白花丹參對缺血再灌注致腦損傷保護作用的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、泰山醫(yī)學院碩士學位論文白花丹參對缺血再灌注致腦損傷保護作用的研究姓名:王曉哲申請學位級別:碩士專業(yè):神經(jīng)生物學指導教師:白波張秋玲20090501公式計算ATPase活力。8內(nèi)皮型一氧化氮合酶(endothelialnitricoxidesynthase,eNOS)蛋白的表達:石蠟切片,免疫組織化學染色,顯微鏡下觀察eNOS的表達。9基質(zhì)金屬蛋白酶9(matrixmetalloproteinase9,MMP9)蛋白的表達:石蠟切片,免疫

2、組織化學染色,顯微鏡下觀察MMP9的表達。10內(nèi)皮抑素(endostatin,ES)蛋白的表達:石蠟切片,熒光免疫組織化學染色,激光共聚焦顯微鏡下觀察ES的表達。11腦血流量(cerebralbloodflowCBF)的檢測:激光多普勒血流儀(1aserflowmetryLDF)檢測各組術(shù)后3d大鼠海馬CAI區(qū)CBF占術(shù)前基礎(chǔ)CBF的百分比。12腦缺血再灌注后腦細胞線粒體跨膜電位(mitochondrialtransmembranepo

3、tential,一般用△’王,m表示)的測定:制備腦組織單細胞懸液,羅丹明123(rhodanminel23,Rhl23)染色,流式細胞儀(flowcytometryFCM)檢測細胞內(nèi)熒光強度,分析△甲m的變化。13半胱氨酸天冬酶3(cysteine—aspirateprotease3,Caspase3)蛋白的表達:石蠟切片,熒光免疫組織化學染色,激光共聚焦顯微鏡下觀察Caspase3的表達。14腦缺血再灌注后腦細胞凋亡發(fā)生率(thei

4、ncidenceofapoptosis)的測定:制備單細胞懸液,進行AnnexinVFITCPI雙染,通過FCM檢測細胞內(nèi)熒光強度,分析腦組織凋亡發(fā)生率的變化。結(jié)果1I/R組與sham組比較:腦缺血再灌注后腦組織SOD活力明顯降低(尸001);MDA含量明顯升高(P001);腦組織微量NaKATP酶的活性明顯降低(P001):eNOS表達明顯升高(P001);MMP9表達明顯上調(diào)(尸O01);ES表達明顯增加(尸O01);手術(shù)后海馬CA

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