皮膚創(chuàng)口感染鉤體病模型建立及鉤體對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬的影響.pdf

1、鉤端螺旋體病是一種由致病性鉤端螺旋體感染引起的人獸共患病，在人類(lèi)和動(dòng)物中廣為流行。人主要是通過(guò)直接接觸被感染的動(dòng)物尿液或間接接觸被鉤端螺旋體污染的水源而被感染。通常鉤端螺旋體病侵入人體是通過(guò)破損的皮膚創(chuàng)口或完整的粘膜，進(jìn)入血液、淋巴液或沿組織間隙直接蔓延等多種途徑在機(jī)體內(nèi)播散。鉤端螺旋體病有多種臨床表現(xiàn)，輕者可表現(xiàn)為發(fā)熱、頭痛、腓腸肌壓痛、眼結(jié)膜充血、淋巴結(jié)腫大等，嚴(yán)重的鉤端螺旋體病患者可出現(xiàn)肺彌漫性出血、黃疸、肝腎功能衰竭等。目前鉤體

2、病發(fā)病機(jī)制尚未闡明。 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)復(fù)制鉤端螺旋體病模型一般是通過(guò)腹腔注射感染豚鼠或金黃地鼠，其感染途徑與自然感染途徑不同，可能在一定程度上影響了鉤端螺旋體病發(fā)病機(jī)制的研究。為了更好地模擬自然感染途徑，我們建立了皮膚創(chuàng)口感染鉤端螺旋體病豚鼠模型，比較致病性鉤端螺旋體賴(lài)型有毒株Lai株，賴(lài)型無(wú)毒株IPAV株所引起的豚鼠病變，并在體外觀(guān)察致病性鉤端螺旋體賴(lài)型有毒株Lai株、賴(lài)型無(wú)毒株IPAV株及非致病性鉤端螺旋體Patoc型Patoc Ⅰ

3、株的對(duì)豚鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響，綜合分析鉤體病的發(fā)病機(jī)制。 結(jié)果發(fā)現(xiàn)：有毒株Lai株皮膚創(chuàng)口感染豚鼠后72 h，豚鼠肺臟和后腹膜開(kāi)始輕度出血，感染后96 h，豚鼠出現(xiàn)典型鉤體病病變，表現(xiàn)為黃疸、彌漫性肺出血、腎出血和后腹膜出血等。感染后144h，豚鼠內(nèi)臟出血更加嚴(yán)重，2只發(fā)生口鼻涌血并且死亡。免疫組化顯示在肺、腎和后腹膜等出血部位可見(jiàn)大量鉤體分布。無(wú)毒株IPAV株感染豚鼠后各時(shí)間段未見(jiàn)明顯病變，免疫組化檢測(cè)在肺、腎等臟器也

4、未見(jiàn)鉤體抗原分布。有毒株Lai株和無(wú)毒株IPAV株均可引起感染創(chuàng)口炎細(xì)胞浸潤(rùn)，Lai株引起感染創(chuàng)口周?chē)つw和肌層炎細(xì)胞浸潤(rùn)，IPAV株則局限于感染創(chuàng)口及皮下組織。炎細(xì)胞浸潤(rùn)在感染后2～8 h以中性粒細(xì)胞為主，24 h以后主要以巨噬細(xì)胞為主，144 h后炎細(xì)胞逐漸消失。有毒株Lai株通過(guò)破損的皮膚創(chuàng)口感染豚鼠后，可在組織間隙繁殖并向周?chē)M織侵襲，感染24 h后可見(jiàn)感染創(chuàng)口及周?chē)M織出血，隨著時(shí)間延長(zhǎng)，出血逐漸向深層組織蔓延且逐漸嚴(yán)重，出血

5、部位炎細(xì)胞浸潤(rùn)不明顯。免疫組化顯示在感染創(chuàng)口及周?chē)M織出血部位毛細(xì)血管周?chē)写罅縇ai株鉤體分布，鉤體分布與組織出血在時(shí)間和空間上相吻合。透射電鏡可見(jiàn)毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)有大量Lai株鉤體，血管基膜損傷。內(nèi)臟出血處也可查見(jiàn)Lai株鉤體，且出血程度與鉤體分布有關(guān)。無(wú)毒株IPAV株不向周?chē)M織侵襲，不引起豚鼠出血，局部毛細(xì)血管周?chē)参匆?jiàn)鉤體聚集。透射電鏡可見(jiàn)巨噬細(xì)胞伸出偽足吞噬Lai株和IPAV株鉤體。體外研究發(fā)現(xiàn)豚鼠腹腔巨噬細(xì)胞對(duì)三種不同毒