脊髓5-HT3受體在慢性神經(jīng)病理性痛中的作用.pdf

1、目的：觀察脊髓背角5-HT3受體在大鼠慢性神經(jīng)病理性疼痛中的表達變化，以及5-HT3受體拮抗劑昂丹司瓊對神經(jīng)病理性疼痛行為及5-HT3受體表達的影響，進而探討其在脊髓下行性痛覺調(diào)制系統(tǒng)中的作用。
　　方法：1.成年雄性SD大鼠隨機均分為3組:正常組(N)、假手術(shù)組(Sham)和模型組(CCI)。手術(shù)結(jié)扎模型組（CCI組）大鼠左側(cè)坐骨神經(jīng)，至結(jié)扎后7d，導(dǎo)致大鼠坐骨神經(jīng)慢性縮窄性損傷，制作慢性神經(jīng)病理性疼痛模型。坐骨神經(jīng)結(jié)扎后7d，

2、采用熱縮足反射潛伏期(TWL)和機械縮足反射閾值(MWT)行為學(xué)檢測各組大鼠痛覺閾值的改變，并采用免疫組織化學(xué)染色和Western blot方法分別檢測大鼠脊髓背角5-HT3受體的表達和蛋白的變化。2.成年雄性SD大鼠隨機均分為5組:正常大鼠+生理鹽水組(N+NS)、模型大鼠+生理鹽水組(CCI+NS)、模型大鼠+昂丹司瓊1μg組(CCI+C1)、模型大鼠+昂丹司瓊5μg組(CCI+C2)、模型大鼠+昂丹司瓊10μg組(CCI+C3)。

3、坐骨神經(jīng)結(jié)扎后7d，模型大鼠鞘內(nèi)分別給予3個劑量(1μg、5μg、10μg)的5-HT3受體拮抗劑昂丹司瓊，相應(yīng)對照組的大鼠鞘內(nèi)給予等體積的生理鹽水。然后采用熱縮足反射潛伏期（TWL）行為學(xué)實驗檢測大鼠鞘內(nèi)給藥后1h、3h、6h、12h、24h時痛覺閾值的變化，并采用免疫組織化學(xué)染色和Western blot方法分別檢測鞘內(nèi)給藥后大鼠脊髓背角中5-HT3受體表達和蛋白的變化。
　　結(jié)果：①行為學(xué)分析:模型組大鼠機械縮足反射閾值和熱

4、縮足反射潛伏期較N組和Sham組均明顯下降(P＜0.05)。模型大鼠在鞘內(nèi)注射3個劑量(1μg、5μg、10μg)昂丹司瓊后，三組大鼠的熱縮足反射潛伏期均有延長，隨著劑量增加潛伏期延長越明顯，且在鞘內(nèi)注射昂丹司瓊后3h時，3個劑量昂丹司瓊對大鼠的熱縮足反射潛伏期改善作用最顯著;而模型大鼠在鞘內(nèi)注射生理鹽水后的熱縮足反射潛伏期與正常對照組相比仍明顯縮短(P＜0.05)。②免疫組織化學(xué)染色:模型組大鼠脊髓背角5-HT3受體表達均高于N組和S

5、ham組(P＜0.05)。在鞘內(nèi)給藥后3h，鞘內(nèi)給予5μg和10μg昂丹司瓊后兩組大鼠脊髓背角5-HT3受體表達明顯減少，與N+NS組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);而鞘內(nèi)給予1μg昂丹司瓊組和給予生理鹽水組大鼠脊髓背角5-HT3受體表達仍高于N+NS組（P＜0.05）。③Western blot:模型組大鼠脊髓背角中5-HT3受體蛋白水平均高于N組和Sham組(P＜0.05)。在鞘內(nèi)給藥后3h，鞘內(nèi)給予5μg和10μg昂丹司瓊后