丹參酮ⅡA對腎缺血再灌注損傷的保護作用及其機制研究.pdf

1、背景：缺血再灌注損傷(ischemia/reperfusion injury，IRI)是指缺血器官的損傷在恢復(fù)血供后反而加重和功能惡化的現(xiàn)象，可由諸多原因引起。腎臟由于其血流高灌注的特性，缺血再灌注損傷發(fā)生率較高。目前，研究認為，腎IRI的病理生理機制非常復(fù)雜，涉及炎癥反應(yīng)、細胞凋亡和氧化應(yīng)激損傷等。目前，研究表明丹參這一傳統(tǒng)中藥對心、肝、腦器官的缺血再灌注損傷有一定的保護作用。丹參酮ⅡA(TanshineⅡA TanⅡA)具有明確的分

2、子結(jié)構(gòu)，而且是丹參酮中含量最高，最為穩(wěn)定的有效活性成分，具有丹參的大部分藥物效應(yīng)。因此我們推測丹參酮Ⅱ A可能對。腎缺血再灌注損傷有保護作用。本課題針對丹參酮ⅡA對腎缺血再灌注損傷有無保護作用和其機制，進行初步的研究。
　　目的：本課題以丹參酮ⅡA為研究對象，評價其對腎缺血再灌注損傷的保護作用，以及丹參酮Ⅱ A通過何種機制而對腎缺血再灌注損傷起保護作用。
　　方法：雄性SD大鼠40只，體重200克-250克，隨機分為假手術(shù)組

3、(C)，腎缺血再灌注組(IR)，丹參酮Ⅱ A給藥1組(T1)，丹參酮Ⅱ A給藥2組(T2)，每組10只大鼠。
　　第一部分：觀察各組超微結(jié)構(gòu)，組織形態(tài)和腎功的變化。各組電鏡，HE染色，Cr檢測。
　　第二部分：觀察丹參酮ⅡA(TanshinoneⅡA TanⅡA)對腎缺血再灌注損傷氧化應(yīng)激途徑的影響。檢測各組MDA含量，SOD.GSH-Px，CAT活性變化。
　　第三部分：觀察丹參酮ⅡA(TanshinoneⅡA Ta

4、nⅡA)對腎缺血再灌注損傷凋亡途徑的影響。TUNEL法檢測各組細胞凋亡情況，RT-PCR和ELISA法檢測各組Bcl-2和Bax mRNA及蛋白表達量變化。
　　結(jié)果：
　　1.本課題電鏡結(jié)果顯示：T1和T2組與IR組比較，超微結(jié)構(gòu)明顯改善，證明了TanⅡA可以減輕腎超微結(jié)構(gòu)損傷。
　　2.本課題光鏡下觀察發(fā)現(xiàn)：T1和T2組與IR組比較，組織形態(tài)學(xué)明顯改善，Paller氏評分明顯降低(P<0.01)，證明了TanⅡA可

5、以減輕腎組織形態(tài)損傷。
　　3.本課題腎功Cr檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)：T1和T2組Cr水平顯著低于IR組(P<0.01)，證明TanⅡ A可以減輕腎臟功能損傷。
　　4.與IR組相比，T1和T2組的SOD，CAT和GSH-Px的活性明顯增高，而MDA水平顯著減少(表2.1-2.4)，表明TanⅡA由于增高了氧自由基清除酶SOD，CAT和GSH-Px活性，從而清除了IRI時增多的氧自由基，使氧自由基水平降低，其介導(dǎo)產(chǎn)生的MDA水平減少。

6、
　　5.與IR組比較，T1和T2組凋亡指數(shù)明顯減低(P<0.01)，因此證實了TanⅡA的抗凋亡作用，表明在腎缺血再灌注中，TanⅡA可以減少細胞凋亡的發(fā)生。
　　6.與IR組比較，T1和T2組Bcl-2 mRNA及蛋白表達增高(P<0.01，P<0.01)，BaxmRNA及蛋白表達降低(P<0.01，P<0.01)，因此T1和T2組Bax/Bcl-2蛋白比例降低(圖3.11)，T1和T2組細胞凋亡減少，與TUNEL結(jié)果符

7、合(圖3.2-3.4)。
　　結(jié)論：
　　1. TanⅡA可以減輕腎臟超微結(jié)構(gòu)，組織形態(tài)和功能的損傷，對腎缺血再灌注損傷具有保護作用。
　　2. TanⅡA通過增高SOD，CAT和GSH-Px活性，清除IRI時增多的氧自由基，使氧自由基水平降低，從而發(fā)揮其抗氧化效應(yīng)。
　　3. TanⅡA對大鼠腎臟IRI的保護作用與其抗氧化效應(yīng)有關(guān)。
　　4.TanⅡA可以通過提高Bcl-2 mRNA及蛋白表達，降低Bax