質(zhì)濃縮、邊集、碎裂;漉式
4、細(xì)胞儀檢測(cè)凋亡率隨濃度的升高而升高;隨著苦參堿濃度的升高,B c l 一2 的表達(dá)量減少、F a s 的表達(dá)量增加且呈劑量效應(yīng).【結(jié)論】不同濃度的苦參堿對(duì)S P C —A .1 細(xì)胞的生長(zhǎng)有一定抑制作用,在同一時(shí)間段隨藥物濃度的遞增而抑制作用加強(qiáng)??鄥A可誘導(dǎo)人肺癌細(xì)胞株S P C .A .1 細(xì)胞凋亡且呈劑量效應(yīng),其機(jī)制可能與降低B c l 一2 、升高F a s 等活性有關(guān)?!娟P(guān)鍵詞】苦參堿:人肺癌細(xì)胞株S P C .A .1 :細(xì)
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