肝細(xì)胞生長因子對重癥急性胰腺炎小鼠腸黏膜屏障保護(hù)作用研究.pdf

1、目的：建立重癥急性胰腺炎（severe acute pancreatitis, SAP）小鼠模型；探討肝細(xì)胞生長因子(HGF)對 SAP小鼠腸黏膜屏障功能障礙修復(fù)作用及機(jī)理；進(jìn)一步了解腸道干細(xì)胞在黏膜損修復(fù)中的作用。
　　方法：健康雄性昆明小鼠60只，隨機(jī)分成3組：正常對照（NC）組,重癥急性胰腺炎（SAP）組，重組人肝細(xì)胞生長因子(rHGF)治療(SAP+rHGF)組。采用腹腔分次注射大劑量 L－精氨酸（2×2mg/g），兩次間

2、隔1h的方法制備 SAP模型。SAP+rHGF組制模后即腹腔注射 rHGF(150ug/Kg.d的劑量分兩次給藥)，連續(xù)應(yīng)用4次。NC組為腹腔注射等量無菌生理鹽水。自動生化分析儀測定小鼠血清淀粉酶，酶耦聯(lián)紫外分光光度法檢測血漿 D-乳酸水平，流式細(xì)胞儀檢測腸上皮細(xì)胞增殖指數(shù)，免疫組化染色法檢測小腸隱窩干細(xì)胞變化，腸系膜淋巴結(jié)、胰腺、肝臟及肺活體組織細(xì)菌培養(yǎng)，以及觀察胰腺和腸黏膜屏障病理改變。
　　結(jié)果：1、SAP組與 NC組比較，

3、血清淀粉酶值顯著升高，(828.50±67.35)U/dl vs(345.34±48.40)U/dl，P<0.001；SAP+rHGF組與SAP組比較，血清淀粉酶顯著下降，(476.46±52.50)U/dl vs(828.50±67.35)U/dl，P<0.001，與 NC組比較，顯著升高，(476.46±52.50)U/dl vs(345.34±48.40)U/dl，P<0.001。
　　2、胰腺病理結(jié)果：NC組未見明顯異常；

4、SAP組胰腺組織充血、水腫，間質(zhì)及腺泡小葉大量炎細(xì)胞浸潤；SAP+rHGF組較SAP組胰腺組織充血、水腫明顯減輕，炎細(xì)胞浸潤減少。
　　3、小腸病理檢查結(jié)果：NC組未見明顯異常；SAP組小腸絨毛壞死、脫落，排列紊亂，黏膜變薄，腸壁水腫、充血，黏膜下大量炎細(xì)胞浸潤。SAP+rHGF組腸絨毛形態(tài)基本完整，部分壞死，排列尚整齊，腸壁充血、水腫，炎細(xì)胞浸潤情況叫SAP組明顯減輕。
　　4、血清D-乳酸水平：SAP組與NC組比較血清D

5、-乳酸明顯升高，(11.17±1.90) ug/ml vs(4.87±0.73)ug/ml，P<0.001；SAP+rHGF組與SAP組比較明顯下降，(7.30±0.88)ug/ml vs(11.17±1.90)ug/ml，P<0.001。
　　5、器官細(xì)菌移位率：胰腺、腸系膜淋巴結(jié)、肝臟、脾臟、肺臟細(xì)菌培養(yǎng)器官移位率(培養(yǎng)陽性臟器數(shù)/培養(yǎng)臟器總數(shù))，SAP組與NC組比較明顯升高，50％vs14%，P<0.001；SAP+rHGF

6、組與SAP組比較器官細(xì)菌移位率下降，29%vs50%， P<0.001。
　　6、腸黏膜上皮細(xì)胞增殖指數(shù)（proliferation index,PI）：SAP組較NC組PI明顯下降，(2.84±1.68) vs(4.95±2.24)，P<0.05；SAP+rHGF組較SAP組PI明顯升高，(8.82±2.03) vs(2.84±1.68)，P<0.001；SAP+rHGF組與 NC組比較 PI明顯升高，(8.82±2.03) v

7、s(4.95±2.24)，P<0.001。
　　7、小腸隱窩干細(xì)胞數(shù)變化：SAP組與NC組比較小腸隱窩干細(xì)胞數(shù)明顯下降，(1.26±0.87) vs(2.16±0.90)，P<0.05； SAP+rHGF組與 SAP組比較明顯升高，(2.50±0.96) vs(1.26±0.87)，P<0.001；SAP+rHGF組與 NC組比較無明顯變化，(2.50±0.96) vs(2.16±0.90)，P=0.344。
　　結(jié)論：應(yīng)用