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1、目的:研究谷氨酰胺灌腸對(duì)重癥急性胰腺炎大鼠模型腸黏膜屏障的保護(hù)作用及機(jī)制。
方法:72只雄性SD大鼠,按照完全隨機(jī)的方法,分為重癥急性胰腺炎模型3h,6h和12h三個(gè)不同時(shí)點(diǎn)組(severe acute pancreatitis,SAP組,N=8),對(duì)照組(假手術(shù))3h,6h,12h不同時(shí)點(diǎn)組(Sham operation,Sham組,N=8)以及重癥急性胰腺炎模型谷氨酰胺干預(yù)3h,6h,12h不同時(shí)點(diǎn)組(SAP-G組,N
2、=8)。以逆行性的胰膽管內(nèi)注射5%的牛黃膽酸鈉誘導(dǎo)重癥急性胰腺炎大鼠模型;Sham組打開腹腔翻動(dòng)腸管,然后關(guān)腹;干預(yù)組于造模前半小時(shí)進(jìn)行谷氨酰胺灌腸(1ml/100g)。分別于術(shù)后3h,6h,12h殺死大鼠,進(jìn)行胰腺組織的病理學(xué)檢查;測(cè)定血漿中TNF-α和內(nèi)毒素,血清中二胺氧化酶(DAO)的水平;以Western blotting法檢測(cè)末段回腸黏膜細(xì)胞間緊密連接蛋白o(hù)ccludin的表達(dá);術(shù)后6h取回腸組織于電鏡下觀察超微結(jié)構(gòu)的改變。<
3、br> 結(jié)果:(1)光鏡下Sham組不同時(shí)點(diǎn)胰腺組織結(jié)構(gòu)未見改變,胰腺的小葉排列整齊,胰腺細(xì)胞形態(tài)正常;SAP不同時(shí)點(diǎn)組可見胰腺組織內(nèi)有不同程度的出血、壞死和炎癥細(xì)胞浸潤;而干預(yù)組胰腺病理損傷則較SAP組明顯減輕;(2)SAP各時(shí)點(diǎn)組血清中二胺氧化酶及血漿中TNF-α和內(nèi)毒素水平在3h開始升高,6h達(dá)峰值,12h開始下降。且均較Sham組顯著升高(p<0.01),而干預(yù)組各指標(biāo)則顯著低于SAP組(p<0.01),但較Sham組高,
4、差異有顯著性(p<0.01);(3)電鏡觀察發(fā)現(xiàn)Sham組大鼠回腸黏膜結(jié)構(gòu)完整;SAP組微絨毛高度較Sham組明顯下降;谷氨酰胺灌腸組顯示微絨毛高度較SAP組增高;(4)SAP組occludin蛋白表達(dá)較Sham組明顯減少(p<0.05),干預(yù)組較SAP組升高(p<0.05),但仍低于Sham組(p<0.05)。
結(jié)論:谷氨酰胺灌腸降低了血清中DAO的水平,減輕內(nèi)毒素血癥及胰腺組織的病理性損傷,從而顯著改善SAP大鼠腸黏膜
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