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1、目的:觀察姜黃素聯(lián)合中波紫外線輻射對(duì)人角質(zhì)形成細(xì)胞株(HaCaT細(xì)胞)凋亡的影響,以探討其在治療銀屑病中的作用及其可能的作用機(jī)制。 方法:首先應(yīng)用MTT法測(cè)定單用姜黃素對(duì)HaCaT細(xì)胞增殖的影響,流式細(xì)胞儀檢測(cè)HaCaT細(xì)胞凋亡率,分光光度法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)半胱氨酸天冬蛋白酶3(caspase-3)及半胱氨酸天冬蛋白酶9(caspase-9)活性的改變,再應(yīng)用上述方法分別檢測(cè)姜黃素聯(lián)合中波紫外線輻射對(duì)HaCaT細(xì)胞增殖、凋亡及細(xì)胞內(nèi)c
2、aspase-3、caspase-9活性的影響。 結(jié)果:①單用姜黃素處理HaCaT細(xì)胞時(shí):濃度小于2.5umol/L姜黃素處理HaCaT細(xì)胞細(xì)胞的增殖、凋亡、caspase-3及caspase-9的活性與正常對(duì)照組相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);濃度大于5umol/L的姜黃素處理細(xì)胞后細(xì)胞增殖受到抑制(P<0.05),細(xì)胞早期凋亡率升高(P<0.05),細(xì)胞內(nèi)caspase-3及caspase-9的活性增加(P<0.05
3、),且均與姜黃素有濃度依賴關(guān)系。②姜黃素聯(lián)合中波紫外線處理HaCaT細(xì)胞時(shí):濃度為1.25umol/L的姜黃素預(yù)處理HaCaT細(xì)胞后照射中波紫外線,細(xì)胞增殖較正常對(duì)照組下降明顯(P<0.05)細(xì)胞凋亡率由4.6096升高為12.61%;姜黃素濃度為10.0umol/L時(shí)細(xì)胞凋亡率可升高至38.42%;caspase-3及caspase-9的活性增加也更為明顯,且均與姜黃素有濃度依賴關(guān)系。⑨單用姜黃素組與相同濃度的姜黃素聯(lián)合中波紫外線組相
4、比,姜黃素聯(lián)合中波紫外線組細(xì)胞增殖抑制更為明顯,凋亡率上升也更為明顯,caspase-3及caspase-9的活性增加更為顯著,其差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論:較高濃度范圍的姜黃素處理HaCaT細(xì)胞,細(xì)胞增殖受到抑制,并可以通過激活caspase-3及caspase-9誘導(dǎo)HaCaT細(xì)胞凋亡;與單用姜黃素相比,較低濃度的姜黃素聯(lián)合中波紫外線輻射處理HaCaT細(xì)胞后細(xì)胞的增殖就受到明顯抑制,細(xì)胞的凋亡更為明顯,細(xì)胞內(nèi)caspase-
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