谷氨酰胺對(duì)重癥急性胰腺炎大鼠模型腸黏膜屏障的保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究谷氨酰胺灌腸對(duì)重癥急性胰腺炎大鼠模型腸黏膜屏障的保護(hù)作用及機(jī)制。
　　 方法：72只雄性SD大鼠，按照完全隨機(jī)的方法，分為重癥急性胰腺炎模型3h,6h和12h三個(gè)不同時(shí)點(diǎn)組（severe acute pancreatitis，SAP組，N=8），對(duì)照組（假手術(shù)）3h,6h,12h不同時(shí)點(diǎn)組（Sham operation，Sham組，N=8）以及重癥急性胰腺炎模型谷氨酰胺干預(yù)3h,6h,12h不同時(shí)點(diǎn)組（SAP-G組，N

2、=8）。以逆行性的胰膽管內(nèi)注射5％的牛黃膽酸鈉誘導(dǎo)重癥急性胰腺炎大鼠模型；Sham組打開腹腔翻動(dòng)腸管，然后關(guān)腹；干預(yù)組于造模前半小時(shí)進(jìn)行谷氨酰胺灌腸（1ml/100g）。分別于術(shù)后3h，6h，12h殺死大鼠，進(jìn)行胰腺組織的病理學(xué)檢查；測(cè)定血漿中TNF-α和內(nèi)毒素，血清中二胺氧化酶(DAO)的水平；以Western blotting法檢測(cè)末段回腸黏膜細(xì)胞間緊密連接蛋白o(hù)ccludin的表達(dá)；術(shù)后6h取回腸組織于電鏡下觀察超微結(jié)構(gòu)的改變。<

3、br>　　 結(jié)果:（1）光鏡下Sham組不同時(shí)點(diǎn)胰腺組織結(jié)構(gòu)未見改變，胰腺的小葉排列整齊，胰腺細(xì)胞形態(tài)正常；SAP不同時(shí)點(diǎn)組可見胰腺組織內(nèi)有不同程度的出血、壞死和炎癥細(xì)胞浸潤；而干預(yù)組胰腺病理損傷則較SAP組明顯減輕；（2）SAP各時(shí)點(diǎn)組血清中二胺氧化酶及血漿中TNF-α和內(nèi)毒素水平在3h開始升高，6h達(dá)峰值，12h開始下降。且均較Sham組顯著升高(p<0.01)，而干預(yù)組各指標(biāo)則顯著低于SAP組(p<0.01)，但較Sham組高，

4、差異有顯著性(p<0.01)；（3）電鏡觀察發(fā)現(xiàn)Sham組大鼠回腸黏膜結(jié)構(gòu)完整；SAP組微絨毛高度較Sham組明顯下降；谷氨酰胺灌腸組顯示微絨毛高度較SAP組增高；（4）SAP組occludin蛋白表達(dá)較Sham組明顯減少(p<0.05)，干預(yù)組較SAP組升高(p<0.05)，但仍低于Sham組(p<0.05)。
　　 結(jié)論：谷氨酰胺灌腸降低了血清中DAO的水平，減輕內(nèi)毒素血癥及胰腺組織的病理性損傷，從而顯著改善SAP大鼠腸黏膜